Le développement de médicaments nécessite des modèles animaux pour tester l'efficacité. Avec plus de 50 ans de développement et d'optimisation, le modèle de colite ulcéreuse (RCH) au sulfate de dextrane sodique (DSS), parmi divers modèles animaux, est largement utilisé pour étudier l'étiologie et la pathogénèse des maladies inflammatoires chroniques de l'intestin (MICI).
Figure 1. Développement du modèle DSS de colite ulcéreuse
1. Caractéristiques du modèle UC construit par DSS
2. Avantages du modèle DSS UC
3. Exemple de construction d'un modèle DSS UC
4. Critères d'évaluation du succès de la modélisation
5. Liens vers cette ressource
6. Cas de réussite de la modélisation avec Yeasen DSS
7. FAQ
8. Commande de produits
9. Articles publiés avec nos réactifs
10. Lecture de respect
1. Caractéristiques du modèle UC construit par DSS
Plusieurs symptômes aigus ou chroniques de la CU peuvent être induits, tels que diarrhée, selles muqueuses, sang occulte dans les selles, selles sanglantes grossières, perte de poids, diminution de l'activité et mauvaise couleur du pelage, selon différentes doses de DSS.
Tableau 1 Caractéristiques histologiques du modèle de colite DSS
Catégorie de modèle de colite DSS | modèle de colite aiguë | Modèle de colite en phase chronique |
---|---|---|
Modifications histologiques | Hyperémie, œdème, raccourcissement, fragilité du côlon, augmentation du rapport poids/longueur | Côlon significativement raccourci |
Ulcères du côlon de divers degrés | Épaississement des muqueuses, lymphadénopathie | |
Œdème des muqueuses, perte de cellules caliciformes, gonflement et destruction des cryptes | Perte de cellules caliciformes, perte de cryptes | |
Différents degrés d’infiltration de cellules inflammatoires dans la muqueuse et la sous-muqueuse, lésions des cellules épithéliales | Polypes adénomateux et modifications tumorales chez un petit nombre d'animaux |
2. Avantages du modèle DSS UC
👍 1. Les protocoles sont faciles à mettre en œuvre.
👍 2. Le modèle DSS UC ressemble étroitement aux symptômes de l'UC humaine avec une répétabilité élevée.
👍 3. Divers symptômes caractéristiques peuvent être induits en contrôlant la dose de DSS administrée, ce qui était unique pour le modèle DSS UC.
👍 4. Le modèle DSS UC peut être généré avec une variété d'animaux modèles largement utilisés, tels que les souris, les rats, les poissons zèbres, les porcs, les mouches des fruits, etc.
👍 5. Le modèle de cancer associé à la colite (CAC) induit par les MII peut être créé avec l'utilisation combinée d'azoxyméthane (AOM).
3. Exemple de construction du modèle DSS UC
3.1 Modèle de souris(Cliquez pour plus de détails)
1) Souris BALB/c, femelle, 6-8 semaines, 25 g ;
2) Eau potable stérile avec 3 % de DSS et filtre à 0,05 %.membrane de 22 µm;
3) Le DSS a été administré pendant 7 jours ;
4) Inflammation, comme celle du côlon un œdème et une congestion ont été observés après coloration HE.
Fig.2 Résultats de la coloration HE des coupes de colite aiguë DSS [1]
3.2 Modèle de poisson zèbre(Cliquez pour plus de détails)
1) Les embryons de poisson zèbre ont été obtenus à partir d'une ponte naturelle et élevés jusqu'à 1 jour après la fécondation (dpf) dans un incubateur à 28,5 ℃ dans de l'eau en recirculation (60 μg/mL de sels marins instantanés) et supplémentés en bleu de méthylène jusqu'à 1 dpf ;
2) Après 1 dpf, utiliser le milieu de culture embryonnaire E3 sans bleu de méthylène pour cultiver jusqu'à 3 dpf ;
3) Préparez une solution de stockage DSS à 10 % avec du milieu E3 ;
4) Diluer le DSS avec le milieu de culture jusqu'à la dose maximale non létale (référence de concentration du DSS : 0,5 %) ;
5) Les poissons zèbres ont été traités avec 0,5 % de DSS de 3 à 6 jours de croissance et les indices ont été observés.
Fig.3 Le DSS induit une réponse inflammatoire dans le foie du poisson zèbre [2]
3.3 Modèle de cochon(Cliquez pour plus de détails)
1) Porcelets Yorkshire à l'âge de 4-5 jours;
2) Dose de DSS : 1,25 g/kg, prise orale pendant 5 jours ;
3) Une augmentation du taux d’absorption du D-mannitol a été observée.
Fig.4 La concentration de D-mannitol induite par le DSS chez les porcelets était plus élevée que celle du groupe témoin [3]
3.4 Modèle de drosophile(Cliquez pour plus de détails)
1) Drosophile, femelle, 5-10 jours;
2) Alimentation moyen a été préparé avec une solution de saccharose à 5 % contenant 3 % de DSS et 25 μg/mL bléomycine;
3) La drosophile a été cultivée à 29°C pendant trois jours avec un changement quotidien du flacon de culture ;
4) Le DSS a induit la prolifération des cellules précurseurs de l'ISC et a eu un effet mortel sur la drosophile.
Fig.5 Le DSS induit la prolifération des cellules précurseurs de l'ISC chez la drosophile [4].
3.5 Cancer associé à la colite(Cliquez pour plus de détails)
1)Souris BALB/c, mâle, 7 semaines ;
2) Le jour 1, pesez et marquez les souris. Injectez aux souris par voie intrapéritonéale une solution d'AOM à 10 mg/kg.
3) Remplissez d'eau l'abreuvoir des cages à souris. Comptez 7 à 10 ml d'eau par souris et par jour. Nourrissez pendant une semaine.
4) Remplacez l’eau potable par du DSS à 2,5 % pendant une semaine ;
5) Nourrir avec de l’eau potable ordinaire pendant deux semaines ;
6) Répétez les étapes 3 à 4 3 fois.
Fig.6 Diagramme schématique de la CAC induite par AOM/DSS [5] .
4. Modélisation des critères d'évaluation du succès
4.1 Indice d'activité de la maladie (score DAI)
Le modèle a été évalué avec plusieurs paramètres, notamment le poids corporel, la viscosité fécale et le sang occulte, à travers lesquels l'IAD global est généré.
Tableau 2 Règles de notation DAI
score | pourcentage de perte de poids | consistance des selles | sang occulte dans les selles |
---|---|---|---|
0 | 0 | Normale | Négatif |
1 | 1 à 5 % | Selles molles | Bleu clair |
2 | 5-10% | Selles mucoïdes | Bleu |
3 | 10-20% | Selles molles | Bleu foncé |
4 | >20% | \ | Selles sanguinolentes et grossières |
4.2 Score de changement histologique
Les scores ont été attribués pour les indicateurs ci-dessus en fonction des changements histologiques excluant la formation de ganglions lymphatiques pour le modèle de colite aiguë. Le réactif de coloration HE utilisé est le numéro de référence 60524ES60.
Tableau 3 Score de changement histologique
Ulcère douloureux |
Ulcère(s)
| Épichanges inflammatoires | Infiltrat inflammatoire |
Ganglion(s) lymphatique(s)
|
---|---|---|---|---|
0 | 0 | Normale | Aucun | aucun |
1 | 1 | Perte de cellules caliciformes | Infiltration péricryptée | 1 |
2 | 2 | Perte de cellules caliciformes | Infiltration des muqueuses musculaires | 2 |
3 | 3 | Suppression de la crypte | Infiltration générale de la muqueuse musculaire, épaississement de la muqueuse | 3 |
4 | >3 | Perte étendue de cryptes ou régénération polypoïde | Invasion de la sous-muqueuse | > |
4.3 Côlon longueur
Le raccourcissement de la longueur du côlon était un phénotype évident pour le modèle de colite chronique, tandis que des changements similaires peuvent être détectés au jour 8 pour le modèle de colite aiguë.
4.4 Résumé
Des expériences préliminaires sont recommandées pour utiliser le modèle animal DSS UC avec un contrôle approprié. 8 à 10 animaux par groupe sont les exigences minimales. Le DAI est le critère pour évaluer les résultats d'une étude préliminaire.
5. Liens vers cette ressource
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[2]Jing Ma, et al. Aquaculture et pêche (2021) 548–557.
[3]Connie J. Kim, et al. Journal of Nutritional Biochemistry 21 (2010) 468–475.
[4]Fangfang Ren et al.PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
[5]Jia-Rong Huang, et al.Frontiers in Pharmacology.2020.11:586885.
6. Cas de réussite de la modélisation avec Yeasen DSS
Des modèles réussis de colite aiguë sont générés avec Yeasen DSS (réf. 60316ES, PM : 36 000 à 50 000) en 7 jours avec un phénotype proéminent comme indiqué dans le tableau suivant.
Tableau 4 Construction de différents types de modèles d'entérite avec DSS
Modèle | Exemples de modélisation | Plan de modélisation | Résultats de la modélisation | Évaluation de l'utilisation |
---|---|---|---|---|
Colite aiguë | Souris BALB/c, femelle, 6-8 semaines, 25 g | 3 à 5 % de DSS à boire librement pendant 7 jours consécutifs | Le jour 5 est apparu, la longueur du côlon était raccourcie, la coloration HE et l'inflammation était évidente | La vitesse de moulage est rapide et le temps est court. Conforme aux caractéristiques du modèle de colite aiguë |
Souris C57BL/6, mâle, 8 semaines, 20 g | 3%-5% DSS par gavage, administration continue | Le jour 5, on observe un raccourcissement du côlon, une perte de poids, du sang dans les selles et une diarrhée | Taux de moisissure élevé et courte durée. Conforme aux caractéristiques du modèle de colite aiguë | |
Colite chronique | Souris C57BL/6, mâle, 8 semaines, 22 g | 1-2% de DSS par gavage, administration continue | Le jour 40 apparaît, raccourcissement du côlon, perte de poids, sang dans les selles, diarrhée | Taux de moulage élevé. Conforme aux caractéristiques du modèle de colite chronique |
Cancer du côlon | Souris C57BL/6, mâle, 8 semaines, 21 g | 1%-2% DSS ad libitum pendant 5 jours pendant 3 semaines | 14 semaines avec raccourcissement de la longueur du côlon, perte de poids, coloration HE et inflammation évidente | Taux de moulage élevé. Conforme aux caractéristiques du modèle de cancer du côlon |
7. FAQ
Quel que soit le modèle de colite aiguë DSS ou le modèle de colite chronique DSS, la gravité et le succès de l'entérite sont liés à l'espèce de souris (différents antécédents génétiques), à la concentration de DSS et au cycle de dosage.
Tableau 5 Problèmes courants de la modélisation de la colite DSS
Problèmes possibles | Raison possible | Solution suggérée |
---|---|---|
Forte mortalité chez les souris | Concentration de DSS trop élevée | Diminuer la concentration de DSS administrée |
Souris sans symptômes ou avec peu de symptômes d'entérite | Concentration de DSS trop faible | Augmenter la concentration de dosage du DSS ; diminuer l'intervalle du cycle (10-14 jours) |
Dans le même groupe de souris, les symptômes de l’entérite varient considérablement | Bouchon de bouteille bouché | Vérifiez quotidiennement la bouteille d'eau de la souris |
8. Commande de produits :
Le produit le plus vendu ne nécessite que 1/3 du prix de M* avec la même efficacité, et nous gardons un stock important.
Tableau 6 Ordre des produits
Nom du produit | N° de chat. | Taille |
Sulfate de dextrane, sel de sodium pour la modélisation de la colite MW : 36000~50000 | 60316ES25 | 25g |
60316ES60 | 100 g | |
60316ES76 | 500 g | |
60316ES80 | 1 kg |
9. Articles publiés avec nos réactifs :
2022
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Avant 2020
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