La technologie d'amplification isotherme des acides nucléiques (INAAT) est principalement utilisée en biologie moléculaire pour identifier et analyser les acides nucléiques. Elle est principalement utilisée pour l'ADN, l'ARN, les protéines cellulaires, les ions, les molécules, etc. INAAT fournit un diagnostic rapide, sensible et précis des maladies génétiques et infectieuses. Ses produits amplifiés peuvent être utilisés dans les biocapteurs, la bioimagerie et la biomédecine. De plus, INAAT est utilisé pour détecter diverses maladies telles que la grippe, le VIH, la tuberculose, la chlamydia, la gonorrhée (CT/NG), l'hépatite A et l'hépatite B, etc. Selon la technologie, l'amplification isotherme peut être divisée en LAMP, RPA, CPA, SDA, RCA, HDA, etc. Alors, qu'est-ce que LAMP ? Quels sont les avantages de RT-LAMP ?

1. Qu'est-ce que LAMP ?
2. Quels sont les avantages de RT-LAMP ?
3. Quelles sont les caractéristiques du « Cat#13762 » Kit de test de coloration RT-LAMP (UDG plus)"?
4. Quelles sont les caractéristiques du « Kit de colorants sensibles au pH RT-LAMP Cat#13906 » ?
5. Peut-on le lyophiliser en billes lyophilisées ?
6. Quels produits pouvons-nous recommander ?

1. Qu'est-ce que LAMP ?

LAMP est actuellement une technologie largement utilisée dans le domaine de l'amplification isotherme. Elle utilise 4 à 6 amorces qui peuvent identifier 6 régions spécifiques sur le gène cible et s'appuie sur la forte activité de déplacement de brin de l'ADN polymérase Bst. L'amplification interne du produit cible peut atteindre 10⁹-10¹⁰ Il existe de nombreuses méthodes de détection LAMP, notamment la méthode du colorant, la méthode colorimétrique du pH, la méthode de la turbidité, le HNB, la calcéine, etc. La méthode de fluorescence et les kits de détection du pH nouvellement développés par notre société ont une sensibilité élevée, une bonne applicabilité des amorces et d'excellentes performances en termes de spécificité, de tolérance et de stabilité. Par rapport à des produits similaires, il présente des avantages évidents.

2. Quels sont les avantages de RT-LAMP ?

Facile à utiliser : temps de réaction court, faibles exigences en matière d'environnement de laboratoire, peut être utilisé avec des puces microfluidiques ou des détecteurs portables pour une détection rapide ;
Sensibilité : système 50 copies/T, 25 μL ;
Bonne applicabilité des amorces : l'amorce N-2, l'amorce du gène E, l'amplification de l'amorce de référence interne, etc. ont une bonne applicabilité ;
Spécificité : le NTC à 48 puits ne présente aucun pic et la spécificité est forte ;
Tolérance : bonne tolérance à certains agents de libération d’acides nucléiques ;
Haute stabilité : stable à 37°C pendant 5 jours avec une bonne stabilité, et peut résister à des congélations et décongélations répétées plus de 10 fois ;
Avantage du marché : les performances sont supérieures à celles des produits concurrents nationaux et étrangers similaires, et le rapport coût-performance est élevé.

3. Quelles sont les caractéristiques du « Kit d'analyse de colorant RT-LAMP Cat#13762 (UDG plus) » ?

3.1 Haute sensibilité

Figure 1. Test de sensibilité

Rouge : 50 copies/T, réponse inférieure à 15 minutes
Bleu : 25 copies/T, réponse inférieure à 15 minutes
Les deux nombres de copies de 50 copies/T et 25 copies/T ont été testés respectivement. Les résultats du test ont montré qu'en 15 minutes, les résultats de 50 copies/T étaient meilleurs et le taux de détection a atteint 100 %.

3.2 Adéquation de l'apprêt

Figure 2. Détection de l'adéquation de l'amorce d'acide nucléique verrouillée N5

Violet : Yeasen  Bleu : Compagnie N

Figure 3.Test d'adéquation de l'amorce N

Vert : Yeasen     Rouge : Compagnie N

Figure 2, Figure 3 : Dans la détection spécifique des amorces d'acide nucléique verrouillées N5 et des amorces N, selon 50 copies/T, la détection correspondante a été réalisée en utilisant les marques Yeasen et N. Les résultats ont montré que l'applicabilité des amorces d'acide nucléique verrouillées N5 était meilleure que celle des marques N. L'applicabilité des amorces N est la même pour les deux produits.

Figure 4. Détection de l'adéquation de l'amorce ACTIN

Violet : Yeasen     Bleu : Compagnie N

15 ng de 293ADN ont été testés pour déterminer l'adéquation de l'amorce ACTIN en utilisant les marques Yeasen et N. Les résultats ont montré que Yeasen avait une excellente applicabilité.

3.3 Spécificité

Figure 5. Dosage spécifique NTC à 48 puits

La détection NTC à 48 puits a été utilisée dans la détection spécifique du produit, et aucun pic n'a été détecté, indiquant que la spécificité était meilleure.

3.4 Tolérance

Figure 6. Test de tolérance du libérateur d'acide nucléique

Rouge : Matrice DEPC H₂O
Vert : 50 % chacun d'agent de libération d'acide nucléique et de DEPC H₂O
Bleu : agent de libération d'acide nucléique à 100 %
Utilisation de la matrice DEPC H₂O, agent de libération d'acide nucléique et DEPC H₂Des tests ont été réalisés avec un agent de libération d'acide nucléique à 50 % et à 100 %. Les résultats montrent que ce produit présente une excellente tolérance aux agents de libération d'acide nucléique.

3.5 Stabilité

Figure 7. Test de stabilité à la même température

Rouge : 37℃ 0 jour Bleu : 37℃ 1 jour Vert : 37℃ 3 jours Violet : 37℃ 5 jours
0 jour à 37°C comme contrôle et des tests de stabilité ont été effectués pendant 1, 3 et 5 jours à la même température, indiquant qu'il peut encore maintenir un effet relativement stable à 37°C pendant 5 jours.

Figure 8. Test de stabilité répété au gel-dégel à -20 ℃

Rouge : Répéter le gel-dégel 0 fois
Bleu : Répétez le gel-dégel 5 fois
Vert : Répétez le gel-dégel 10 fois

Figure 9. Test de stabilité répété de la glace sèche au gel et au dégel

Rouge : Répéter le gel-dégel 0 fois
Violet : Répétez le gel-dégel 5 fois
Test répété de stabilité au gel-dégel à -20°C et sur glace sèche. Il a été constaté que la stabilité du gel-dégel a été répétée 10 fois à -20°C et 5 fois sur glace sèche.

3.6 Comparaison de produits similaires

Figure 10. Comparaison des effets de produits similaires

Rouge : Yeasen  Bleu : Marque N1  Vert : Marque N2
En utilisant l'amorce du gène N, dans le cas de 50 copies/T, en utilisant Yeasen, la marque N1 et la marque N2 pour la vérification de la comparaison des produits, les produits Yeasen ont obtenu de bons résultats.

6. Quels produits pouvons-nous recommander ?

Les produits fournis par Yeasen sont les suivants.

Tableau 1.Informations sur le produit