Ultra-niedriger Rückstand universeller vorgemischter qPCR-Mix: Für eine präzise Erkennung von Pathogen in verschiedenen Anwendungen

Schlüsselwörter:

Geringe Rückstände, vorgemischt, universelles Multi-Target, Ein-Röhrchen, qPCR, hohe Empfindlichkeit.

Abstrakt:

Der neue qPCR-Mix der dritten Generation mit extrem geringen Rückständen, der zur Gewährleistung einer hohen Empfindlichkeit vorgemischt ist, unterstützt ein schnelles 30-Minuten-Protokoll und zeichnet sich durch Multiplex-Amplifikation in unterschiedlichsten Szenarien aus.

Hintergrund:

Kommerzielle molekulare Enzyme, die hauptsächlich durch rekombinante Expression in gentechnisch veränderten Stämmen (z. B. E. coli) hergestellt werden, enthalten häufig Reste genomischer Wirts-DNA. Faktoren wie die Herstellungsumgebung und menschliche Kontamination erhöhen die Wahrscheinlichkeit von DNA-Resten in diesen Enzymen zusätzlich. Dies kann zu einer ungenauen Quantifizierung von Wirtsnukleinsäurerückständen in Qualitätskontrollprodukten führen und Sicherheitsrisiken für die biopharmazeutische Produktion bergen. Beim Nachweis von Krankheitserregern könnten kontaminierte bakterielle Hintergrundnukleinsäuren die gering vorkommenden Zielnukleinsäuren überlagern oder mit ihnen miterfasst werden, was die Testgenauigkeit beeinträchtigt.

Gesamtlösung

Um Störungen durch Hintergrundbakterien und Nukleinsäurerückstände des Wirtes bei der Pathogenerkennung entgegenzuwirken, YEASEN Biotech hat eine einzigartige Technologie zur Kontrolle extrem geringer Rückstände entwickelt. Wir haben UCF.ME etabliert, eine ultrareine Produktionsstätte für molekulare Enzyme nach GMP-Standards und unter strikter Einhaltung des Qualitätsmanagementsystems ISO 13485 in allen Phasen. Dies umfasst strenge Kontrollen von Personal, Maschinen, Materialien (Reagenzien und Verbrauchsmaterialien), Prozessen, Umwelt und Standards. Durch die Integration effektiver technischer Maßnahmen, einer sauberen Produktionsumgebung und strenger Qualitätskontrollen ermöglichen wir die Großproduktion verschiedener UCF.ME^TMEnzyme mit extrem niedrigem Molekularrückstand.

Hieff Unicon^TM Pure Pro U+ qPCR-Mix(Eine Röhre）（Katze#16713ES）ist ein sorgfältig zusammengestellter universeller qPCR-Mix von YEASEN Biotech, das sich durch geringe Wirts-DNA-Rückstände auszeichnet. Dieses Produkt basiert auf einer neuen Generation eines universellen vorgemischten qPCR-Mixes (Kat.-Nr. 16713ES), der die restliche genomische DNA des Wirts effektiv kontrolliert (E. coli), während gleichzeitig die Restkonzentrationen gängiger pathogener Bakterien wie Pseudomonas aeruginosa und menschlicher Verunreinigungen kontrolliert werden. Da diese vorgemischte Lösung (Kat.-Nr. 16713ES) nicht nur die Konzentration pathogener Rückstände effektiv kontrolliert, sondern auch die Stabilität bei Mehrfachnachweisen und die Zielvielfalt berücksichtigt, verbessert sie wichtige Leistungsindikatoren wie die Sensitivität und Spezifität des Reagenzes. Sie verbessert die Nachweiseffizienz deutlich und kann vielseitig in Anwendungsszenarien wie dem Nachweis pathogener Mikroorganismen eingesetzt werden.

Produktvorteile

• Geringe Hintergrundrückstände – Kein Nachweis von Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa und genomischen DNA-Rückständen menschlichen Ursprungs in 48 Vertiefungen.
• Außergewöhnliche Stabilität vorgemischt: Stabil bei 37 °C bis zu 14 Tage, bei 4 °C bis zu 28 Tage und nach 50 Gefrier-Auftau-Zyklen.
• Hervorragende Reagenzienvielseitigkeit – Kompatibel mit einer Vielzahl von Multiplex-Primer-Probe-Sets (validiert für über 40 verschiedene Zieltypen), mit hervorragender Amplifikationsleistung.
• Hohe Sensitivität und Spezifität – Die Empfindlichkeit reicht für die Erkennung von 250 Kopien/ml, wobei die Spezifität gewährleistet, dass in 48 negativen Vertiefungen keine Peaks auftreten.
• Unterstützt schnelle Protokolle – Kompatibel mit Schnellprotokollen, Ergebnisse können in nur 30 Minuten erzielt werden.
• dUTP/UDG-Antikontaminationssystem – Enthält ein dUTP/UDG-Antikontaminationssystem, um eine Aerosolkontamination wirksam zu verhindern.
• Kompatibilität mit mehreren Plattformen und Systemen – Kompatibel mit Plattformen wie Bio-Rad CFX96, ABI Q5, 7500, Slan, Tianlong und anderen.

Leistungshöhepunkte

1. Extrem niedrige bakterielle Hintergrundrückstände

Basierend auf der Bewertung der bakteriellen Rückstände im Reagenzhintergrund ist die Verwendung von YEASEN'S Universal-P mit extrem geringen Rückständenneu gemischt qPCR-Mix (Cat#16713ES) und konventionelle Reagenzien (ohne Rückstandskontrolle) für NTC (No Template Control) Amplifikation in einem Escherichia coli (E. coli)-System, wobei 16713ES sowohl in Pseudomonas aeruginosa als auch in humanen genomischen DNA-Systemen eine NTC-Amplifikation erfährt. Die Ergebnisse zeigen, dass Cat#16713ES keine Amplifikation aufweist in 48 NTC-Wells, Dies weist auf vernachlässigbare DNA-Rückstände im Hintergrund (E. coli, P. aeruginosa und menschliche DNA) im Reagenz hin.

2. Hervorragende Stabilität der vollständig vorgemischten Vormischung

Basierend auf der Untersuchung der Stabilität der vorgemischt Das Reagenz, Kat.-Nr. 16713ES, wurde dreifach behandelt (4 °C, 37 °C und Gefrier-Tau-Zyklus). Die Versuchsgruppen wurden jeweils sieben Tage lang bei 4 °C und 37 °C behandelt und 50 Gefrier-Tau-Zyklen unterzogen. Die Stabilität wurde im Vergleich zur Kontrollgruppe (gelagert bei -20 °C) unter vier Multiplex-Amplifikationssystemen (Gruppen 1, 2 und 4 sind 4-fach-Amplifikationssysteme, Gruppe 3 ist ein 3-fach-Amplifikationssystem) bewertet. Einige Amplifikationsgruppen wurden zusätzlich nach 14 Tagen Beschleunigung bei 37 °C auf ihre Stabilität geprüft. Die Ergebnisse zeigten, dass die Ct-Wert-Abweichung (ΔCt-Wert) Die Abweichung zwischen den experimentellen und Kontrollreagenzien lag innerhalb von ±0,5, und die Fluoreszenzwertabweichung betrug innerhalb von 15 %, was darauf hinweist, dass YEASENDas vorgemischte Reagenz hat eine ausgezeichnete Stabilität in Multiplex-Verstärkung.

3. Hervorragende Reagenzienvielseitigkeit

Basierend auf der Untersuchung der vielseitigen Anwendungsszenarien des Reagenzes, YEASEN (Kat.-Nr. 16713ES) wurde zusammen mit mehreren herkömmlichen Reagenzien verwendet, um die Amplifikationsleistung unter verschiedenen Zielszenarien zu validieren. Die Ergebnisse zeigten, dass das Produkt eine gute Amplifikationsleistung bei einer Vielzahl von Zielen aufweist, darunter Krankheitserreger, menschliche Quellen und Pflanzen, was auf ein hohes Maß an Vielseitigkeit der Reagenzien.

4. Hervorragende Verstärkungsempfindlichkeit

Basierend auf einer Bewertung der Reagenzempfindlichkeit wurde eine Bewertung der Nachweisrate von Cat#16713ES in einem Multiplex-Amplifikationssystem (4-plex) unter Verwendung von Proben mit ultraniedriger Konzentration (250 Kopien/ml) durchgeführt. Die Ergebnisse zeigen, dass YEASEN's Cat#16713ES weist hervorragende Verstärkungsempfindlichkeitmit einer Nachweisgrenze von mindestens 250 Kopien/ml.

5. Kompatibilität mit mehreren schnellen Protokollen

Basierend auf der Untersuchung der Amplifikationsleistung des Schnellprotokolls des Reagenz wurden sieben Gradientenproben (1~10^6 Kopien/μL) sowohl mit konventionellen (1 Stunde und 6 Minuten) als auch mit Schnellprotokollen (30 Minuten) auf demselben quantitativen PCR-Instrument (ABI Q5) validiert. Die Ergebnisse zeigten, dass die Amplifikationseffizienz des Schnellprotokolls erhalten blieb über 99 %, und die Ct-Wert-Abweichung (ΔCt-Wert) zwischen dem konventionellen und dem schnellen Protokoll war innerhalb ±0,5, mit einer Fluoreszenzwertabweichung innerhalb von ±10 %und die Amplifikationskurven zeigte eine „S“-Form.

Gemeinsame Nutzung von IVD-Erkennungsreagenzien

Als Anbieter von Life-Science-Tools YEASEN Biotech liefert IVD-Unternehmen schon lange hochwertige und kostengünstige Rohstoffe. Neben universellen komplett vorgemischt qPCR/RT-qPCR Mastermixe bieten wir eine Vielzahl weiterer qPCR/RT-qPCR Nachweisreagenzien an, die IVD Unternehmenskunden befassen sich gemeinsam mit der effizienten Erkennung menschlicher Krankheitserreger und Tierkrankheiten.

Produkttyp	Produktfunktion	Produktname	Artikelnummer
qPCR-Mix	Brandneue, universelle, vollständig vorgemischte, hochempfindliche Lösung der 3. Generation für schnelle Tests	Hieff UniconTM Universal TaqMan Pro U+ qPCR Mix(Eine Röhre）	16710ES
	Hochempfindliches Universal (5-fache Konzentration)	Hieff UniconTM Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus）	13891ES
	2. Generation schnell, vollständig vorgemischt	Hieff UniconTM Superpro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix(UDG plus）	11827ES
	Wirtsfrei, ultra-niedrige Rest	Hieff UniconTM Purepro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix(UDG plus）	11853ES
	Hochempfindlich, universell, lyophilisierbar	Hieff UniconTM Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus）	11893ES
RT-qPCR-Mix	Hochempfindlicher universeller Schnellscanner	HifairTM C203P1 Multiplex One Step RT-qPCR-Sondenkit(UDG Plus）	16630ES
	fertig vorgemischtes Universal	HifairTM V Multiplex One Step RT-qPCR Sondenkit(UDG Plus）	11899ES
	Universell schnell lyophilisierbar	HifairTM Lyo Multiplex Ein-Schritt-RT-qPCR-Kit	11831ES