La tecnología de amplificación isotérmica de ácidos nucleicos (INAAT) se utiliza principalmente en biología molecular para identificar y analizar ácidos nucleicos. Se utiliza principalmente para ADN, ARN, proteínas celulares, iones, moléculas, etc. INAAT proporciona un diagnóstico rápido, sensible y preciso de enfermedades genéticas e infecciosas. Sus productos amplificados se pueden utilizar en biosensores, bioimágenes y biomedicina. Además, INAAT se utiliza para detectar diversas enfermedades como la gripe, el VIH, la tuberculosis, la clamidia, la gonorrea (CT/NG), la hepatitis A y la hepatitis B, etc. Según la tecnología, la amplificación isotérmica se puede dividir en LAMP, RPA, CPA, SDA, RCA, HDA, etc. Entonces, ¿qué es LAMP? ¿Cuáles son las ventajas de RT-LAMP?

1. ¿Qué es LAMP?
2. ¿Cuáles son las ventajas de RT-LAMP?
3. ¿Cuáles son las características del "Cat#13762"? Kit de ensayo de colorante RT-LAMP (UDG plus)"?
4. ¿Cuáles son las características del “Kit de colorante sensible al pH RT-LAMP Cat#13906”?
5. ¿Se puede liofilizar en perlas liofilizadas?
6. ¿Qué productos podemos recomendar?

1. ¿Qué es LAMP?

LAMP es actualmente una tecnología ampliamente utilizada en el campo de la amplificación isotérmica. Utiliza de 4 a 6 cebadores que pueden identificar 6 regiones específicas en el gen objetivo y se basa en la fuerte actividad de desplazamiento de cadena de la ADN polimerasa Bst. La amplificación interna del producto objetivo puede alcanzar 10⁹-10¹⁰ Existen muchos métodos de detección LAMP, incluidos el método de colorante, el método colorimétrico de pH, el método de turbidez, HNB, calceína, etc. El método de fluorescencia y los kits de detección de pH recientemente desarrollados por nuestra empresa tienen una alta sensibilidad, buena aplicabilidad de cebadores y un excelente rendimiento en especificidad, tolerancia y estabilidad. En comparación con productos similares, tiene ventajas obvias.

2. ¿Cuáles son las ventajas de RT-LAMP?

Fácil de operar: tiempo de reacción corto, bajos requisitos de entorno de laboratorio, se puede utilizar con chips microfluídicos o detectores portátiles para una detección rápida;
Sensibilidad: 50 copias/T, sistema de 25 μL;
Buena aplicabilidad del cebador: el cebador N-2, el cebador del gen E, la amplificación del cebador de referencia interna, etc. tienen buena aplicabilidad;
Especificidad: el NTC de 48 pocillos no tiene picos en absoluto y la especificidad es fuerte;
Tolerancia: buena tolerancia a algunos agentes liberadores de ácidos nucleicos;
Alta estabilidad: estable a 37 °C durante 5 días con buena estabilidad y puede soportar congelaciones y descongelaciones repetidas más de 10 veces;
Ventaja del mercado: El rendimiento es superior al de productos competidores nacionales y extranjeros similares, y la relación costo-beneficio es alta.

3. ¿Cuáles son las características del "Kit de ensayo de colorante RT-LAMP Cat#13762 (UDG plus)"?

3.1 Alta sensibilidad

Figura 1. Prueba de sensibilidad

Rojo: 50 copias/T, respuesta en menos de 15 minutos
Azul: 25 copias/T, respuesta en menos de 15 minutos
Se analizaron dos números de copias, 50 copias/T y 25 copias/T, respectivamente. Los resultados de la prueba mostraron que en 15 minutos, los resultados de 50 copias/T obtuvieron mejores resultados y la tasa de detección alcanzó el 100 %.

3.2 Adecuación del cebador

Figura 2. Detección de idoneidad del cebador de ácido nucleico bloqueado N5

Púrpura: Yeasen  Azul: Compañía N

Figura 3.Ensayo de idoneidad del cebador N

Verde: Yeasen     Rojo: Compañía N

Figura 2, Figura 3: En la detección específica de cebadores de ácidos nucleicos bloqueados N5 y cebadores N, según 50 copias/T, la detección correspondiente se llevó a cabo utilizando las marcas Yeasen y N. Los resultados mostraron que la aplicabilidad de los cebadores de ácidos nucleicos bloqueados N5 fue mejor que la de las marcas N. La aplicabilidad de los cebadores N es la misma para los dos productos.

Figura 4. Detección de idoneidad del cebador ACTIN

Púrpura: Yeasen     Azul: Compañía N

Se analizaron 15 ng de 293DNA para determinar la idoneidad del cebador ACTIN utilizando las marcas Yeasen y N. Los resultados demostraron que Yeasen tenía una excelente aplicabilidad.

3.3 Especificidad

Figura 5. Ensayo específico de NTC de 48 pocillos

En la detección específica del producto se utilizó la detección NTC de 48 pocillos y no se detectó ningún pico, lo que indica que la especificidad fue mejor.

3.4 Tolerancia

Figura 6. Ensayo de tolerancia al liberador de ácidos nucleicos

Rojo: Matriz DEPC H₂Oh
Verde: 50 % de cada uno de agente liberador de ácido nucleico y DEPC H₂Oh
Azul: Agente liberador de ácido nucleico al 100 %
Utilizando la matriz DEPC H₂O, agente liberador de ácidos nucleicos y DEPC H₂Se probaron O con 50% y 100% de agente liberador de ácido nucleico respectivamente. Los resultados muestran que este producto tiene una excelente tolerancia a los agentes liberadores de ácido nucleico.

3.5 Estabilidad

Figura 7. Prueba de estabilidad a la misma temperatura.

Rojo: 37℃ 0 días Azul: 37℃ 1 día Verde: 37℃ 3 días Púrpura: 37℃ 5 días
Se utilizaron 0 días a 37°C como control y se realizaron pruebas de estabilidad durante 1, 3 y 5 días a la misma temperatura, lo que indica que aún puede mantener un efecto relativamente estable a 37°C durante 5 días.

Figura 8. Prueba de estabilidad de congelación-descongelación repetida a -20 ℃

Rojo: Repetir congelación-descongelación 0 veces
Azul: Repetir congelación-descongelación 5 veces
Verde: Repetir congelación-descongelación 10 veces

Figura 9. Prueba de estabilidad de congelación-descongelación repetida con hielo seco

Rojo: Repetir congelación-descongelación 0 veces
Púrpura: Repetir la congelación y descongelación 5 veces
Prueba de estabilidad de congelación-descongelación repetida a -20 °C y hielo seco. Se encontró que la estabilidad de la congelación-descongelación se repitió 10 veces a -20 °C y 5 veces en hielo seco.

3.6 Comparación de productos similares

Figura 10. Comparación de los efectos de productos similares

Rojo: Yeasen  Azul: Marca N1  Verde: Marca N2
Utilizando el cebador del gen N, en el caso de 50 copias/T, utilizando Yeasen, marca N1 y marca N2 para la verificación de comparación de productos, los productos Yeasen funcionaron bien.

6. ¿Qué productos podemos recomendar?

Los productos proporcionados por Yeasen son los siguientes.

Tabla 1.Información del producto