La clonación molecular se utiliza en casi todos los laboratorios. Las endonucleasas de restricción son un componente crucial en los experimentos de clonación molecular, pero a menudo también surgen diversos problemas con los experimentos de endonucleasas de restricción. Los problemas más comunes son los siguientes:

• Hay tantos tipos de endonucleasas de restricción que es difícil elegir.
• Escisión errónea, escisión aleatoria o escisión enzimática incompleta.
• El ritmo de la digestión es lento; puede tardar una hora o incluso toda la noche.
• Además, los experimentos de digestión enzimática múltiple también necesitan elegir una variedad de digestión enzimática bTo

Para demostrarle que tiene un conocimiento más profundo de las endonucleasas de restricción, a continuación se explicará brevemente qué son las endonucleasas de restricción y cómo se clasifican las distintas endonucleasas en respuesta a la primera pregunta. ¡La serie Yeasen FuniCut™ de endonucleasas de restricción rápidas puede resolver fácilmente los problemas segundo a cuarto mediante la modulación de la tensión y un procedimiento mejorado!

1. ¿Qué es la endonucleasa de restricción?
2. Restricciones de la nomenclatura de endonucleasas
3. Restricciones a la clasificación de las endonucleasas
4. Endonucleasas de restricción rápida Yeasen FuniCut™

1. ¿Qué es la endonucleasa de restricción?

Las endonucleasas de restricción son una clase de enzimas que pueden reconocer secuencias de nucleótidos específicas en moléculas de ADN de doble cadena y cortar el enlace fosfodiéster en las cadenas de ADN en sitios específicos.

Diferentes endonucleasas de restricción reconocerán diferentes secuencias de ADN. Pueden cortar el ADN dentro de la secuencia de reconocimiento o en un lugar no muy alejado de la secuencia de reconocimiento, lo que da como resultado varios productos, como se ilustra en la Figura 1. BamHI forma extremos pegajosos, KpnI forma extremos pegajosos 3' y EcoRV forma extremos romos.

Figura 1. Diagrama esquemático de la digestión con BamHI, KpnI y EcoRV

2. Restricciones de la nomenclatura de endonucleasas

El nombre del género, el nombre de la especie, la cepa bacteriana o el serotipo y el orden de descubrimiento son los factores principales que se utilizan para nombrar las endonucleasas de restricción. Las pautas para nombrarlas se muestran en la Tabla 1 a continuación, utilizando BstEII como ejemplo:

Tabla 1. Nomenclatura de endonucleasas de restricción

3.Restricciones en la clasificación de las endonucleasas

Según la complejidad de la estructura, el modo de acción y la diferencia entre los cofactores, las enzimas de restricción se pueden dividir en cuatro categorías. La siguiente tabla 2 resume las características y enzimas típicas de cada categoría.

Tabla 2. Variaciones entre varias endonucleasas de restricción

Como se indica en la Tabla 3 a continuación, también se puede dividir en tres grupos según las similitudes y diferencias entre los sitios de reconocimiento y digestión.

Tabla 3.Análisis comparativo de isosquizómero, neoesquizómero e isocaudarner

En vista del hecho de que algunas endonucleasas de restricción en el mercado aún requieren digestión durante la noche, y los productos son propensos a una digestión incorrecta, la nucleasa de endonucleasa de restricción rápida Yeasen, un tampón universal, completa una digestión precisa en 5 minutos, lo que permite que sus experimentos de digestión no tengan más problemas.

4. Yeasen FuniCut™ Endonucleasas de restricción rápida