La angiogénesis está estrechamente relacionada con la cicatrización de heridas, la inflamación, la artritis reumatoide, la retinopatía diabética, la degeneración macular y el crecimiento de tumores. Durante el crecimiento de un organismo, la angiogénesis es una parte importante del crecimiento de tejido nuevo. En la edad adulta, a excepción de los eventos periódicos que están estrictamente regulados en órganos especiales, casi todos los tejidos normales carecen de una gran cantidad de angiogénesis fisiológica debido al equilibrio entre los factores endógenos proangiogénicos y antiangiogénicos. Cuando el equilibrio se altera en la dirección de promover la angiogénesis, las células endoteliales microvasculares (CE) cambiarán a un fenotipo angiogénico, iniciando así una respuesta angiogénica, que puede eliminarse o acelerarse.
En el estudio, los métodos experimentales tradicionales de angiogénesis in vivo incluyen microbolsas corneales, mesenterio, implantes de esponja/matriz, análisis de disco (DAS), pez cebra, etc. Sin embargo, estos experimentos no solo son técnicamente exigentes, costosos y consumen mucho tiempo, sino que también implican cuestiones éticas. En comparación con los experimentos de angiogénesis in vivo, es más económico y práctico utilizar una matriz especial para mantener la angiogénesis celular in vitro. La matriz de mantenimiento del crecimiento celular más utilizada es una preparación soluble de membrana basal extraída de tumores de ratón EHS: gel de matriz.
Los componentes principales del gel matriz son la laminina, el colágeno tipo IV, el proteoglicano de heparán sulfato (HSPG) y la nestina, y también contiene factores de crecimiento como TGF-beta, EGF, IGF, FGF, activador tisular del plasminógeno y otros factores de crecimiento contenidos en los tumores EHS. Proporciona soporte, resistencia a la tracción y soporte de andamiaje para tejidos y células, y también puede servir como una subestructura tridimensional para la adhesión y el movimiento celular, así como un reservorio para factores de crecimiento, quimiocinas y citocinas. También puede actuar como una señal para la morfogénesis y la diferenciación celular. Yeasen ha desarrollado y producido CeturegelMT. El gel matriz, que no contiene LDEV (virus que eleva la lactato deshidrogenasa), tiene un contenido de endotoxinas ultrabajo y se ha probado para detectar micoplasma a fin de garantizar que no haya contaminación por micoplasma. Incluye diferentes tipos de gel matriz, como concentración básica, alta concentración y bajo factor de crecimiento.
Características del producto
Alta seguridad: Virus potenciador de la lactato deshidrogenasa (LDEV) libre
Versatilidad de concentración: Rango de concentración de 8~20 mg/mL
Buena estabilidad del lote: Estricto proceso de producción y control de calidad para garantizar un rendimiento estable entre lotes.
Bajo contenido de endotoxinas: contenido de endotoxinas ≤4 EU/mL
Detección de contaminantes: no se detectaron residuos de micoplasmas, bacterias y hongos.
Experimento de angiogénesis
- Preparación del gel de matriz
1) Un día antes del experimento, retire el Ceturegel.MT. Saque el gel matriz del congelador y colóquelo en el refrigerador a 4 °C durante la noche para que se derrita y enfríe previamente los consumibles utilizados.
2) Colocar el CeturegelMT. Matrix Gel en una caja de hielo en todo momento antes del experimento.
3) Abra el paquete de esterilización de los portaobjetos angiogénicos y retire los portaobjetos.
4) Añadir 10 μl de CeturegelMT. Matrix Gel en cada pocillo, teniendo cuidado de que la punta de la pistola quede perpendicular a la parte superior del pocillo interior al agregar CeturegelMT. Gel de matriz para evitar que el gel de matriz fluya a través del pozo superior y deje gel residual.
- Gel
1) Primero, cubra el portaobjetos con una tapa y prepare una placa Petri de 10 cm colocando una toalla de papel empapada en agua para hacer una caja húmeda.
2) Coloque el portaobjetos en la placa de Petri y cubra la tapa.
3) Coloque toda la placa de Petri en un recipiente con CO2 incubadora y dejarla unos 30 minutos para esperar a que se condense el gel, mientras se prepara la suspensión celular.
- Propagación celular
1) Prepare las células digeridas en una suspensión celular con una densidad de 2×105 células/ml y mezclar bien.
2) Retire los portaobjetos de vasos sanguíneos que contengan vasos sanguíneos que se hayan solidificado formando gel.
3) Agregue 50 μl de suspensión celular a cada pocillo, teniendo cuidado de mantener la punta de la pistola perpendicular a la parte superior del pocillo superior y sin tocar el gel en el pocillo inferior.
4) Agregue el medio de cultivo celular, cubra y deje reposar, después de un tiempo, todas las células se hundirán y caerán sobre la superficie del gel matriz.
- Adquisición de imágenes
Observe, tome fotografías y conserve imágenes regularmente de acuerdo con la tasa de crecimiento celular.
- Presentación de resultados
Nota:Resultados de angiogénesis y fluorescencia
Recomendación de producto
| Ácido pseudolárico | Inúmero de sistema | norteforma |
| 40183ES08/10 | 5/10 ml | |
| 40184ES08/10 | 5/10 ml | |
| 40185ES08/10 | 5/10 ml | |
| Ceturegel™ Matriz de filtración glomerular， Rojo fenol libre，Libre de LDEV | 40186ES08/10 | 5/10 ml |
| 40187ES08/10 | 5/10 ml | |
| Ceturegel™ Matriz de alta concentración，Rojo fenol libre，Libre de LDEV | 40188ES08/10 | 5/10 ml |
| 40190ES08/10 | 5/10 ml | |
| Ceturegel™ Matriz para cultivo de organoides，Rojo fenol libre，Libre de LDEV | 40191ES08/10 | 5/10 ml |