Solución global para la detección del virus de la viruela del mono de YEASEN
El primer caso confirmado de viruela del mono se informó en el Reino Unido a principios de mayo y rápidamente se extendió a países y regiones no endémicos. Hasta el 21 de septiembre de 2022, se han confirmado 106 países y regiones en todo el mundo, con un total de 63.117 casos. El 16 de septiembre, Chongqing confirmó un caso importado de viruela del mono, el primer caso en China continental, lo que despertó preocupación social.
Figura 1. Mapa mundial del brote de viruela del simio de 2022 (de los CDC)
1. ¿Qué es la viruela del mono?
2. La historia de la viruela del mono
3. Cómo se propaga
4. Signos y síntomas
5. Método de detección
6. Correspondencia de productos
7. Pedido de productos
1. ¿Qué es la viruela del mono?
El virus de la viruela del simio es un virus de ADN bicatenario con una longitud total de aproximadamente 197 kb. Pertenece al género Orthopoxvirus de la familia Poxviridae. Virus). Hay dos ramas del virus de la viruela del simio (rama de África occidental y rama de la cuenca del Congo). Entre ellas, la tasa de letalidad de la rama de África occidental es de aproximadamente el 3,6%, y la tasa de letalidad de la rama de la cuenca del Congo puede alcanzar el 10,6%. Muestras de casos de viruela del simio encontrados en áreas no endémicas desde mayo de 2022, el análisis de secuenciación mostró que el clado de África occidental[1].
Figura 2. Imagen de la viruela del mono (fotografía del CCDC)
2. La historia de la viruela del mono
La viruela del mono se descubrió en 1958 cuando se produjeron dos brotes de una enfermedad similar a la viruela en colonias de monos criados para investigación. A pesar de que se la denomina “viruela del mono”, la fuente de la enfermedad sigue siendo desconocida. Sin embargo, los roedores africanos y los primates no humanos (como los monos) podrían albergar el virus e infectar a las personas.[2].
El primer caso humano de viruela del simio se registró en 1970. Antes del brote de 2022, se habían notificado casos de viruela del simio en personas de varios países de África central y occidental. Anteriormente, casi todos los casos de viruela del simio en personas fuera de África estaban relacionados con viajes internacionales a países donde la enfermedad es común o a través de animales importados. Estos casos se produjeron en varios continentes.[2].
3. Cómo se propaga
Puede transmitirse de animales a humanos, de humanos a humanos y del medio ambiente a humanos.
Actualmente, está claro que la viruela del simio puede infectar a los humanos de tres maneras: una es de animales infectados a personas. El virus puede ingresar al cuerpo a través de heridas en la piel, las vías respiratorias o las membranas mucosas (ojos, nariz o boca). La segunda se transmite a través del contacto cercano entre personas, incluidas las relaciones sexuales, los besos, los abrazos o el contacto con partes del cuerpo infectadas por la viruela del simio, y el contacto con ropa, ropa de cama, toallas o vajilla contaminadas con el virus y otros elementos que también pueden estar infectados. La tercera es la transmisión por gotitas respiratorias.[3].
4. Signos y síntomas
Las principales manifestaciones clínicas son fiebre, exantema y linfadenopatía.
Los síntomas más comunes en la etapa inicial incluyen fiebre, dolor de cabeza, dolores musculares e inflamación de los ganglios linfáticos. La erupción aparece entre 1 y 3 días después de la aparición de la enfermedad. La erupción típica aparece primero en la cara y se extiende gradualmente a las extremidades y otras partes. La erupción es principalmente centrífuga., las erupciones en la cara y las extremidades son más comunes que en el tronco, pueden aparecer erupciones en las palmas y plantas de los pies, y el número de erupciones varía de varias a miles; también puede afectar la mucosa oral, el tracto digestivo, los genitales, la conjuntiva y la córnea.
Los síntomas suelen durar entre 14 y 21 días y los pacientes suelen resolverlos por sí solos. Es posible que queden eritema o hiperpigmentación o incluso cicatrices después de que se caigan las costras. Vale la pena señalar que la costra sigue siendo contagiosa hasta que se cae y se forma una nueva capa de piel debajo.[3].
5. Método de detección
Para prevenir y controlar eficazmente la epidemia de viruela del mono y evitar que el virus se importe y se propague, las empresas de diagnóstico in vitro globales han respondido activamente. Como proveedor de materias primas para la producción de reactivos de detección de diagnóstico in vitro YEASEN ofrece una solución completa para detectar eficazmente el virus de la viruela del simio. Desde la extracción de ácidos nucleicos hasta los componentes reactivos (reactivos enzimáticos y pseudovirus) y kits semiacabados (sondas de cebador, reactivos enzimáticos y controles de plásmidos), YEASEN puede suministrarle de manera estable.
Figura 3. Método de detección de virus
5.1 Ventajas del método
- Operación eficiente y conveniente: un conjunto de kits, que incluye todos los componentes, sin operaciones engorrosas, adición en un solo paso
- Alta sensibilidad de detección: método de anticuerpos genéticamente modificados con enzima Taq de inicio en caliente, también se pueden detectar 1 copia/reacción
- Fuerte estabilidad del reactivo: se almacena a 37 ℃ durante 1 semana, rendimiento estable después de congelaciones y descongelaciones repetidas.
- Prevención de la contaminación por UDG: el sistema dUTP/UDG se agrega al sistema para prevenir eficazmente el riesgo de contaminación por aerosoles.
- Aplicable a múltiples plataformas: adecuado para Bio-Rad CFX96, ABI Q5 y Slan
5.2 Coincidencia de productos
- Reactivos de extracción de ácidos nucleicos: MolPure™ Kit de hisopado magnético para ADN/ARN viral (n.° de cat. 18300ES)
- Reactivo de detección de viruela del mono: Kit de PCR cuantitativa en tiempo real para detectar el virus de la viruela del mono(Cat. n.° 13862ES/Cat. n.° 13863ES)
- Pseudovirus de la viruela de los monos: Pseudovirus del virus de la viruela de los monos (Cat#12099ES/Cat#12100ES)
6. Productos recomendados
6.1 Kit de PCR cuantitativa en tiempo real para detectar el virus de la viruela del mono (Cat. n.° 13862ES)
Ventajas del producto:
Operación eficiente y conveniente
Alta sensibilidad y buena especificidad.
Súper estabilidad
Buena repetibilidad
6.1.1 Caso de muestra:
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Súper estabilidad térmica para 37 ℃
El MPXV se amplificó colocando el Cat#13862ES a 37℃ durante 7 días. Los resultados mostraron que el valor Ct y el valor de fluorescencia no se vieron afectados significativamente por 7 días a 37℃, y la estabilidad térmica fue fuerte.
Figura 4. Verificación de estabilidad acelerada de 7 días a 37 ℃ de Yeasen (Cat. n.° 13862ES)
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Súper estabilidad ante congelamiento y descongelamiento
El MPXV se amplificó mediante la congelación y descongelación de Cat#13862ES a -20℃ durante 10, 20 y 50 veces, respectivamente.Los resultados mostraron que la congelación y descongelación 10 veces, 20 veces y 50 veces a -20 ℃ no tuvo un efecto significativo en el valor Ct y el valor de fluorescencia, y la estabilidad de congelación y descongelación fue fuerte.
Figura 5. Verificación de estabilidad de congelación y descongelación a 20 ℃ de Yeasen (Cat. n.° 13862ES)
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Sensibilidad ultra alta, también se pueden detectar 1 copia/μL
Utilizando el producto de viruela del mono de Yeasen (Cat#13862ESES), se utilizaron 1000 copias/μL, 100 copias/μL, 10 copias/μL, 1 copia/μL y blanco negativo (NTC) para detectar MPXV. Se puede ver que también se puede detectar una sola copia (el valor Ct es de alrededor de 38), y se repitió la prueba de NTC de 48 pocillos, con una línea base estable, picos de NTC negativos y sin fenómeno de cola, con alta sensibilidad y alta especificidad.
Figura 6. Detección de sensibilidad MPXV
Figura 7. Detección de especificidad de MPXV
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Los reactivos son estables y reproducibles
Se seleccionó el kit de detección de viruela del mono de Yeasen (Cat#13862ESES) para realizar 10 pruebas repetidas para concentraciones bajas, medias y altas de muestras positivas. Los resultados mostraron que el CV de las muestras positivas en el canal FAM fue menor o igual al 2%, y el control en blanco no tuvo picos ni fenómenos de colas, buena repetibilidad.
Figura 8. Prueba de repetibilidad
6.2 Kit de PCR cuantitativa en tiempo real para detectar el virus de la viruela del mono (UDG Plus)(Cat. n.° 13863ES)
Ventajas del producto:
⑴ Operación eficiente y conveniente
⑵ Alta sensibilidad y buena especificidad
⑶ Súper estabilidad
⑷ Buena repetibilidad
⑸ Prevención de la contaminación de la UDG
6.2.1 Caso de muestra:
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Súper estabilidad térmica para 37 ℃
El MPXV se amplificó colocando Cat#13863ES a 37℃ durante 7 días y 14 días, respectivamente. Los resultados muestran que después de 7 días y 14 días a 37℃, no hay un efecto significativo en el valor Ct y el valor de fluorescencia, y la estabilidad térmica es fuerte.
Figura 9. Verificación de estabilidad acelerada de 7 y 14 días a 37 ℃ de Yeasen (Cat. n.° 13863ES)
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Súper estabilidad ante congelamiento y descongelamiento
El cat. n.° 13863ES se congeló y descongeló a -20 ℃ durante 50 veces para amplificar el MPXV. Los resultados mostraron que la congelación y descongelación a -20 ℃ durante 50 veces no tuvo un efecto significativo en el valor de Ct y el valor de fluorescencia, y la estabilidad de la congelación y descongelación fue fuerte.
Figura 10. Verificación de estabilidad de congelación y descongelación a -20 ℃ de Yeasen (Cat#13863ES)
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Alta sensibilidad y especificidad
Se analizaron 5 copias/μL de MPXV y un blanco negativo (NTC) utilizando el producto de viruela del simio de Yeasen (Cat#13863ESES). Los resultados mostraron que la línea base era estable, la tasa de detección de FAM era del 100%, el límite de detección mínimo era de 5 copias/μL y durante la prueba repetida de 48 pocillos de NTC, la línea base de los canales FAM y VIC era estable, el pico negativo de NTC no tenía ningún fenómeno de cola y tenía alta sensibilidad y alta especificidad.
Figura 11. Detección de sensibilidad MPXV
Figura 12. Detección de especificidad de MPXV
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Buena linealidad de los reactivos
La plantilla positiva se diluyó 10 veces a partir de la concentración de 1×105 copias/μL, y se utilizó el kit de qPCR de viruela del mono de Yeasen (Cat#13863ES) para repetir la detección dos veces. El logaritmo del número de copias inicial es la abscisa y el valor Ct es la ordenada. Se realizó la curva estándar y los resultados mostraron que el canal FAM del gen de la viruela del mono tenía un rango lineal de 10~1×105 copias/μL y R2>0,99, lo que tenía una buena relación lineal.
Figura 13. Prueba de linealidad
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Reactivos estables y reproducibles
Se seleccionó el kit de qPCR de viruela del mono de Yeasen (Cat#13863ES) para realizar 10 pruebas repetidas para concentraciones bajas, medias y altas de positivo, y 20 pruebas repetidas para control negativo (NC) y control en blanco (NTC). Los resultados muestran que: canal FAM El CV de las muestras positivas es inferior al 3%, y el control negativo y el control en blanco no presentan picos ni fenómenos de cola; los valores de Ct del canal VIC NC son todos inferiores a 35, el CV es inferior al 0,3%, y el NTC no presenta picos ni fenómenos de cola, y la repetibilidad es buena.
Figura 14. Prueba de repetibilidad (FAM)
Figura 15. Prueba de repetibilidad (VIC)
7. Pedido de productos
Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd., fundada en 2014, es una empresa de alta tecnología dedicada a la investigación y desarrollo y producción de materias primas enzimáticas y anticuerpos antigénicos. Sus productos incluyen enzimas, proteínas y anticuerpos de diagnóstico molecular utilizados en productos farmacéuticos, pruebas de seguridad alimentaria, cría, justicia y otras industrias. Estamos comprometidos a proporcionar a los clientes en el campo de las ciencias biológicas productos y servicios de alta calidad. Las pautas de compra de productos para el virus de la viruela del mono son las siguientes:
Tabla 1.Productos relacionados
Tipo de producto | Producto Descripción | Producto Nombre | Número de artículo | Especificación |
EQUIPO | Mezcla de enzimas | Kit de PCR cuantitativa en tiempo real para detectar el virus de la viruela del mono (consultar) | 13862ES03 | 24T |
13862ES48 | 48T | |||
13862ES59 | 96T | |||
Kit de PCR cuantitativa en tiempo real para detectar el virus de la viruela del mono | 13863ES25 | 25T | ||
13863ES60 | 100 toneladas | |||
13863ES80 | 1000 toneladas | |||
Pseudovirus | Gen F3L | Virus de la viruela del mono F3L-Pseudovirus (consultar) | 12099ES03 | 1 ml |
12099ES08 | 5 × 1 ml | |||
B6R Gene | Virus de la viruela del simio B6R-Pseudovirus (preguntar) | 12100ES03 | 1 ml | |
12100ES08 | 5 × 1 ml |
Referencias
[1] Centro Chino para el Control y la Prevención de Enfermedades: Consejos de salud sobre la viruela del mono
[2] CDC:Acerca de la viruela del mono | Viruela del mono | Virus de la viruela | CDC
[3] Yulin Evening News: ¡Se ha identificado la fuente del primer caso de viruela del mono en China continental! Recordatorio de emergencia de control de enfermedades de Guangxi