Wnt3a humano expresado en células HEK293 exhibe una alta actividad que promueve el cultivo de los organoides

Los organoides son modelos tridimensionales creados in vitro que se asemejan mucho a los tejidos u órganos naturales y tienen una importancia significativa en el ámbito del modelado de enfermedades, el rejuvenecimiento de órganos y la atención médica individualizada. El cultivo de estos organoides requiere el manejo cuidadoso de una amplia gama de citocinas, y Wnt3a se destaca como un factor empleado con frecuencia que asume un papel fundamental en el cultivo de organoides derivados de una amplia gama de tejidos.

¿Qué es Wnt-3a?

Wnt-3a pertenece a la familia Wnt, un grupo de proteínas secretadas que comprende 19 variantes humanas, entre las que se incluyen Wnt1, Wnt2, Wnt2b (Wnt13), Wnt3, Wnt3a, Wnt4, Wnt5a, Wnt5b, Wnt6, Wnt7a, Wnt7b, Wnt8a, Wnt8b, Wnt9a (también conocida como Wnt14), Wnt9b (Wnt14b), Wnt10a, Wnt10b, Wnt11 y Wnt16. Esta familia se caracteriza por su conservación y composición rica en cisteína. Las proteínas Wnt facilitan la vía de señalización de Wnt uniéndose a los receptores de la membrana celular o a los receptores de la membrana celular vecinos. Esta vía se puede clasificar en la vía canónica, mediada por la β-catenina, que incluye Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt7a, Wnt8, Wnt8b y Wnt10a, y la vía no canónica, independiente de la β-catenina, que abarca Wnt4, Wnt5a, Wnt6 y Wnt11. Wnt3a, como miembro por excelencia de la familia Wnt, se distribuye de forma ubicua y ejerce un papel fundamental en la regulación de diversas funciones celulares, como la autorrenovación, la proliferación, la diferenciación y la motilidad.

Mecanismo de transducción de la vía de señalización Wnt-3a

La vía de señalización de Wnt es una red multifacética de interacciones proteínicas asociadas principalmente con el desarrollo embrionario y el cáncer. Sin embargo, también desempeña un papel en los procesos fisiológicos normales en organismos adultos. Wnt3a se une a su receptor, la proteína Frizzled (Fz), junto con la proteína relacionada con el receptor de lipoproteína correceptora (LRP5/6), activando posteriormente la proteína de andamiaje Disheveled (Dvl). Esta activación conduce al desmontaje del "complejo de destrucción", que consta de la caseína quinasa 1 (CK1), la glucógeno sintasa quinasa-3β (GSK-3β) y las proteínas de andamiaje adenomatous polyposis coli (APC), Axin1 y Axin2. La disolución de este complejo estabiliza la proteína β-catenina libre en el citoplasma. La β-catenina acumulada en el citoplasma se transloca luego al núcleo, donde se une a factores de transcripción de la familia TCF/LEF, activando finalmente genes diana posteriores como c-myc y ciclina D1. Esta cascada induce respuestas celulares posteriores. En resumen, la vía de señalización de Wnt se puede simplificar de la siguiente manera: Wnt3a→FZD→DVL→disolución del complejo→β-catenina entra al núcleo→TCF/LEF→transcripción del gen posterior. Sin Wnt3a, la β-catenina normalmente se degrada en el citoplasma por el "complejo de destrucción", que la dirige hacia la ubiquitinación y la posterior degradación en el proteasoma. Como resultado, no puede entrar al núcleo para iniciar la transcripción de genes posteriores. La vía de señalización Wnt/β-catenina está altamente conservada a lo largo de la evolución y juega un papel fundamental en el desarrollo embrionario, el crecimiento celular, la diferenciación, la formación de polaridad, el desarrollo neuronal y la carcinogénesis.

Wnt3a y organoides

Wnt3a ocupa una posición central como uno de los factores de cultivo más frecuentemente utilizados para la generación de organoides. Su alta actividad, la consistencia entre lotes, la falta de contaminación y la preparación sin suero son factores clave que contribuyen al éxito de los experimentos con organoides.La proteína Wnt3a se ha utilizado ampliamente en cultivos de organoides de diversos tejidos, incluidos el intestino, el estómago, el páncreas, el hígado, la tiroides, el esófago y el sistema nervioso. En un esfuerzo por ayudar a los investigadores científicos y a las compañías farmacéuticas en sus estudios sobre la aplicación clínica de la proteína Wnt3a en la formación de organoides y la investigación tumoral, YEASEN ha presentado un producto proteico Wnt3a altamente activo (catálogo: 92276ES) diseñado para facilitar el cultivo de organoides.

Figura 3. Medido por su capacidad para inducir la actividad del reportero Topflash en células renales embrionarias humanas HEK293T. La DE50 para este efecto es 25 ng/mL.

Validación de cultivos de organoides

Yeasen Se han verificado citocinas en organoides tumorales humanos como cáncer de pulmón, cáncer de cuello uterino, cáncer de ovario, cáncer de páncreas y cáncer intestinal, y organoides normales como organoides del intestino delgado humano y de ratón.

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