Protocole de modélisation de la colite ulcéreuse chez les porcelets utilisant du sulfate de sodium dextran (DSS)

L'augmentation de la perméabilité intestinale est l'un des facteurs étiologiques des MICI et peut donc être utilisée comme biomarqueur pour évaluer la gravité des lésions de l'intestin grêle et du gros intestin. Le D-mannitol, une petite molécule glucidique inerte qui peut être absorbée le long de l'axe des villosités cryptiques, a été utilisé pour évaluer la perméabilité intestinale in vivo[1].

Figure 1. Piglet

Figure 1. Porcelet

1. Construction du modèle

2. Résultats

3. Liens vers cette ressource

4. Cas de réussite de la modélisation avec Yeasen DSS

5. Commande de produits

6. Articles publiés avec nos réactifs

7. Considérer la lecture

1. Construction du modèle

1.1 Modèle animal

Porcelets Yorkshire à l'âge de 4-5 jours

1.2 Matériel

DSS (Yeasen # 60316ES, MW36000-50000)

1.3 Protocole

a) Les porcelets Yorkshire ont été logés individuellement dans des enclos en métal avec un sol caoutchouté dans une pièce avec un cycle de lumière/obscurité contrôlé de 12 heures. La température ambiante a été maintenue à 26 ℃ et complétée par la lampe chauffante ;
b) Les porcelets ont été nourris avec une formule commerciale de substitut de lait trois fois par jour, à un niveau similaire à leur consommation ad libitum ;
c) Les animaux ont été équipés chirurgicalement d'un cathéter intragastrique. Le cathéter a été ancré à un patch de silicone (environ 8 × 12 mm), qui a ensuite été suturé sur la paroi gastrique avec environ 30 mm insérés à l'intérieur de la lumière gastrique. Chaque animal a été équipé d'un gilet sur mesure avec une poche dorsale pour le stockage temporaire du segment extérieur du cathéter ;
d) Les animaux ont été divisés en un groupe témoin positif (Pos), un groupe témoin négatif (Neg) et un groupe expérimental (Trp) ;
e) Groupe témoin positif (Pos) : perfusion de DSS (5 jours) + solution saline (5 jours) ; Groupe témoin négatif (Neg) : perfusion de solution saline normale (10 jours) ; Groupe expérimental (Trp) : perfusion de DSS (5 jours) + médicaments thérapeutiques (5 jours) ;
f) Dose de DSS : 1,25 g/kg, prise orale pendant 5 jours ;
g) À la fin de l'étude, les animaux ont été sédatés par un anesthésique inhalé, l'isoflurane, et euthanasiés par injection intracardiaque d'éthanol (pentobarbital) à raison de 0,3 ml/kg·poids corporel (PC).
h) Les tissus du côlon ont été immédiatement rincés dans une solution saline froide (154 mM, pH 7,4) contenant 0,1 mM de fluorure de phénylméthylsulfonyle (PMSF) et échantillonnés pour l'histologie ou congelés instantanément dans de l'azote liquide pour une analyse ultérieure.

2. Résultats

2.1 Analyse de la perméabilité intestinale

Figure 2. DSS-induced D-mannitol concentration in piglets was higher than that in the control group

Figure 2. La concentration de D-mannitol induite par le DSS chez les porcelets était supérieure à celle du groupe témoin

La concentration de D-mannitol induite par le DSS chez les porcelets a augmenté et la barrière intestinale a été détruite.

2.2 Section de coloration pathologique H&E

Figure 3. H&E pathological staining section (A: Neg group; B: Pos group)

Figure 3. Section de coloration pathologique H&E (A : groupe Neg ; B : groupe Pos)

La gravité de l’inflammation colique a été évaluée par un score d’inflammation et des mesures histologiques.Dans le groupe Pos traité par DSS, la structure du renfoncement était déformée, des cellules inflammatoires se sont infiltrées dans la muqueuse et la sous-muqueuse, un abcès du renfoncement et une inflammation du renfoncement.

2.3 Détection des facteurs inflammatoires

Figure 4. Detection of inflammatory factors

Figure 4. Détection des facteurs inflammatoires

La concentration de deux cytokines dans le groupe Pos traité avec DSS a augmenté[1].

3. Liens vers cette ressource

[1]Connie J. Kim, et al. Journal of Nutritional Biochemistry 21 (2010) 468–475.

4. Cas de réussite de la modélisation avec Yeasen DSS

Yeasen fournit des produits de haute qualité DSS (Cat#60316ES) : pureté (98 %), teneur en soufre 17-19 %, soufre libre < 0,2 %, soutenu par un grand nombre de données bibliographiques.

Tableau 1 Construction de différents types de modèles d'entérite avec DSS

Modèle

Exemples de modélisation

Plan de modélisation

Résultats de la modélisation

Évaluation de l'utilisation

colite aiguë

Souris BALB/c, femelle, 6-8 semaines, 25 g

3 à 5 % de DSS à boire librement pendant 7 jours consécutifs

Le jour 5 est apparu la longueur du côlon était raccourcie, la coloration HE et l'inflammation étaient évidentes

la vitesse de moulage est rapide et le temps est court. Conforme aux caractéristiques du modèle de colite aiguë

Souris C57BL/6, mâle, 8 semaines, 20 g

3%-5% DSS par gavage, administration continue

Le jour 5, on observe un raccourcissement du côlon, une perte de poids, du sang dans les selles et une diarrhée

Taux de moisissure élevé et durée courte. Conforme aux caractéristiques du modèle de colite aiguë

colite chronique

Souris C57BL/6, mâle, 8 semaines, 22 g

1-2% de DSS par gavage, administration continue

Le jour 40 apparaît, raccourcissement du côlon, perte de poids, sang dans les selles, diarrhée

Taux de moulage élevé. Conforme aux caractéristiques du modèle de colite chronique

cancer du côlon

Souris C57BL/6, mâle, 8 semaines, 21 g

1%-2% DSS ad libitum pendant 5 jours pendant 3 semaines

14 semaines avec raccourcissement de la longueur du côlon, perte de poids, coloration HE et inflammation évidente

Taux de moulage élevé. Conforme aux caractéristiques du modèle de cancer du côlon

5. Commande de produits

Un produit très vendu ne nécessite que 1/3 du prix de M* avec la même efficacité, et nous conservons un stock important.

Tableau 2. Ordre des produits

Nom du produit N° de chat. Taille
Sel de sodium de sulfate de dextrane pour la modélisation de la colite MW : 36 000 à 50 000 60316ES25 25g
60316ES60 100 g
60316ES76 500 g
60316ES80 1 kg

6. Articles publiés avec nos réactifs

[1]Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Amélioration de la plateforme d'utilisation des médicaments avec un hydrogel mucoadhésif injectable pour le traitement de la colite ulcéreuse [J]. Journal de génie chimique.424(2021)130464.IF=16.744
[2]Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al.Les vésicules extracellulaires dérivées du lait soulagent la colite ulcéreuse en régulant l'immunité intestinale et en remodelant le microbiote intestinal[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 SI=11.556
[3]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. L'acide valérique dérivé du commensal intestinal protège contre les lésions dues aux radiations. Gut Microbes,.2020 .1–18.IF=10.245
[4]Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al. Particules d'administration de nucléotides administrées par voie orale à partir de la microfluidique pour le traitement des maladies inflammatoires de l'intestin [J]. Applied Materials Today.2021 déc.;25:101231 SI=10,041
[5]Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al.Identification de la signature génétique liée au système immunitaire et prédiction du réseau CeRNA dans la colite ulcéreuse active[J].Frontiers in Immunology.2022 ; 13 : 855645. SI=7,561
[6]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al.Le microbiote oral affecte l'efficacité et le pronostic de la radiothérapie pour le cancer colorectal dans les modèles murins[J].Cell reports.2021, 109886.IF=9.423
[7]Hao H,  Zhang X,  Tong L,  Liu Q, et al.Lactobacillus plantarumEffet des vésicules extracellulaires dérivées de Q7 sur le microbiote intestinal et la colite ulcéreuse chez la souris[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .IF=7.561
[8]Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al.Le nid d'oiseau comestible améliore la colite ulcéreuse induite par le sulfate de dextrane sodique chez les souris C57BL/6J en rétablissant l'équilibre des cellules Th17/Treg[J].Frontiers in Pharmacology.2021.632602.IF=7.561
[9]Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al.La piperlongumine soulage la colite chez la souris et le cancer colorectal associé à la colite[J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885. SI=7,561
[10]Gao X, Fan W, Tan L, et al. Les isoflavones de soja améliorent la colite expérimentale en ciblant les voies de l'inflammasome ERα/NLRP3[J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83.IF=6.048
[11]Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao et al. L'effet anti-inflammatoire des peptides dérivés de la gélatine osseuse bovine dans la PR induite par le LPSW264.7 Cellules macrophages et souris C57BL/6 induites par le sulfate de dextrane sodique [J]. Nutrients 2022, 14, 1479. SI=5,717
[12] Wang S,  Huang J,  Tanné KS, et al. L'isostéviol sodique améliore la colite chronique induite par le sulfate de sodium de dextrane grâce à la régulation du profilage métabolique, de la polarisation des macrophages et de la voie NF-B [J]. Médecine oxydative et longévité cellulaire. 2022,4636618. SI=5,076

7.Lecture de respect

Établissement d'un modèle de colite ulcéreuse à base de sulfate de sodium de dextrane (DSS)

Mise en place d'un modèle de cancer associé à la colite induit par l'azoxyméthane (AOM) et le sulfate de dextrane sodique (DSS)

Protocole de modélisation de la colite ulcéreuse chez la drosophile à l'aide du sulfate de sodium de dextrane (DSS)

Protocole de modélisation de la colite ulcéreuse chez le poisson zèbre à l'aide du sulfate de sodium de dextrane (DSS)

Enquête