Solution globale pour la détection du virus Monkeypox de YEASEN
Le premier cas confirmé de variole du singe a été signalé au Royaume-Uni début mai, et il s'est rapidement propagé dans des pays et régions non endémiques. Au 21 septembre 2022, 106 pays/régions ont été confirmés dans le monde, avec un total de 63 117 cas. Le 16 septembre, Chongqing a confirmé un cas importé de variole du singe, le premier cas en Chine continentale, ce qui a suscité l'inquiétude de la société.
Figure 1. Carte mondiale de l'épidémie de variole du singe en 2022 (d'après le CDC)
1. Qu'est-ce que la variole du singe ?
2. L'histoire de la variole du singe
3. Comment se propage-t-il ?
4. Signes et symptômes
5. Méthode de détection
6. Correspondance des produits
7. Commande de produits
1. Qu'est-ce que la variole du singe ?
Le virus de la variole du singe est un virus à ADN double brin d'une longueur totale d'environ 197 kb. Il appartient au genre Orthopoxvirus de la famille des Poxviridae. Virus). Il existe deux branches du virus de la variole du singe (branche ouest-africaine et branche du bassin du Congo). Parmi elles, le taux de mortalité de la branche ouest-africaine est d'environ 3,6 %, et le taux de mortalité de la branche du bassin du Congo peut atteindre 10,6 %. Des échantillons de cas de variole du singe trouvés dans des zones non endémiques depuis mai 2022, l'analyse du séquençage a montré le clade ouest-africain[1].
Figure 2. Image de la variole du singe (image du CCDC)
2. L'histoire de la variole du singe
La variole du singe a été découverte en 1958, lorsque deux épidémies d’une maladie semblable à la variole se sont produites dans des colonies de singes gardées à des fins de recherche. Bien qu’elle soit appelée « variole du singe », la source de la maladie reste inconnue. Cependant, les rongeurs africains et les primates non humains (comme les singes) pourraient être porteurs du virus et infecter les humains.[2].
Le premier cas humain de variole du singe a été enregistré en 1970. Avant l’épidémie de 2022, la variole du singe avait été signalée chez des personnes dans plusieurs pays d’Afrique centrale et occidentale. Auparavant, presque tous les cas de variole du singe chez des personnes hors d’Afrique étaient liés à des voyages internationaux dans des pays où la maladie est courante ou à des animaux importés. Ces cas se sont produits sur plusieurs continents[2].
3. Comment se propage-t-il ?
Elle peut se propager des animaux aux humains, d’humain à humain et de l’environnement aux humains.
Il est désormais clair que la variole du singe peut infecter les humains de trois façons : la première est transmise des animaux infectés aux humains. Le virus peut pénétrer dans l'organisme par une lésion cutanée, les voies respiratoires ou les muqueuses (yeux, nez ou bouche). La deuxième est transmise par contact étroit entre personnes, notamment par des rapports sexuels, des baisers, des étreintes ou le contact avec les parties du corps atteintes par la variole du singe, et par contact avec des vêtements, de la literie, des serviettes ou de la vaisselle contaminés par le virus, ainsi que d'autres objets qui peuvent également être infectés. La troisième est la transmission par des gouttelettes respiratoires.[3].
4. Signes et symptômes
Les principales manifestations cliniques sont la fièvre, une éruption cutanée et une lymphadénopathie.
Les symptômes les plus courants au stade précoce comprennent de la fièvre, des maux de tête, des douleurs musculaires et un gonflement des ganglions lymphatiques. L'éruption apparaît 1 à 3 jours après le début de la maladie. L'éruption typique apparaît d'abord sur le visage et s'étend progressivement aux membres et à d'autres parties du corps. L'éruption est généralement centrifuge., les éruptions cutanées sur le visage et les membres sont plus fréquentes que sur le tronc, les éruptions cutanées peuvent apparaître sur les paumes et la plante des pieds, et le nombre d'éruptions cutanées varie de plusieurs à des milliers ; elles peuvent également toucher la muqueuse buccale, le tube digestif, les organes génitaux, la conjonctive et la cornée.
Les symptômes durent généralement de 14 à 21 jours et les patients les guérissent généralement d'eux-mêmes. Un érythème ou une hyperpigmentation, voire des cicatrices, peuvent persister après la chute des croûtes. Il convient de noter que la croûte reste contagieuse jusqu'à ce qu'elle tombe et qu'une nouvelle couche de peau se forme en dessous.[3].
5. Méthode de détection
Pour prévenir et contrôler efficacement l'épidémie de variole du singe et empêcher l'importation et la propagation du virus, les entreprises mondiales de DIV ont réagi activement. En tant que fournisseur de matières premières pour la production de réactifs de détection de DIV et des solutions réactives, YEASEN fournit une solution complète pour aider à détecter efficacement le virus de la variole du singe. De l'extraction d'acide nucléique aux composants réactifs (réactifs enzymatiques et pseudovirus) et aux kits semi-finis (sondes d'amorce, réactifs enzymatiques et contrôles plasmidiques), YEASEN peut vous fournir de manière stable.
Figure 3. Méthode de détection du virus
5.1 Avantage de la méthode
- Fonctionnement efficace et pratique : un ensemble de kits, comprenant tous les composants, sans opérations fastidieuses, ajout en une seule étape
- Sensibilité de détection élevée — Méthode d'anticorps génétiquement modifié, enzyme Taq à démarrage à chaud, 1 copie/réaction peut également être détectée
- Forte stabilité des réactifs : conserver à 37 °C pendant 1 semaine, performances stables après congélation et décongélation répétées
- Prévention de la pollution UDG — Le système dUTP/UDG est ajouté au système pour prévenir efficacement le risque de contamination par aérosol.
- Applicable à plusieurs plateformes — Convient pour Bio-Rad CFX96, ABI Q5 et Slan
5.2 Correspondance des produits
- Réactifs d'extraction d'acide nucléique : MolPure™ Kit d'ADN/ARN viral avec écouvillon magnétique (réf. 18300ES)
- Réactif de détection du Monkeypox : Kit qPCR en temps réel pour le virus de la variole du singe(Cat#13862ES/Cat#13863ES)
- Pseudovirus de la variole du singe : pseudovirus du virus de la variole du singe (Cat#12099ES/Cat#12100ES)
6. Produits recommandés
6.1 Kit qPCR en temps réel du virus de la variole du singe (réf. 13862ES)
Avantages du produit :
Fonctionnement efficace et pratique
Haute sensibilité et bonne spécificité
Super stabilité
Bonne répétabilité
6.1.1 Présentation du cas :
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Stabilité thermique exceptionnelle à 37 ℃
Le MPXV a été amplifié en plaçant le Cat#13862ES à 37℃ pendant 7 jours. Les résultats ont montré que la valeur Ct et la valeur de fluorescence n'étaient pas significativement affectées par 7 jours à 37℃, et la stabilité thermique était forte.
Figure 4. Vérification de la stabilité accélérée sur 7 jours à 37 °C de Yeasen (Cat#13862ES)
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Stabilité exceptionnelle au gel et au dégel
Le MPXV a été amplifié par congélation et décongélation du Cat#13862ES à -20℃ pendant 10 fois, 20 fois et 50 fois, respectivement.Les résultats ont montré que la congélation et la décongélation 10 fois, 20 fois et 50 fois à -20℃ n'avaient aucun effet significatif sur la valeur Ct et la valeur de fluorescence, et la stabilité à la congélation et à la décongélation était forte.
Figure 5. Vérification de la stabilité au gel-dégel à 20 °C de Yeasen (Cat#13862ES)
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Sensibilité ultra-élevée, 1 copie/μL peut également être détectée
En utilisant le produit Yeasen monkeypox (Cat#13862ESES), 1000 copies/μL, 100 copies/μL, 10 copies/μL, 1 copie/μL et un blanc négatif (NTC) ont été utilisés pour détecter le MPXV. On peut voir qu'une seule copie peut également être détectée (la valeur Ct est d'environ 38), et le test NTC à 48 puits a été répété, avec une ligne de base stable, des pics NTC négatifs et aucun phénomène de traînée, avec une sensibilité et une spécificité élevées.
Figure 6. Détection de sensibilité MPXV
Figure 7. Détection de la spécificité du MPXV
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Les réactifs sont stables et reproductibles
Le kit de détection de la variole du singe Yeasen (Cat#13862ESES) a été sélectionné pour effectuer 10 tests répétés pour des concentrations faibles, moyennes et élevées d'échantillons positifs. Les résultats ont montré que le CV des échantillons positifs dans le canal FAM était inférieur ou égal à 2 %, et que le témoin à blanc ne présentait aucun phénomène de pic ni de traînée. , bonne répétabilité.
Figure 8. Test de répétabilité
6.2 Kit qPCR en temps réel pour le virus de la variole du singe (UDG Plus)(Cat#13863ES)
Avantages du produit :
⑴ Fonctionnement efficace et pratique
⑵ Haute sensibilité et bonne spécificité
⑶ Super stabilité
⑷ Bonne répétabilité
⑸ Prévention de la pollution UDG
6.2.1 Présentation du cas :
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Stabilité thermique exceptionnelle à 37 ℃
Le MPXV a été amplifié en plaçant le Cat#13863ES à 37℃ pendant 7 jours et 14 jours, respectivement. Les résultats montrent qu'après 7 jours et 14 jours à 37℃, il n'y a pas d'effet significatif sur la valeur Ct et la valeur de fluorescence, et la stabilité thermique est forte.
Figure 9. Vérification de la stabilité accélérée sur 7 et 14 jours à 37 ℃ de Yeasen (Cat#13863ES)
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Stabilité exceptionnelle au gel et au dégel
Le Cat#13863ES a été congelé et décongelé à -20℃ pendant 50 fois pour amplifier le MPXV. Les résultats ont montré que la congélation et la décongélation à -20℃ pendant 50 fois n'avaient aucun effet significatif sur la valeur Ct et la valeur de fluorescence, et que la stabilité à la congélation et à la décongélation était forte.
Figure 10. Vérification de la stabilité au gel-dégel à -20 ℃ de Yeasen (Cat#13863ES)
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Haute sensibilité et spécificité
5 copies/μL de MPXV et un blanc négatif (NTC) ont été testés à l'aide du produit Yeasen monkeypox (Cat#13863ESES). Les résultats ont montré que la ligne de base était stable, le taux de détection de FAM était de 100 %, la limite de détection minimale était de 5 copies/μL et, lors des tests répétés de NTC sur 48 puits, la ligne de base des canaux FAM et VIC était stable, le pic négatif de NTC ne présentait aucun phénomène de traînée et présentait une sensibilité et une spécificité élevées.
Figure 11. Détection de sensibilité MPXV
Figure 12. Détection de la spécificité du MPXV
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Bonne linéarité des réactifs
Le modèle positif a été dilué 10 fois à partir de la concentration de 1 × 105 copies/μL, et le kit Yeasen qPCR monkeypox (Cat#13863ES) a été utilisé pour répéter la détection deux fois. Le logarithme du nombre de copies initial est l'abscisse et la valeur Ct est l'ordonnée. La courbe standard a été réalisée et les résultats ont montré que le canal FAM du gène monkeypox avait une plage linéaire de 10~1 × 105 copies/μL, et R2>0,99, ce qui présentait une bonne relation linéaire.
Figure 13. Test de linéarité
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Réactifs stables et reproductibles
Le kit Yeasen qPCR monkeypox (Cat#13863ES) a été sélectionné pour effectuer 10 tests répétés pour les concentrations faibles, moyennes et élevées de positifs, et 20 tests répétés pour le contrôle négatif (NC) et le contrôle à blanc (NTC). Les résultats montrent que : canal FAM Le CV des échantillons positifs est inférieur à 3 %, et le contrôle négatif et le contrôle à blanc ne présentent aucun phénomène de pic ni de traînée ; les valeurs Ct du canal VIC NC sont toutes inférieures à 35, le CV est inférieur à 0,3 %, et le NTC ne présente aucun phénomène de pic ni de traînée, et la répétabilité est bonne.
Figure 14. Test de répétabilité (FAM)
Figure 15. Test de répétabilité (VIC)
7. Commande de produits
Fondée en 2014, Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd. est une entreprise de haute technologie spécialisée dans la recherche et le développement et la production de matières premières enzymatiques et d'anticorps antigéniques. Ses produits comprennent des enzymes de diagnostic moléculaire, des protéines et des anticorps utilisés dans les produits pharmaceutiques, les tests de sécurité alimentaire, l'élevage, la justice et d'autres industries. Nous nous engageons à fournir aux clients du domaine des sciences de la vie des produits et services de haute qualité. Les directives d'achat de produits pour le virus Monkeypox sont les suivantes :
Tableau 1.Produits connexes
Type de produit | Produit Description | Produit Nom | Numéro d'article | Spécification |
TROUSSE | Mélange d'enzymes | Kit qPCR en temps réel du virus de la variole du singe (renseignez-vous) | 13862ES03 | 24T |
13862ES48 | 48T | |||
13862ES59 | 96T | |||
13863ES25 | 25T | |||
13863ES60 | 100T | |||
13863ES80 | 1000T | |||
Pseudovirus | Gène F3L | Virus de la variole du singe F3L-Pseudovirus (se renseigner) | 12099ES03 | 1 ml |
12099ES08 | 5 × 1 mL | |||
B6R Gène | Virus de la variole du singe B6R-Pseudovirus (renseigner) | 12100ES03 | 1 ml | |
12100ES08 | 5 × 1 mL |
Références
[1] Centre chinois de contrôle et de prévention des maladies : Conseils de santé sur la variole du singe
[2] CDC : À propos de la variole du singe | La variole du singe | Poxvirus | CDC
[3] Yulin Evening News : La source du premier cas de variole du singe en Chine continentale a été identifiée ! Rappel d'urgence sur le contrôle des maladies au Guangxi