Hintergrund
Transferrin, auch als Transferrin (TRF, Tf) bekannt, ist für den Transport von Eisen verantwortlich, das vom Verdauungstrakt aufgenommen wird, sowie für das durch den Abbau der roten Blutkörperchen freigesetzte Eisen. Es gelangt in Form eines dreiwertigen Eisenkomplexes (Tf-Fe3+) ins Knochenmark, wo es zur Produktion reifer roter Blutkörperchen beiträgt. Transferrin ist hauptsächlich im Plasma vorhanden. Das Transferrin im Plasma versorgt die meisten Körpergewebe mit Eisen, während in Bereichen, die es nicht erreichen kann, das von diesen Geweben selbst synthetisierte Transferrin den Eisentransport im lokalen Bereich bewirkt.
Abbildung 1. Struktur von Transferrin
Menschliches Transferrin wird hauptsächlich in der Leber synthetisiert. Es ist ein einkettiges Glykoprotein, das aus zwei Lappen besteht, die sich am homologen N-Terminus und C-Terminus befinden. Menschliches Transferrin enthält 678 Aminosäurereste, einen isoelektrischen Punkt von 5,9 und ein Molekulargewicht von 76 kD. Jedes Molekül Transferrin kann 2 dreiwertige Eisenionen (Fe3+). Die Wechselwirkung zwischen Transferrin und Fe3+ hängt vom pH-Wert ab. Bei einem pH-Wert von 7,4 binden Transferrin und Fe3+ effizient, und bei saurem pH-Wert trennen sich die beiden.
Existenz
Holo-Transferrin, teilweise gesättigtes Transferrin, Apo-Transferrin
Funktionsmechanismen
Transferrin (Tf) bindet Eisen durch Interaktion mit seinem Rezeptor, dem Transferrin-Rezeptor 1 (TfR1). TfR1 ist ein Glykoprotein, das auf der Zelloberfläche exprimiert wird und aus zwei homodimeren Untereinheiten besteht, die durch Disulfidbrücken verbunden sind. Auf der Zelloberfläche interagiert Tf mit Fe3+, um Holo-Tf zu bilden, und bindet an den TfR1-Rezeptor, wodurch es unter Endozytose in das Endosom gelangt. In der sauren Umgebung des Endosoms trennt sich Fe3+ von Tf, und STEAP3 reduziert Fe3+ zu Fe2+, das durch den zweiwertigen Metallionentransporter 1 (DMT1) ins Zytoplasma transportiert wird. Anschließend bildet Tf, das Fe3+ freisetzt, einen Tf/TfR1-Komplex mit TfR1 und wandert durch Exozytose zurück zur Zelloberfläche. Auf der Zelloberfläche trennt sich Transferrin (Tf) vom Rezeptor TfR1, um zu Apo-Tf zu werden, und bindet sich dann erneut an Fe3+, um am Eisenzyklus teilzunehmen. Nachdem der gesamte Prozess abgeschlossen ist, werden Tf und TfR1 recycelt und treten in den nächsten Zyklus der zellulären Eisenaufnahme ein.
Abbildung 2. Mechanismusdiagramm des Transferrinzyklus[1]
Die Hauptfunktion von Transferrin
- Vermeiden Sie die Entstehung freier Radikale und schützen Sie das Zellwachstum.
- Antibakteriell, sterilisierend, entgiftend
- Aufrechterhaltung der Zellvermehrung und des Zellwachstums
- Fördert die extrazelluläre Speicherung und den Transport von Eisen
Transferrinquellen
| Quelle | Sicherheit | Chargenunterschiede | |
| Natürlich extrahiertes Transferrin | Extrakt aus menschlichem und bovinem Plasma | Mangelnde Sicherheit, das Endprodukt kann Krankheitserreger enthalten | Transferrin wird aus verschiedenen Chargen menschlichen oder Rinderserums extrahiert und seine Leistung variiert stark |
| Rekombinantes Transferrin | Exprimiert von prokaryotischen und eukaryotischen Zellen | Gute Sicherheit, das Endprodukt enthält keine Krankheitserreger | Jede Charge wird mit derselben Zelllinie exprimiert, mit stabiler Leistung |
Produkteigenschaften
Gute Sicherheit: Das Produkt hat mehrere Qualitätsprüfungen und Tests bestanden, sodass eine Kontamination durch Krankheitserreger vermieden wird.
Geringe Toxizität: Die Zytotoxizität ist sehr gering und hat keinen Einfluss auf nachfolgende Experimente;
Stabile Leistung: Jede Charge wird aus derselben Zelllinie exprimiert, mit minimalen Leistungsunterschieden und hoher Proteinreinheit
Einfache Bedienung: Geben Sie das Produkt einfach zur Basis hinzu;
Vielseitig einsetzbar: kann zur Kultivierung unterschiedlicher Zelltypen verwendet werden.
Häufig gestellte Fragen
F1: Sollte extrahiertes Transferrin oder rekombinantes Transferrin dem serumfreien Kulturmedium hinzugefügt werden?
A: Extrahiertes Transferrin weist Mängel auf, wie z. B. mangelnde Sicherheit und große Unterschiede zwischen den Chargen. Insbesondere wenn extrahiertes Transferrin einem serumfreien Kulturmedium für die Zellkultur zugesetzt wird, kann es menschliche oder tierische Krankheitserreger (wie das BSE-Virus, das Creutzfeldt-Jakob-Virus und andere unbekannte Krankheitserreger) in die Zellen bringen und diese kontaminieren. Rekombinantes Transferrin vermeidet die Möglichkeit einer Kontamination mit Krankheitserregern vollständig, daher sollte rekombinantes Transferrin einem serumfreien Kulturmedium zugesetzt werden.
F2: Sollte dem Kulturmedium eisengesättigtes (Holo-)Transferrin oder Apo-(Apo-)Transferrin hinzugefügt werden?
A: Wenn das Kulturmedium kein Eisen enthält oder der Eisengehalt niedrig ist, fügen Sie eisengesättigtes (Holo-)Transferrin hinzu; wenn das Kulturmedium reich an Eisen ist, wählen Sie Apo-Transferrin.
F3: Was ist besser, eisengesättigtes (Holo-)Transferrin oder Apo-(Apo-)Transferrin?
A: Es ist unmöglich, die Wirkung der beiden theoretisch abzuleiten, und es sind experimentelle Tests erforderlich.
F4: Wie hoch ist die Transferrinkonzentration im serumfreien Kulturmedium?
Antwort: Die Transferrinkonzentration hängt vom Zelltyp ab. Die spezifische Konzentration hängt vom Zellzustand, der Zellkonzentration und dem Versuchszweck ab.Allgemeine Primärzellen: 5–100 mg/l; Eierstockzellen des chinesischen Hamsters: 10–50 mg/l; Hybridom- und Verozellen: 5–20 mg/l
Bestellinformationen
| Produktname | Produktnummer | Spezifikation |
| 40102ES60/80 | 100 mg | |
| Rindertransferrin (HOLO) | 40103ES60/80 | 100 mg/1g |
| Menschliches Transferrin (aus menschlichem Plasma gewonnen) | 40133ES60/76/80 | 100 mg/500 mg/1g |
| 92288ES60/76/80 | 100 mg/500 mg/1g | |
| 92289ES60/76/80 | 100 mg/5 |