Detección, prevención y eliminación de micoplasma: ¡todo en un solo paso!

Micoplasma

El micoplasma, también conocido como micoplasma, es el procariota más pequeño y simple descubierto hasta la fecha, con un diámetro de 0,1 a 0,3 μm. Puede atravesar filtros y presenta un alto pleomorfismo, presentándose en diversas formas, como esférica, bacilo, filamentosa y ramificada. En los laboratorios y la producción biofarmacéutica, los cultivos celulares son propensos a la contaminación por micoplasma. Según la literatura, la incidencia de contaminación por micoplasma en líneas celulares almacenadas es de aproximadamente el 15 % al 35 %, y en la industria biofarmacéutica, oscila entre el 0,44 % y el 6,70 %. ^[1].

Figura 1: Morfología de Mycoplasma

Impacto de la contaminación por micoplasma

La contaminación bacteriana y fúngica es relativamente fácil de detectar, prevenir y eliminar, pero la contaminación por micoplasmas es difícil de detectar. Incluso con densidades de crecimiento de hasta 10^7-10^9 UFC/ml, puede que no haya signos evidentes de contaminación (como turbidez o cambios de pH). La contaminación por micoplasmas puede provocar diversos cambios en las células (véase la Figura 2).

Figura 2: Cambios en los estados celulares después de la contaminación por micoplasma

Escenarios de aplicación para la detección de micoplasmas

Fuentes típicas de contaminación por micoplasma

• Contaminación cruzada entre células;
• Contaminación del ambiente de trabajo o de los equipos experimentales;
• Mala técnica aséptica por parte del experimentador;
• Contaminación de medios de cultivo u otros reactivos;
• Contaminación del tejido u órgano original utilizado para la preparación de células.

Qué hacer cuando los cultivos celulares se contaminan con micoplasma

Figura 3: Solución total para la contaminación por micoplasma

Solución tres en uno para la contaminación celular por micoplasma

1. Detección de micoplasmas

Detección isotérmica de micoplasma en un solo paso:

YeasenEl reactivo isotérmico de un solo paso para la detección de micoplasmas utiliza una tecnología única de amplificación isotérmica, que ofrece una mayor discriminación de colores, desde azul violeta (negativo) hasta azul cielo (positivo), lo que facilita la identificación visual. Incluye componentes anticontaminación para eliminar falsos positivos.

Figura 4: Proceso operativo de detección de micoplasma en un solo paso

Detección de micoplasma basada en PCR:

YeasenEl método de detección de micoplasma por PCR se diferencia de la PCR convencional de un solo paso al utilizar tres pares de cebadores en lugar de uno, dirigiéndose a las regiones conservadas 16S y 23S del micoplasma para la amplificación por PCR anidada. Esto mejora significativamente la sensibilidad y reduce la inespecificidad, detectando incluso una sola copia de micoplasma.

Figura 5: Imagen de electroforesis en gel de la amplificación por PCR de muestras con diferentes concentraciones de micoplasma

Figura 6: Imagen de electroforesis en gel de la amplificación por PCR de muestras con diferentes concentraciones de micoplasma

Tabla 1: Tipos de micoplasma detectables por YeasenReactivo isotérmico de detección de micoplasma en un solo paso

Nota: La sección azul indica los tipos de micoplasma detectables mediante métodos de detección isotérmica de un paso y PCR.

2. Reactivo de eliminación de micoplasma MycAway (1000×)

El reactivo de eliminación de micoplasma MycAway (1000×) es una fórmula mixta que elimina eficazmente el micoplasma inhibiendo la síntesis de ADN y proteínas esenciales para su crecimiento, sin dañar las células. Recupera al máximo las células y reduce las pérdidas por contaminación por micoplasma.

Figura 7: Demostración del efecto de eliminación celular

Características del reactivo de eliminación de micoplasma:

• Baja toxicidad: Citotoxicidad mínima, no afecta experimentos celulares posteriores. como pruebas de viabilidad celular y transfección;
• Alta estabilidad:Puede almacenarse a -20 °C durante períodos prolongados manteniendo su eficacia;
• Fácil de usar:Simplemente agregue el producto al medio de cultivo contaminado con micoplasma e incube;
• De acción rápida:Resultados visibles en tan sólo 3 días;
• Amplio espectro: Eficaz contra la mayoría de los tipos de micoplasmas de laboratorio.

Figura 8: Diagrama de la prueba de citotoxicidad del reactivo de eliminación de micoplasma

3. Prevención del micoplasma

Producto Información

categoría	Nombre del producto	N.º de gato.	Presupuesto
Detección	MycAway™ - Kit de detección de micoplasma en un solo paso a color	40612ES25/60	25/100 T
	Kit de detección qPCR en tiempo real de MycAway™ Mycoplasma	40618ES25/60	25/100 T
	Kit de prueba de micoplasma GMyc-PCR	40601ES10/20	Ensayos 10/20
Eliminación	MycAway™ Spray (listo para usar)	40605ES02/03	1/2×500 mL
	Tratamiento MycAway™ (1000×) - Reactivo para la eliminación de micoplasmas	40607ES03/08	1/5×1 mL
Prevención	MycAway™ Profiláctico (2000×) - Reactivo para la prevención de micoplasmas	40608ES03/08	1/5×1 mL
	Solución MycGuard™ -1 (100 unidades)	40609ES60	100 ml
	Solución MycGuard™-2 (500 unidades)	40610ES60	100 ml