HiActi™ Citocinas validadas en organoides cultivados

En 2021, los organoides se incluirán en la lista de proyectos clave del plan nacional de investigación y desarrollo clave "14.º Plan Quinquenal". Los organoides están de moda y la forma de obtenerlos también se ha convertido en el foco de atención. Diferentes organoides requieren diferentes citocinas durante el cultivo. Al agregar citocinas que promueven o inhiben vías de señalización específicas, se puede hacer que las células madre se diferencien en los organoides deseados. El protocolo de cultivo de citocinas más clásico en el cultivo de organoides es WNER (respectivamente: Wnt-3a, Noggin, EGF y R-Spondins), y la combinación de aumento o disminución de estos 4 factores se puede aplicar a casi todos los experimentos de cultivo de organoides.

Citocinas comúnmente utilizadas en el cultivo de organoides

R-Spodin 1

Función: La R-Spodin 1 pertenece a la familia Rspo de reguladores de Wnt, que incluye 4 miembros, concretamente Rspo1-4. Esta familia es un factor microambiental que mantiene las células madre adultas en múltiples órganos. La RSPO1 es una proteína activadora secretada. La Rspo-1 se expresa en ciertas regiones del sistema nervioso central en desarrollo y también se encuentra en la glándula suprarrenal, el ovario, los testículos, la tiroides y la tráquea.

Como activador de la vía de señalización de Wnt, Rspo1 desempeña un papel en muchos aspectos al mejorar la señalización de Wnt. Es un medio de crecimiento de uso común para organoides epiteliales gástricos, organoides de intestino delgado y colon, organoides de hígado, organoides de próstata, organoides de páncreas y organoides de mama.

Wnt-3a

Función: Wnt-3a pertenece a la familia Wnt de proteínas de señalización y desempeña un papel importante en el mantenimiento de la integridad de los tejidos embrionarios y adultos. La familia Wnt está altamente conservada y es rica en cisteína. Los Wnt median la vía de señalización de Wnt uniéndose a los receptores de la membrana celular y/o uniéndose a los receptores de la membrana celular adyacente. La vía de señalización de Wnt se puede dividir en vía canónica y vía no canónica, una está involucrada en la vía de señalización canónica mediada por β-catenina, incluyendo Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt7a, Wnt8, Wnt8b y Wnt10a; la otra no es Vías de señalización no canónicas dependientes de β-catenina, incluyendo Wnt4, Wnt5a, Wnt6 y Wnt11. Como la proteína de señalización más representativa de la familia Wnt, Wnt3a está ampliamente distribuida y juega un papel clave en la regulación de las funciones celulares pleiotrópicas, incluida la autorrenovación, la proliferación, la diferenciación y la motilidad.

FCE

Función: El EGF es un potente factor de crecimiento que estimula el desarrollo epitelial múltiple, la angiogénesis, la inhibición de la secreción de ácido gástrico, la proliferación de fibroblastos y la formación de colonias de células epidérmicas en cultivo. El EGF es un miembro fundador de la familia EGF, que también incluye TGF-α, dos proteínas reguladoras (AR), proteína de células β (BTC), proteína epidérmica (EPR), factor de crecimiento similar a EGF que se une a la heparina (HB-EGF), epiproteínas y neuregulinas (NRG1-6). Fisiológicamente, el EGF existe en varios fluidos corporales, incluidos la sangre, la leche, la orina, la saliva, el semen, el jugo pancreático, el líquido cefalorraquídeo y el líquido amniótico. El EGF es un ligando de alta afinidad para el receptor de EGF (ErbB). El EGF se une e induce la dimerización del receptor de EGF, lo que lleva a la activación de la vía de señalización de la proteína tirosina quinasa, transduciendo así la señal de la familia EGF.

Vaso

Función: Noggin puede inhibir los ligandos de la familia TGF-β y evitar que se unan a los receptores correspondientes.La noggin se descubrió originalmente como antagonista de BMP-4 y luego se demostró que modulaba la actividad de otras BMP (BMP-2, 7, 13 y 14). La noggin está muy conservada entre los vertebrados. Las proteínas noggin secretadas regulan la actividad de las proteínas morfogenéticas óseas durante el desarrollo. Función del antagonista de la señalización de BMP, la noggin, en el desarrollo de metástasis óseas osteolíticas del cáncer de próstata.

BFGF/FGF-2

Función: bFGF, un miembro de la superfamilia FGF de proteínas mitogénicas. Es un factor quimiotáctico y mitogénico altamente específico para muchos tipos de células y parece estar involucrado en la remodelación de tejidos dañados, como la curación de úlceras, la reparación vascular y la lesión cerebral traumática. bFGF es un componente importante del medio de cultivo de células madre embrionarias humanas. Además, la proteína bFGF es una proteína catiónica que se une a la heparina y que está involucrada en varias condiciones patológicas, incluida la angiogénesis y el crecimiento de tumores sólidos. Por lo tanto, bFGF se considera un objetivo para la quimioprevención del cáncer y las estrategias terapéuticas. bFGF se utiliza a menudo como un componente importante del medio de cultivo celular, como el medio de cultivo de células madre embrionarias humanas y el sistema de cultivo sin suero.

FGF-10

Función: El factor de crecimiento de fibroblastos 10 (FGF-10) es un factor de crecimiento que se une a la heparina y pertenece a la familia FGF. Las proteínas de esta familia desempeñan papeles centrales en el desarrollo prenatal, el crecimiento posnatal y la regeneración de diversos tejidos al promover la proliferación y diferenciación celular. El FGF-10 es secretado por células mesenquimales y se une al FGF-BP extracelular, se une preferentemente al FGF R2 (IIIb) epitelial y lo activa, e interactúa débilmente con el FGF R1 (IIIb).

Qsistema de gestión de calidad de HiActi™ citocina

Sistema de Gestión de Calidad

• Certificadas por la norma ISO 13485:2016, las citocinas se fabrican a través de un proceso de producción ultralimpio completamente cerrado para garantizar la limpieza y la estabilidad de las proteínas.
• Cumplir con el sistema de “Buenas Prácticas de Fabricación de Medicamentos”
• Tener un Certificado de Aprobación de Calidad (COA)
• Tecnología aséptica y filtración de esterilización secundaria
• Base de producción de materias primas para productos farmacéuticos

Gestión de garantía de calidad

• Persona especial es responsable del sistema de capacitación del personal directivo.
• Establecer procedimientos de mantenimiento y calibración de equipos.
• Sistema de gestión de materias primas y proveedores
• Registros completos de producción de lotes, registros de inspección de lotes, registros de embalaje, etc.
• Los registros de documentos de calidad han sido auditados e inspeccionados por QA
• Registros completos de producción e inspección de lotes
• Validación de métodos analíticos

Sistema de control de calidad

• Cumplir con la tercera regla general de la edición 2020 de la Farmacopea de la República Popular China: control de calidad de materias primas y excipientes para la producción de productos biológicos

Validación de cultivos de organoides

Yeasen Se han verificado citocinas en organoides tumorales humanos como cáncer de pulmón, cáncer de cuello uterino, cáncer de ovario, cáncer de páncreas y cáncer intestinal, y organoides normales como organoides del intestino delgado humano y de ratón.

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