ابزار تحقیق دایره ای RNA -Rnase r

ابزار تحقیق RNA دایره ای -RNAse R

—- تسریع توسعه داروی RNA حلقوی

در سال های اخیر، واکسن/دارو mRNA به تدریج وارد دید عموم شده است. واکسن/داروهای mRNA مزایای طراحی سریع، هزینه کم و تولید آسان را دارند، اما از آنجایی که mRNA خود به راحتی تجزیه می شود، در حال حاضر عمدتاً با افزودن کلاه و دم، و کمک به ترجمه mRNA، پایداری آماده سازی mRNA را بهبود می بخشد. در سال‌های اخیر، محققان نوع جدیدی از RNA - RNA دایره‌ای (Circular RNA، circRNA) را یافته‌اند. چنین RNAهایی یک ساختار حلقه بسته کووالانسی هستند که تجزیه آن آسان نیست. در مقایسه با mRNA، circRNA پایدارتر است و می تواند به ترجمه غیر وابسته به کلاه دست یابد. بنابراین، کشف CIRCRNA امکاناتی را برای توسعه نسل جدیدی از واکسن‌ها و داروهای RNA با پایداری ساده‌تر و بهتر فراهم می‌کند.

شکل 1: فرآیند واکسن RNA 1

فرآیند تولید CIRCRNA شامل: آماده سازی الگو، رونویسی آزمایشگاهی، حذف الگوی DNA، دایره ای و خالص سازی است. پس از چرخه شدن RNA، لازم است از ریبونوکلئاز R (Ribonuclease R, RNASE R) برای هضم RNA بدون سرنشین برای رسیدن به هدف غنی سازی CirCRNA استفاده شود. Yeasen دارای مهندسی آنزیمی مولکولی و پلت فرم تکامل منطقی است. در عین حال کیفیت محصول را تضمین می کند. تیم تحقیق و توسعه Yeasen با موفقیت یک آنزیم RNASE R با خلوص بالا و فعالیت بالا توسعه داد.

RNASE R (CAT#14606ES) یک اگزونوکلئاز اسید ریبونوکلئیک 3 '→ 5' وابسته به Mg2+ است که از E. coli مشتق شده است. این می تواند تمام RNA های خطی را هضم کند و CirCRNA، RNA لاریات را هضم نمی کند. اغلب برای حذف مولکول های RNA خطی و تحقق هدف غنی سازی RNA غیر خطی مانند CirCRNA و RNA لاریات استفاده می شود.

ویژگی ها

خلوص پروتئین (SDS-PAGE) ≥95٪

شکل 2: تشخیص خلوص پروتئین: حجم های مختلف (1 میکرولیتر، 2 میکرولیتر، 3 میکرولیتر) محصول (Cat#14606ES) خلوص بالای 95% را نشان می دهد.

بدون باقی مانده اگزونوکلئاز

شکل 3: 20 واحد RNASE R به 0.5 میکروگرم λDNA-Hind III Digest اضافه شد و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 4 ساعت انکوبه شد. نتیجه نشان می دهد که هیچ باقی مانده است اگزونوکلئاز از محصولات RNASE R (CAT#14606ES) شناسایی شد.

توانایی هضم RNA خطی و CircRNA

شکل 4: RNASE R (CAT#14606ES) می تواند مولکول های RNA خطی را هضم کند.
شکل 5: CircRNA می تواند درمان RNASE R (CAT#14606ES) را تحمل کند.

محصول

گربه

اندازه

RNAse R (20U/μL)

14606ES

250U/2500U/10000U
RNase R (درجه GMP، 20 U/μL) 14615ES 250U/2500U/10000U

T7 RNA Polymerase GMP-grade (250U/μL)

10625ES

10KU/100KU/2500KU
CleaScrip™ T7 RNA پلیمراز (dsRNA کم، 250 U/μL) 10628ES 10KU/100KU/2500KU

مرجع

  1. Qu L، Yi Z، Shen Y، و همکاران. واکسن های RNA دایره ای علیه SARS-CoV-2 و انواع در حال ظهور. سلول2022؛ 185 (10): 1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. چن ال، وانگ سی، سان اچ، و همکاران. جعبه ابزار بیوانفورماتیک برای کشف و تجزیه و تحلیل circRNA. بیوانفورم مختصر 2021؛ 22 (2): 1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

تحقیق