Présentation du produit
La collagénase est une classe d'endonucléases qui peuvent reconnaître spécifiquement la séquence Pro-X-Gly-Pro (qui se produit fréquemment dans le collagène et est rarement trouvée dans d'autres protéines), et cliver la liaison peptidique entre l'acide aminé neutre (X) et la glycine (Gly) dans cette séquence, et peuvent hydrolyser le collagène dans le tissu conjonctif.
De nombreuses protéases sont capables d'hydrolyser les peptides de collagène monocaténaires et dénaturés, mais la collagénase est la seule protéase capable de dégrader les fibres de collagène naturelles avec une structure superenroulée à trois brins, et se trouve largement dans les tissus conjonctifs, dont le plus puissant est la collagénase « brute » sécrétée par la bactérie anaérobie Clostridium histolyticum.
La collagénase de Yeasen est dérivée de Clostridium histolyticum, qui est un extrait enzymatique « grossier », qui contient non seulement de la collagénase qui peut dégrader le collagène naturel et les fibres réticulaires, mais contient également d'autres protéases telles que les polysaccharidases, les lipases, etc., qui peuvent hydrolyser efficacement d'autres protéines, polysaccharides et lipides dans la matrice extracellulaire du tissu conjonctif et du tissu épithélial, il est donc plus adapté à la digestion des tissus.
À l’heure actuelle, la collagénase bactérienne sur le marché est principalement divisée en cinq types selon la différence d’activité de la collagénase : collagénase de type I, de type II, de type III, de type IV et de type V.
Choix de la collagénase
| Nom du produit | Apparence | Activité enzymatique | Champ d'application |
| Type I Collagénase） | Poudre cristalline brune ou beige | ≥ 250 U/mg solide | Contient une activité (collagénase, caséinase, clostridies et trypsine) pour l'isolement des cellules épithéliales, pulmonaires, adipeuses et surrénaliennes. |
| Type II Collagénase） | Poudre cristalline brune ou beige | ≥125 U/mg solide | Contient plus d'activité clostridase et convient à l'isolement des cellules des tissus du foie, des os, de la thyroïde, du cœur et des glandes salivaires |
| Type III Collagénase） | Poudre cristalline brune ou beige | ≥100 U/mg solide | Il contient une faible activité protéolytique, qui est efficace pour la partie de jonction du tissu digestif, et est souvent utilisé pour la dissociation des cellules tissulaires des mammifères |
| Type IV Collagénase） | Poudre cristalline brune ou beige | ≥125 CDU/mg solide* | Contient une faible activité trypsine et est couramment utilisé dans la préparation cellulaire pour l'intégrité des îlots et des récepteurs |
| Type V Collagénase） | Poudre cristalline brune ou beige | ≥125 CDU/mg solide* | Contient au moins 7 composants de protéase, qui peuvent être utilisés pour l'isolement du tissu des îlots pancréatiques et la séparation du tissu conjonctif en cellules individuelles |
*CDU = unités de digestion du collagène
Caractéristiques du produit
- Efficacité de digestion élevée : l'extrait enzymatique brut de Clostridium histolyticum a une efficacité de digestion élevée pour les tissus.
- Dépend des activateurs : la collagénase doit s'appuyer sur l'activité d'enzymes activatrices telles que les cations divalents tels que Ca2+et Zn2+.
- Affecté par les inhibiteurs : les inhibiteurs de la collagénase comprennent l'EDTA, l'EGTA, etc. ; le deuxième est les ions de métaux lourds (Hg2+, Pb2+, Cd2+); Il existe également des agents chimiques tels que la cystéine, l'histidine, le DTT, le 2-mercaptoéthanol, l'o-phénanthroline, etc., qui ont également des effets inhibiteurs sur la collagénase.
- Forte résistance aux interférences : le collagène ne sera pas affecté par le sérum utilisé pour cultiver les cellules.
Précautions d'emploi
- Utilisation : Dissoudre dans des solutions salines de Hank, Earle ou autres solutions équilibrées, la concentration de travail recommandée est de 0,05 % à 0,5 % (p/v)
- Température de stockage : 2-8°C
- Suggestions d'utilisation :
(1) Pour l'étude de la structure et de la biosynthèse du collagène, des préparations de collagénase de plus haute pureté sont souvent utilisées et aucune autre activité protéolytique n'est utilisée.
(2) Pour la dissociation des tissus, des préparations de collagénase brute, telles que l'élastase, la trypsine ou la papaïne, sont souvent utilisées.
FAQ
- Mauvaise digestion pendant l'expérience
(1) Si elle est causée par une faible activité enzymatique ou par une insuffisance d'ions calcium, la collagénase doit être conservée à basse température et dans des conditions sèches, et la solution de collagénase doit être congelée après aliquotage.
(2) Si cela est dû à un manque d'ions calcium, la concentration d'ions calcium dans la solution de collagénase doit être de 5 mM
- La mort cellulaire se produit pendant l'utilisation
(1) S'il y a un excès de protéase, le temps de contact avec la protéase doit être réduit ou de l'albumine ou du sérum inactivé doit être ajouté.
(2) Si le pH change, un tampon (par exemple, HBSS) doit être utilisé ; vérifiez et réajustez fréquemment votre pH
(3) S'il y a trop peu d'oxygène, la solution digestive doit être ventilée avec de l'air stérile
- Les cellules ont été endommagées pendant l'expérience
Si cela est dû à un excès de protéase, la quantité de protéase doit être réduite ou de l'albumine ou du sérum inactivé doit être ajouté.
Commande
| Numéro de catalogue | Nom du produit | Taille |
| 40507ES60 | Collagénase I | 100 mg, 1 g |
| 40508ES60 | Collagénase II | 100 mg, 1 g |
| 40509ES60 | Collagénase III | 100 mg |
| 40510ES60 | Collagénase IV | 100 mg, 1 g |
| 40511ES60 | Collagénase V | 100 mg |
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