Le Wnt3a humain exprimé dans les cellules HEK293 présente une grande activité favorisant la culture des organoïdes

Les organoïdes sont des modèles tridimensionnels créés in vitro ressemblant étroitement à des tissus ou organes naturels, et ils revêtent une importance considérable dans les domaines de la modélisation des maladies, du rajeunissement des organes et des soins médicaux individualisés. La culture de ces organoïdes nécessite une gestion minutieuse d'un large éventail de cytokines, Wnt3a se distinguant par un facteur fréquemment utilisé qui joue un rôle essentiel dans la nutrition des organoïdes dérivés d'une large gamme de tissus.

Qu'est-ce que Wnt-3a ?

Wnt-3a appartient à la famille Wnt, un groupe de protéines sécrétées comprenant 19 variantes humaines, dont Wnt1, Wnt2, Wnt2b (Wnt13), Wnt3, Wnt3a, Wnt4, Wnt5a, Wnt5b, Wnt6, Wnt7a, Wnt7b, Wnt8a, Wnt8b, Wnt9a (également connu sous le nom de Wnt14), Wnt9b (Wnt14b), Wnt10a, Wnt10b, Wnt11 et Wnt16. Cette famille est caractérisée par sa conservation et sa composition riche en cystéine. Les protéines Wnt facilitent la voie de signalisation Wnt en se liant aux récepteurs de la membrane cellulaire ou aux récepteurs de la membrane cellulaire voisins. Cette voie peut être classée en voie canonique, médiée par la β-caténine, qui comprend Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt7a, Wnt8, Wnt8b et Wnt10a, et voie non canonique, indépendante de la β-caténine, qui englobe Wnt4, Wnt5a, Wnt6 et Wnt11. Wnt3a, en tant que membre par excellence de la famille Wnt, est omniprésent et exerce un rôle central dans la régulation de diverses fonctions cellulaires, telles que l'auto-renouvellement, la prolifération, la différenciation et la motilité.

Mécanisme de transduction de la voie de signalisation Wnt-3a

La voie de signalisation Wnt est un réseau multiforme d'interactions protéiques principalement associées au développement embryonnaire et au cancer. Cependant, elle joue également un rôle dans les processus physiologiques normaux des organismes adultes. Wnt3a se lie à son récepteur, la protéine Frizzled (Fz), ainsi qu'à la protéine co-réceptrice LRP5/6, activant ensuite la protéine d'échafaudage Disheveled (Dvl). Cette activation conduit au désassemblage du « complexe de destruction », qui se compose de la caséine kinase 1 (CK1), de la glycogène synthase kinase-3β (GSK-3β) et des protéines d'échafaudage APC, Axin1 et Axin2. La dissolution de ce complexe stabilise la protéine β-caténine libre dans le cytoplasme. La β-caténine accumulée dans le cytoplasme se déplace ensuite vers le noyau, où elle se lie aux facteurs de transcription de la famille TCF/LEF, activant finalement les gènes cibles en aval tels que c-myc et Cycline D1. Cette cascade induit des réponses cellulaires ultérieures. En résumé, la voie de signalisation Wnt peut être simplifiée comme suit : Wnt3a→FZD→DVL→dissolution du complexe→la β-caténine entre dans le noyau→TCF/LEF→transcription génique en aval. Sans Wnt3a, la β-caténine est normalement dégradée dans le cytoplasme par le « complexe de destruction », qui la cible pour l'ubiquitination et la dégradation ultérieure dans le protéasome. En conséquence, elle ne peut pas entrer dans le noyau pour initier la transcription des gènes en aval. La voie de signalisation Wnt/β-caténine est hautement conservée tout au long de l'évolution et joue un rôle fondamental dans le développement embryonnaire, la croissance cellulaire, la différenciation, la formation de polarité, le développement neuronal et la carcinogenèse.

Wnt3a et les organoïdes

Wnt3a occupe une position centrale en tant que l'un des facteurs de culture les plus fréquemment utilisés pour la génération d'organoïdes. Son activité élevée, sa cohérence entre les lots, son absence de contamination et sa préparation sans sérum sont des facteurs clés contribuant au succès des expériences sur les organoïdes.Wnt3a est largement utilisé dans les cultures d'organoïdes de divers tissus, notamment l'intestin, l'estomac, le pancréas, le foie, la thyroïde, l'œsophage et le système nerveux. Dans le but d'aider les chercheurs scientifiques et les sociétés pharmaceutiques dans leurs études sur l'application clinique de Wnt3a dans la formation d'organoïdes et la recherche sur les tumeurs, YEASEN a lancé un produit protéique Wnt3a hautement actif (catalogue : 92276ES) conçu pour faciliter la culture d'organoïdes.

Figure 3. Mesuré par sa capacité à induire l'activité du rapporteur Topflash dans les cellules rénales embryonnaires humaines HEK293T. La DE50 pour cet effet est de 25 ng/mL.

Validation de la culture d'organoïdes

Yeasen Les cytokines ont été vérifiées sur des organoïdes tumoraux humains tels que le cancer du poumon, le cancer du col de l'utérus, le cancer de l'ovaire, le cancer du pancréas et le cancer de l'intestin, ainsi que sur des organoïdes normaux tels que les organoïdes de l'intestin grêle humain et murin.

Cytokines apparentées information