1 El mecanismo de acción de la blasticidina S
Blasticidina S es un antibiótico nucleósido extraído de Streptomyces griseochromogenes, que inhibe específicamente la síntesis de proteínas en células procariotas y eucariotas al interferir con la formación de enlaces peptídicos en el ribosoma. Su mecanismo de acción incluye bloquear la hidrólisis del peptidil-ARNt inducida por factores de liberación y mejorar la unión del ARNt a la subunidad ribosómica grande, inhibiendo así la formación de enlaces peptídicos hasta cierto punto.
La blasticidina S tiene un modo de acción rápido y potente, y concentraciones muy bajas de antibióticos pueden provocar una muerte celular rápida. No sólo tiene una inhibición significativa de la síntesis de proteínas en bacterias y eucariotas, sino que también es activa contra hongos, nematodos y células tumorales. La blasticidina S se utiliza a menudo para analizar células transfectadas que portan genes bsr o BSD.
2 Aplicación de Blasticidina S
2.1 Cultivo y cribado de células
- Células de mamíferos: Blasticidina S se utiliza a menudo para examinar células transfectadas que portan genes bsr o BSD. Estos genes de resistencia, de B. cereus y Aspergillus respectivamente, fueron capaces de convertir la murancidina en derivados avirulentos, lo que permitió la eliminación selectiva de células sin genes de resistencia, con concentraciones de trabajo de Blasticidina S en células de mamíferos que oscilaban entre 1 y 50 μg/mL.
| doana | GRAMOenus | Ohorganización | domedio de cultivo | Concentración de Blasticidina S (μg/mL) |
| HeLa | Humano | Útero | DMEM | 3-10 |
| HEK293 | Humano | Riñón | DMEM | 3-10 |
| B16 | Ratón | Melanoma | RPMI | 3-10 |
| PC1.0 | Hámster | Adenocarcinoma | RPMI | 10-30 |
| Chorro | Hámster | Ovario | DMEM | 5-15 |
- Selección bacteriana: En el cultivo bacteriano, la concentración recomendada de 25-100 µg/mL puede provocar rápidamente la muerte de células sin genes de resistencia.
E. coli es ligeramente menos sensible a la blasticidina S, pero los transformantes son tolerantes a la blasticidina S y pueden analizarse con un medio LB bajo en sal (pH 8) en un rango de concentración de 50-100 μg/mL de blasticidina S, y un pH alto mejora la actividad de la blasticidina S.
- Células vegetales: también aplicables a experimentos de transferencia de genes en células vegetales, bsr y BSD se utilizan comúnmente como marcadores de detección.
2.2 Investigación sobre la síntesis de proteínas
- La blasticidina se utilizó para estudiar el proceso de síntesis de proteínas a nivel de formación de enlaces peptídicos, especialmente en células HEK293-T y células HEK-D5 de construcciones TLR-2.
2.3 Propiedades antifúngicas
- También tiene cierta actividad antifúngica, que puede utilizarse para la prevención y el tratamiento del tizón del arroz. Su efecto bactericida afecta principalmente a la síntesis de proteínas y puede inhibir la germinación de esporas, el desarrollo de hifas y la formación de esporas.
2.4 Otras aplicaciones
- La blasticidina también se ha utilizado para estudiar el efecto inhibidor de las células tumorales.
- También actúa como agente de selección para células transformadas que contienen el gen de resistencia bls, bsr o BSD.
3 procedimientos experimentales relacionados con la blasticidina S (selección de transfectantes estables en mamíferos)
1) La blasticidina S se utiliza normalmente en una concentración de 10 μg/ml. Las células se transfectan con plásmidos que portan el gen bsr o BSD y se incuban en un medio de crecimiento normal que contiene blasticidina S para seleccionar transfectantes estables.
2) A las 48 horas posteriores a la transfección, pase las células en medio fresco que contenga una concentración adecuada de Blasticidina S (Nota: los antibióticos funcionan mejor cuando las células están en una fase de división activa. La eficiencia de los antibióticos disminuye si la densidad celular es demasiado alta. Al dividir las células, la confluencia no debe superar el 25%).
3) Cada 3-4 días, retire el medio usado y agregue medio fresco que contenga el antibiótico.
4) Después de 7 días, verifique la formación de colonias de células. Según el tipo de célula huésped y la eficiencia de transfección/selección, la formación de colonias puede requerir una semana adicional o más.
5) Transferir de 5 a 10 clones resistentes a placas de cultivo celular de 35 mm y mantener en medio selectivo durante 7 días. Posteriormente, realizar ensayos de citotoxicidad para comprobar su eficacia.
4 Recomendación de producto
Biotecnología de Yeasen Blasticidina S (60218ES) Está disponible en dos formas: polvo (1 g) y solución (10 mg/mL).
| Nombre del producto | Gato# | Especificación | Apariencia |
| Blasticidina S Número de serie: 3513-03-9 | 60218ES10 | 10 mg | Solución (10 mg/ml) en HEPES Tampón, pH 7,5) |
| 60218ES50 | 5×10 mg | ||
| 60218ES60 | 10×10 mg | ||
| 60218ES80 | 1 gramo | Polvo (preparar una solución madre de 5-10 mg/ml con agua estéril o tampón al utilizarlo) |
5 Artículos publicados con nuestros reactivos
[1] Mo J, Tan K, Dong Y, Lu W, Liu F, Mei Y, Huang H, Zhao K, Lv Z, Ye Y, Tang Y. Focalización terapéutica del impulsor oncogénico EWSR1::FLI1 en el sarcoma de Ewing mediante la inhibición del complejo FACT. Oncogene. Enero de 2023;42(1):11-25. doi: 10.1038/s41388-022-02533-1. Publicación electrónica 10 de noviembre de 2022. PMID: 36357572. (SI:8.0)
[2] Tan K, Mo J, Li M, Dong Y, Han Y, Sun X, Ma Y, Zhu K, Wu W, Lu L, Liu J, Zhao K, Zhang L, Tang Y, Lv Z. El ciclo de retroalimentación positiva SMAD9-MYCN representa una dependencia única para el neuroblastoma amplificado por MYCN. J Exp Clin Cancer Res. 20 de diciembre de 2022;41(1):352. doi: 10.1186/s13046-022-02563-3. PMID: 36539767; PMCID: PMC9764568.(SI:11.3)
6 Productos relacionados
| Nombre del producto | Gato# | Especificación |
| Clorhidrato de ciprofloxacino | 60201ES05/25/60 | 5/25/100 g |
| Ampicilina, sal sódica | 60203ES10/60 | 10/100g |
| Hiclato de doxiciclina | 60204ES03/08/25 | 1/5/25 g |
| Cloranfenicol, grado USP | 60205ES08/25/60 | 5/25/100 g |
| Sulfato de kanamicina | 60206ES10/60 | 10/100g |
| Clorhidrato de tetraciclina Clorhidrato de tetraciclina (USP) | 60212ES25/60 | 25/100g |
| Clorhidrato de vancomicina | 60213ES60/80/90 | 100 mg/1 g/5 g |
| Sal de sulfato de gentamicina | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 g |
| Clorhidrato de espectinomicina | 60215ES08 | 5g |
| Fleomicina (20 mg/mL en solución) | 60217ES20/60 | 20/5 × 20 mg |
| Blasticidina S (Blasticidina) | 60218ES10/60 | 10/10 × 10 mg |
| Nistatina | 60219ES08 | 5g |
| Sulfato G418 (geneticina) | 60220ES03/08 | 1/5g |
| Puromicina (solución 10 mg/ml) | 60209ES10/50/60/76 | 1×1 /5 ×1 / 1 0 ×1 /50 ×1 ml |
| Diclorhidrato de puromicina | 60210ES25/60/72/76/80 | 25/100/250/500 mg/1 g |
| Higromicina B (50 mg/ml) | 60224ES03 | 1 g (20 ml)/10×1 g (20 ml) |
| Higromicina B | 60225ES03/10 | 1/10g |
| Eritromicina | 60228ES08/25 | 5/25 g |
| Tiempo | 60230ES07/32 | 3,2/10×3.2 gramos |
| Aureobasidina A (AbA) | 60231ES03/08/10 | 1/5 × 1/10 × 1 mg |
| Sulfato de polimixina B | 60242ES03/10 | 1/10 MU |