¿Qué es un anticuerpo secundario?
Un anticuerpo secundario es un anticuerpo que puede unirse a un anticuerpo primario. Se utiliza principalmente para detectar la presencia del anticuerpo primario. El anticuerpo primario se une específicamente al antígeno y el anticuerpo secundario se une específicamente al anticuerpo primario. En otras palabras, la región Fc o el fragmento Fab del anticuerpo primario puede actuar como un antígeno para estimular al cuerpo a producir anticuerpos. Es decir, el anticuerpo primario es principalmente inmunoglobulinas de clase IgG, por lo que el anticuerpo secundario es un anticuerpo anti-IgG.
El papel de los anticuerpos secundarios
El anticuerpo primario se une específicamente a la proteína diana y debe marcarse con una sustancia luminiscente o un grupo cromogénico. No es posible ver a simple vista si el anticuerpo primario unir la proteína. Sin embargo, el anticuerpo primario es relativamente específico y cada uno de ellos está marcado a un alto costo. Es común utilizar un anticuerpo secundario marcado que pueda unirse al anticuerpo primario y tenga una etiqueta detectable (como un grupo fluorescente, radiactivo, quimioluminiscente o cromogénico). Por lo tanto, el diseño actual generalmente tiene el anticuerpo secundario con una etiqueta detectable para detectar el anticuerpo primario, mientras que el anticuerpo primario reconoce el sustrato. De esta manera, cuando el anticuerpo primario se une al sustrato, puede detectarse a través del anticuerpo secundario.
Por ejemplo, el principio de luminiscencia ECL: En el sustrato ECL, hay H2Oh2 y luminol (y sus derivados), que emiten fluorescencia bajo la acción de la HRP (peroxidasa de rábano picante).
Puntos clave para el uso de anticuerpos secundarios
El anticuerpo secundario es un anticuerpo producido al inmunizar mamíferos (generalmente inmunizar cabras, caballos, burros, mulas y cobayas, etc.) con la inmunoglobulina IgG de un determinado subtipo de la especie del anticuerpo primario (como conejos, ratones), por lo que el anticuerpo secundario solo se une a una especie y subtipo específicos del anticuerpo primario. Por ejemplo, el anticuerpo antirratón de oveja (anticuerpo secundario) se unirá específicamente al anticuerpo monoclonal de ratón (anticuerpo primario) y no se unirá al anticuerpo policlonal de conejo ni al anticuerpo monoclonal de rata.
Marcas de acoplamiento de anticuerpos secundarios
Diferentes métodos experimentales darán como resultado diferentes grupos de acoplamiento para los anticuerpos secundarios, que son principalmente enzimas (peroxidasa de rábano picante/HRP y fosfatasa alcalina/AP), grupos fluorescentes (FITC, rodamina, PE, Dylight, Alexa Fluor, cy3, etc.), biotina, partículas de oro, etc. Generalmente, los anticuerpos secundarios marcados con HRP se recomiendan para experimentos como WB, ELISA, IHC, y los anticuerpos secundarios marcados con biotina se recomiendan para IHC, mientras que las etiquetas fluorescentes como Alexa Fluor 488, FITC, PE se utilizan para IF, FC, etc.
Cómo elegir el anticuerpo secundario adecuado
a. Inmunotransferencia (WB)
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Seleccione un anticuerpo secundario marcado con peroxidasa de rábano picante o fosfatasa alcalina para el Western blotting tradicional; elija un anticuerpo secundario marcado con el fluoróforo correspondiente para el Western blotting fluorescente.
b. Inmunohistoquímica (IHC/ICC)
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B. Para ICC (inmunocitoquímica), seleccione un anticuerpo secundario marcado con biotina.
C. Inmunofluorescencia (IHF/ICF)
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La inmunoprecipitación suele permitir la elección de utilizar un anticuerpo secundario específico de Fc o Fab. Estos anticuerpos secundarios pueden evitar la interferencia de la cadena pesada (peso molecular 55 kDa) o de la cadena ligera (peso molecular 25 kDa).
Información recomendada del producto
Grupo de etiquetas | Número de producto | Nombre del producto |
No notificado | 34850ES | IgG(H+L) de cabra anti-conejo |
34851ES | Anti-Mosue de cabra lgG(H+L) | |
34847ES | IgG(H+L) antihumana de burro | |
Programa de recursos humanos | 33101ES | Peroxidasa AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) |
33201ES | Peroxidasa AffiniPure Anti-IgG de cabra de ratón (H+L) | |
33301ES | Peroxidasa AffiniPure IgG de cabra anti-rata (H+L) | |
33401ES | Peroxidasa AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG(H+L) | |
33501ES | Peroxidasa de rábano picante IgG de cabra antihumana (H+L) | |
33701ES | Peroxidasa AffiniPure Anti-IgG de conejo de cabra (H+L) | |
33801ES | Peroxidasa AffiniPure Anti-IgG de conejo de oveja (H+L) | |
34201ES | Peroxidasa AffiniPure Donkey IgG anti-conejo (H+L) | |
34101ES | Peroxidasa AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG (H+L) | |
34301ES | Peroxidasa AffiniPure Donkey Anti-Goat IgG (H+L) | |
33101ES | Peroxidasa AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) | |
Fluorescencia verde | 33106ES | Anti-IgG de cabra anti-conejo YSFluor™ 488 (H+L) |
33126ES | Anti-IgG humana de cabra YSFluor™ 488 (H+L) | |
33206ES | Anti-IgG de cabra anti-ratón YSFluor™488 (H+L) | |
33306ES | Anti-IgG bovino de cabra YSFluor™ 488 (H+L) | |
33406ES | YSFluor™ 488 IgG anti-cobaya de cabra (H+L) | |
33706ES | YSFluor™488 Anti-IgG de conejo de cabra (H+L) | |
33906ES | Anti-IgG de conejo anti-ratón YSFluor™ 488 (H+L) | |
34906ES | YSFluor™488 IgG antioveja de burro (H+L) | |
34106ES | YSFluor™488 IgG antirratón de burro (H+L) | |
34206ES | YSFluor™488 IgG anticonejo de burro (H+L) | |
34306ES | YSFluor™ 488 IgG anti-cabra de burro (H+L) | |
34406ES | YSFluor™ 488 IgG antirata de burro (H+L) | |
34506ES | Burro YSFluor™488 Anti-IgG de cobaya (H+L) | |
34606ES | Burro YSFluor™488 Anti-IgG de pollo (H+L) | |
34706ES | YSFluor™488 IgY(H+L) antipollo de conejo | |
34806ES | Anti-IgG humana de burro YSFluor™488 (H+L) | |
34856ES | FITC AffiniPure Anti-IgG humana de cabra (H+L) | |
33107ES | Anti-IgG de cabra anti-conejo FITC-AffiniPure (H+L) | |
33207ES | FITC-AffiniPure Anti-IgG de cabra de ratón (H+L) | |
33307ES | FITC-AffiniPure IgG de cabra anti-rata (H+L) | |
33707ES | FITC-AffiniPure Anti-IgG de Conejo de Cabra (H+L) | |
33807ES | FITC-AffiniPure Anti-IgG de Conejo de Oveja (H+L) | |
Rodamina | 33109ES | Rodamina (TRITC) IgG de cabra anti-conejo (H+L) |
33209ES | Rodamina (TRITC) IgG de cabra antirratón (H+L) | |
33709ES | Rodamina (TRITC) AffiniPure Conejo Anti-IgG de Cabra (H+L) | |
33210ES | Rojo rodamina X (RRX) IgG de cabra antirratón (H+L) | |
Fluorescencia naranja | 33112ES | Anti-IgG de cabra anti-conejo AffiniPure YSFluor™594 (H+L) |
33212ES | Anti-IgG de cabra anti-ratón YSFluor™ 594 (H+L) | |
33222ES | Anti-IgG humana de cabra YSFluor™ 594 (H+L) | |
33412ES | YSFluor™594 IgG anti-cobaya de cabra (H+L) | |
33312ES | Anti-IgG bovino de cabra YSFluor™ 594 (H+L) | |
33712ES | YSFluor™594 Anti-IgG de conejo de cabra (H+L) | |
33812ES | YSFluor™ 594 IgG antioveja de conejo (H+L) | |
33912ES | Anti-IgG de conejo anti-ratón YSFluor™594 (H+L) | |
34712ES | YSFluor™594 IgY antipollo de conejo (H+L) | |
34112ES | YSFluor™ 594 IgG antirratón de burro (H+L) | |
34212ES | YSFluor™594 IgG anticonejo de burro (H+L) | |
34312ES | YSFluor™ 594 IgG anti-cabra de burro (H+L) | |
34412ES | YSFluor™ 594 IgG antirata de burro (H+L) | |
34512ES | Burro YSFluor™594 Anti-IgG de cobaya (H+L) | |
34612ES | Burro YSFluor™594 Anti-IgG de pollo (H+L) | |
34812ES | Anti-IgG humana de burro YSFluor™594 (H+L) | |
34912ES | YSFluor™594 IgG antioveja de burro (H+L) | |
33208ES | Anti-IgG de cabra anti-ratón Cy3-AffiniPure (H+L) | |
33308ES | Anti-IgG de cabra anti-rata Cy3-AffiniPure (H+L) | |
33708ES | Cy3-AffiniPure Anti-IgG de Conejo de Cabra (H+L) | |
33808ES | IgG de conejo anti-oveja Cy3-AffiniPure (H+L) | |
34855ES | IgG(H+L) anti-cabra de burro Cy3-AffiniPure | |
Fluorescencia roja | 33113ES | Anti-IgG de cabra anti-conejo YSFluor™647 (H+L) |
33213ES | Anti-IgG de cabra anti-ratón YSFluor™ 647 (H+L) | |
33223ES | Anti-IgG humano de cabra YSFluor™647 (H+L) | |
33313ES | Anti-IgG bovino de cabra YSFluor™ 647 (H+L) | |
33413ES | YSFluor™ 647 IgG anti-cobaya de cabra (H+L) | |
33713ES | Anti-IgG de conejo de cabra YSFluor™ 647 (H+L) | |
33813ES | YSFluor™647 Anti-IgG de conejo (H+L) de oveja | |
33913ES | Anti-IgG de conejo anti-ratón YSFluor™ 647 (H+L) | |
34713ES | YSFluor™647 IgY antipollo de conejo (H+L) | |
34113ES | YSFluor™ 647 IgG antirratón de burro (H+L) | |
34213ES | YSFluor™ 647 IgG anticonejo de burro (H+L) | |
34413ES | YSFluor™ 647 IgG antirata de burro (H+L) | |
34813ES | Anti-IgG humana de burro YSFluor™647 (H+L) | |
34913ES | YSFluor™647 IgG antioveja de burro (H+L) |
Referencias
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