Détection, prévention et élimination des mycoplasmes – tout en une seule étape !

Mycoplasme

Le mycoplasme, aussi appelé mycoplasme, est le procaryote le plus petit et le plus simple découvert à ce jour, avec un diamètre de 0,1 à 0,3 μm. Il traverse les filtres et présente un pléomorphisme élevé, se présentant sous diverses formes : sphérique, en bâtonnet, filamenteuse et ramifiée. En laboratoire et en production biopharmaceutique, les cultures cellulaires sont sujettes à la contamination par les mycoplasmes. Selon la littérature, l'incidence de la contamination par les mycoplasmes dans les lignées cellulaires stockées est d'environ 15 % à 35 %, et dans l'industrie biopharmaceutique, elle varie de 0,44 % à 6,70 %. ^[1].

Figure 1 : Morphologie du mycoplasme

Impact de la contamination par les mycoplasmes

Les contaminations bactériennes et fongiques sont relativement faciles à détecter, à prévenir et à éliminer, mais la contamination par les mycoplasmes est plus difficile à détecter. Même à des densités de croissance atteignant 10^7-10^9 UFC/ml, il peut n'y avoir aucun signe évident de contamination (tel que turbidité ou variations de pH). La contamination par les mycoplasmes peut entraîner diverses modifications cellulaires (voir figure 2).

Figure 2 : Changements dans l'état des cellules après une contamination par des mycoplasmes

Scénarios d'application pour la détection des mycoplasmes

Sources typiques de contamination par les mycoplasmes

• Contamination croisée entre cellules ;
• Contamination de l’environnement de travail ou du matériel expérimental ;
• Mauvaise technique aseptique de la part de l'expérimentateur ;
• Contamination des milieux de culture ou d’autres réactifs ;
• Contamination du tissu ou de l’organe d’origine utilisé pour la préparation des cellules.

Que faire lorsque les cultures cellulaires sont contaminées par des mycoplasmes

Figure 3 : Solution totale pour la contamination par les mycoplasmes

Solution trois en un contre la contamination des cellules par les mycoplasmes

1. Détection des mycoplasmes

Détection isotherme des mycoplasmes en une étape :

YeasenLe réactif de détection isotherme des mycoplasmes en une étape de utilise une technologie unique d'amplification isotherme, offrant une meilleure discrimination des couleurs – du bleu-violet (négatif) au bleu ciel (positif) – facilitant ainsi l'identification visuelle. Il contient des composants anti-contamination pour éliminer les faux positifs.

Figure 4 : Processus de détection des mycoplasmes en une étape

Détection des mycoplasmes par PCR :

YeasenLa méthode de détection des mycoplasmes par PCR diffère de la PCR classique en une étape par l'utilisation de trois paires d'amorces au lieu d'une, ciblant les régions conservées 16S et 23S des mycoplasmes pour l'amplification par PCR imbriquée. Cela améliore considérablement la sensibilité tout en réduisant la non-spécificité, détectant même une seule copie de mycoplasme.

Figure 5 : Image d'électrophorèse sur gel de l'amplification PCR d'échantillons avec différentes concentrations de mycoplasmes

Figure 6 : Image d'électrophorèse sur gel de l'amplification PCR d'échantillons avec différentes concentrations de mycoplasmes

Tableau 1 : Types de mycoplasmes détectables par YeasenRéactif de détection isotherme de mycoplasmes en une étape

Remarque : la section bleue indique les types de mycoplasmes détectables par les méthodes de détection isotherme en une étape et de PCR.

2. Réactif d'élimination des mycoplasmes MycAway (1000×)

Le réactif d'élimination des mycoplasmes MycAway (1000×) est une formule mixte qui élimine efficacement les mycoplasmes en inhibant la synthèse de l'ADN et des protéines essentielles à leur croissance, sans endommager les cellules. Il préserve au maximum vos cellules et réduit les pertes dues à la contamination par les mycoplasmes.

Figure 7 : Démonstration de l’effet d’élimination cellulaire

Caractéristiques du réactif d'élimination des mycoplasmes :

• Faible toxicité : Cytotoxicité minimale, n'affecte pas les expériences cellulaires ultérieures tels que les tests de viabilité cellulaire et la transfection ;
• Haute stabilité:Peut être conservé à -20°C pendant des périodes prolongées tout en conservant son efficacité ;
• Facile à utiliser:Ajoutez simplement le produit au milieu de culture contaminé par les mycoplasmes et incubez ;
• Action rapide: Résultats visibles en seulement 3 jours ;
• Large spectre: Efficace contre la plupart des types de mycoplasmes de laboratoire.

Figure 8 : Diagramme de test de cytotoxicité du réactif d'élimination des mycoplasmes

3. Prévention des mycoplasmes

Produit Information

catégorie	Nom du produit	Cat. N°	Caractéristiques
Détection	Kit de détection de mycoplasmes MycAway™ -Color en une étape	40612ES25/60	25/100 T
	Kit de détection qPCR en temps réel MycAway™ Mycoplasma	40618ES25/60	25/100 T
	Kit de test GMyc-PCR Mycoplasma	40601ES10/20	Essais 10/20
Suppression	Spray MycAway™ (prêt à l'emploi)	40605ES02/03	1/2 × 500 mL
	Traitement MycAway™ (1000×) - Réactif d'élimination des mycoplasmes	40607ES03/08	1/5 × 1 mL
Prévention	Réactif prophylactique MycAway™ (2000×) - Prévention des mycoplasmes	40608ES03/08	1/5 × 1 mL
	Solution MycGuard™ -1 (100×)	40609ES60	100 ml
	Solution MycGuard™-2 (500×)	40610ES60	100 ml