Qu'est-ce qu'un anticorps secondaire ?
Un anticorps secondaire est un anticorps qui peut se lier à un anticorps primaire. Il est principalement utilisé pour détecter la présence de l'anticorps primaire. L'anticorps primaire se lie spécifiquement à l'antigène, et l'anticorps secondaire se lie spécifiquement à l'anticorps primaire. En d'autres termes, la région Fc ou le fragment Fab de l'anticorps primaire peut agir comme un antigène pour stimuler l'organisme à produire des anticorps. Autrement dit, l'anticorps primaire est principalement constitué d'immunoglobulines de classe IgG, donc l'anticorps secondaire est un anticorps anti-IgG.
Le rôle des anticorps secondaires
L'anticorps primaire se lie spécifiquement à la protéine cible et l'anticorps primaire doit être marqué avec une substance luminescente ou un groupe chromogène. Il n'est pas possible de voir à l'œil nu si l'anticorps primaire lier La protéine. Cependant, l'anticorps primaire est relativement spécifique et chaque anticorps est marqué à un coût élevé. Il est courant d'utiliser un anticorps secondaire marqué qui peut se lier à l'anticorps primaire et possède un marqueur détectable (tel qu'un groupe fluorescent, radioactif, chimioluminescent ou chromogène). Ainsi, la conception actuelle comporte généralement l'anticorps secondaire avec un marqueur détectable pour détecter l'anticorps primaire, tandis que l'anticorps primaire reconnaît le substrat. De cette façon, lorsque l'anticorps primaire se lie au substrat, il peut être détecté par l'anticorps secondaire.
Par exemple, le principe de luminescence ECL : dans le substrat ECL, il y a H2O2 et le luminol (et ses dérivés), qui émettent une fluorescence sous l'action de la HRP (peroxydase de raifort).
Points clés pour l’utilisation des anticorps secondaires
L'anticorps secondaire est un anticorps produit par l'immunisation de mammifères (en général, des chèvres, des chevaux, des ânes, des mules, des cobayes, etc.) avec l'immunoglobuline IgG d'un certain sous-type de l'espèce d'anticorps primaire (comme les lapins, les souris), de sorte que l'anticorps secondaire ne se lie qu'à une espèce et un sous-type spécifiques de l'anticorps primaire. Par exemple, l'anticorps anti-souris de mouton (anticorps secondaire) se lie spécifiquement à l'anticorps monoclonal de souris (anticorps primaire) et ne se lie pas à l'anticorps polyclonal de lapin ou monoclonal de rat.
Marques de couplage d'anticorps secondaires
Différentes méthodes expérimentales donneront lieu à différents groupes de couplage pour les anticorps secondaires, qui sont principalement des enzymes (peroxydase de raifort/HRP et phosphatase alcaline/AP), des groupes fluorescents (FITC, Rhodamine, PE, Dylight, Alexa Fluor, cy3, etc.), de la biotine, des particules d'or, etc. En général, les anticorps secondaires marqués HRP sont recommandés pour des expériences telles que WB, ELISA, IHC, et les anticorps secondaires marqués à la biotine sont recommandés pour l'IHC, tandis que les marqueurs fluorescents tels que Alexa Fluor 488, FITC, PE sont utilisés pour IF, FC, etc.
Comment choisir le bon anticorps secondaire
a. Immunotransfert (WB)
Sélectionnez un anticorps secondaire marqué avec de la peroxydase de raifort ou de la phosphatase alcaline pour le Western blotting traditionnel ; choisissez un anticorps secondaire marqué avec le fluorophore correspondant pour le Western blotting fluorescent.
b.Immunohistochimie (IHC/ICC)
B. Pour l'ICC (immunocytochimie), sélectionnez un anticorps secondaire marqué à la biotine.
C. Immunofluorescence (IHF/ICF)
L'immunoprécipitation permet souvent de choisir d'utiliser un anticorps secondaire spécifique de Fc ou de Fab. De tels anticorps secondaires peuvent éviter l'interférence de la chaîne lourde (poids moléculaire 55 kDa) ou de la chaîne légère (poids moléculaire 25 kDa).
Informations sur les produits recommandés
| Groupe d'étiquettes | Numéro de produit | Nom du produit |
| Non marqué | 34850ES | Chèvre Anti-Lapin lgG(H+L) |
| 34851ES | Chèvre Anti-Mouse lgG(H+L) | |
| 34847ES | IgG(H+L) anti-humaine d'âne | |
| HRP | 33101ES | Peroxydase AffiniPure IgG de chèvre anti-lapin (H+L) |
| 33201ES | Peroxydase AffiniPure IgG de chèvre anti-souris (H+L) | |
| 33301ES | Peroxydase AffiniPure IgG de chèvre anti-rat (H+L) | |
| 33401ES | Peroxydase AffiniPure IgG(H+L) de chèvre anti-cobaye | |
| 33501ES | Peroxydase de raifort IgG anti-humaine de chèvre (H+L) | |
| 33701ES | Peroxydase AffiniPure IgG de lapin anti-chèvre (H+L) | |
| 33801ES | Peroxydase AffiniPure Lapin Anti-Mouton IgG (H+L) | |
| 34201ES | Peroxydase AffiniPure IgG anti-lapin d'âne (H+L) | |
| 34101ES | Peroxydase AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 34301ES | Peroxydase AffiniPure IgG anti-chèvre d'âne (H+L) | |
| 33101ES | Peroxydase AffiniPure IgG de chèvre anti-lapin (H+L) | |
| Fluorescence verte | 33106ES | YSFluor™ 488 IgG de chèvre anti-lapin (H+L) |
| 33126ES | YSFluor™ 488 IgG anti-humaine de chèvre (H+L) | |
| 33206ES | YSFluor™488 IgG de chèvre anti-souris (H+L) | |
| 33306ES | YSFluor™ 488 IgG bovine anti-chèvre (H+L) | |
| 33406ES | YSFluor™ 488 IgG anti-cobaye de chèvre (H+L) | |
| 33706ES | YSFluor™488 IgG anti-chèvre de lapin (H+L) | |
| 33906ES | YSFluor™ 488 IgG de lapin anti-souris (H+L) | |
| 34906ES | YSFluor™488 IgG anti-mouton d'âne (H+L) | |
| 34106ES | YSFluor™488 IgG anti-souris d'âne (H+L) | |
| 34206ES | YSFluor™488 IgG anti-lapin d'âne (H+L) | |
| 34306ES | YSFluor™ 488 IgG anti-chèvre d'âne (H+L) | |
| 34406ES | YSFluor™ 488 IgG anti-rat d'âne (H+L) | |
| 34506ES | Âne YSFluor™488 IgG anti-cobaye (H+L) | |
| 34606ES | Âne YSFluor™488 IgG anti-poulet (H+L) | |
| 34706ES | YSFluor™488 IgY anti-poulet de lapin (H+L) | |
| 34806ES | YSFluor™488 IgG anti-humaine d'âne (H+L) | |
| 34856ES | FITC AffiniPure IgG (H+L) anti-humaine de chèvre | |
| 33107ES | FITC-AffiniPure IgG de chèvre anti-lapin (H+L) | |
| 33207ES | FITC-AffiniPure IgG de chèvre anti-souris (H+L) | |
| 33307ES | FITC-AffiniPure IgG de chèvre anti-rat (H+L) | |
| 33707ES | FITC-AffiniPure IgG de lapin anti-chèvre (H+L) | |
| 33807ES | FITC-AffiniPure Lapin Anti-Mouton IgG (H+L) | |
| Rhodamine | 33109ES | Rhodamine (TRITC) IgG de chèvre anti-lapin (H+L) |
| 33209ES | Rhodamine (TRITC) IgG de chèvre anti-souris (H+L) | |
| 33709ES | Rhodamine (TRITC) AffiniPure Lapin Anti-Chèvre IgG (H+L) | |
| 33210ES | IgG de chèvre anti-souris Rhodamine Red-X (RRX) (H+L) | |
| Fluorescence orange | 33112ES | YSFluor™594 AffiniPure IgG de chèvre anti-lapin (H+L) |
| 33212ES | YSFluor™ 594 IgG de chèvre anti-souris (H+L) | |
| 33222ES | YSFluor™ 594 IgG anti-humaine de chèvre (H+L) | |
| 33412ES | YSFluor™594 IgG anti-cobaye de chèvre (H+L) | |
| 33312ES | YSFluor™ 594 IgG bovine anti-chèvre (H+L) | |
| 33712ES | YSFluor™594 IgG anti-chèvre de lapin (H+L) | |
| 33812ES | YSFluor™ 594 IgG anti-mouton de lapin (H+L) | |
| 33912ES | YSFluor™594 IgG de lapin anti-souris (H+L) | |
| 34712ES | YSFluor™594 IgY anti-poulet de lapin (H+L) | |
| 34112ES | YSFluor™ 594 IgG anti-souris d'âne (H+L) | |
| 34212ES | YSFluor™594 IgG anti-lapin d'âne (H+L) | |
| 34312ES | YSFluor™ 594 IgG anti-chèvre d'âne (H+L) | |
| 34412ES | YSFluor™ 594 IgG anti-rat d'âne (H+L) | |
| 34512ES | Âne YSFluor™594 IgG anti-cobaye (H+L) | |
| 34612ES | Âne YSFluor™594 IgG anti-poulet (H+L) | |
| 34812ES | YSFluor™594 IgG anti-humaine d'âne (H+L) | |
| 34912ES | YSFluor™594 IgG anti-mouton d'âne (H+L) | |
| 33208ES | Cy3-AffiniPure IgG de chèvre anti-souris (H+L) | |
| 33308ES | Cy3-AffiniPure IgG de chèvre anti-rat (H+L) | |
| 33708ES | Cy3-AffiniPure IgG de lapin anti-chèvre (H+L) | |
| 33808ES | Cy3-AffiniPure IgG de lapin anti-mouton (H+L) | |
| 34855ES | Cy3-AffiniPure IgG anti-chèvre d'âne (H+L) | |
| Fluorescence rouge | 33113ES | YSFluor™647 IgG de chèvre anti-lapin (H+L) |
| 33213ES | YSFluor™ 647 IgG de chèvre anti-souris (H+L) | |
| 33223ES | YSFluor™647 IgG anti-humaine de chèvre (H+L) | |
| 33313ES | YSFluor™ 647 IgG bovine anti-chèvre (H+L) | |
| 33413ES | YSFluor™ 647 IgG anti-cobaye de chèvre (H+L) | |
| 33713ES | YSFluor™ 647 IgG de lapin anti-chèvre (H+L) | |
| 33813ES | YSFluor™647 IgG anti-mouton de lapin (H+L) | |
| 33913ES | YSFluor™ 647 IgG de lapin anti-souris (H+L) | |
| 34713ES | YSFluor™647 IgY anti-poulet de lapin (H+L) | |
| 34113ES | IgG anti-souris d'âne YSFluor™ 647 (H+L) | |
| 34213ES | YSFluor™ 647 IgG anti-lapin d'âne (H+L) | |
| 34413ES | IgG anti-rat YSFluor™ 647 (H+L) d'âne | |
| 34813ES | YSFluor™647 IgG anti-humaine d'âne (H+L) | |
| 34913ES | YSFluor™647 IgG anti-mouton d'âne (H+L) |
Références
[1]Zhang B, Wang H, Liao Z, et al.Nanoparticules conjuguées à l'EGFP–EGF1 pour cibler les cellules néovasculaires et les cellules gliomateuses dans le traitement du gliome cérébral [J]. Biomaterials, 2014, 35(13) : 4133-4145. IF : 8.387[2]Yu X, Wang J, Liu J, et al. Un nanoagent multimodal à base de peptide pepstatine A pour l'imagerie moléculaire de la P-glycoprotéine dans le cerveau des rats épileptiques[J]. Biomaterials, 2016, 76 : 173-186. SI:8.402
[3]Liu J, He Y, Zhang J, et al. Vecteur spécifique aux crises combiné à un nanotransporteur fonctionnalisé avec une propriété de modulation de la P-glycoprotéine pour l'administration de médicaments antiépileptiques[J]. Biomaterials, 2016, 74 : 64-76. IF : 8.402
[4]Ma Y, Ji Y, You M, et al. Marquage et suivi à long terme des cellules souches mésenchymateuses de la moelle osseuse in vitro à l'aide de nanoparticules de conversion ascendante NaYF 4: Yb 3+, Er 3+ [J]. Acta biomaterialia, 2016, 42 : 199-208. IF : 6,638
[5]Wang Y, Lin YX, Qiao SL, et al. Les nanoparticules polymères permettent d'inverser les macrophages dans le microenvironnement tumoral pour l'immunothérapie[J]. Biomaterials, 2017, 112(15) : 3e163. IF : 8.806
[6] Liu C, He X, Liu W, et al. Les mutations bi-alléliques du gène TTC29 provoquent une sous-fertilité masculine Asthénotératospermie chez les humains et les souris [J]. The American Journal of Human Genetics, 2019, 105(6): 1168-1181. 34106ES60 SI:9.924
[7] Xu T, Ding W, Ao X, et al. L'ARC régule la nécrose programmée et les lésions d'ischémie/reperfusion myocardique par l'inhibition de l'ouverture du mPTP [J]. Redox biology, 2019, 20 : 414-426.IF (7.126) (Alexa Fluor 488)
[8] Tan T, Wang Y, Wang J, et al. Le ciblage des lipoprotéines biomimétiques décorées de peptides améliore la pénétration profonde et l'accessibilité des cellules cancéreuses dans les tumeurs solides. Acta Pharm Sin B. 2020;10(3):529-545. IgG marquée Alexa Fluor 488 (H+L)IF : 7,097
[9] Un hydrogel Photoclick pour un immunoblot monocellulaire amélioré[J]. Advanced Functional Materials, 2020, 30.33112ES60 SI : 16.836
[10] Bingcheng Yi a, b, 1, Lei Yuc, 1, Han Tanga, et al. Le revêtement de polydopamine dopé à la lysine améliore antithrombogénicité et endothélialisation d'un tissu vasculaire fifibreux aligné électrofilé greffe.. Matériaux appliqués aujourd'hui, 2021. 33207ES60 SI:10.041