Yeasen Gel d'affinité anti-DYKDDDDK (Flag) : purification de précision pour les protéines membranaires à faible abondance

Dans le domaine de la recherche biomédicale, la purification des protéines est une technologie clé pour explorer les mystères de la vie. Cependant, les méthodes de purification traditionnelles sont inefficaces et coûteuses, en particulier pour les protéines membranaires, qui sont au cœur de la recherche en biologie structurale. Ces protéines sont structurellement complexes, ont de faibles niveaux d’expression dans les membranes cellulaires et sont sensibles aux conditions environnementales, ce qui rend leur purification particulièrement difficile. Yeasen Biotech, avec ses capacités de R&D exceptionnelles, a lancé la version améliorée Gel d'affinité anti-DYKDDDDK (Flag) (Cat#20584ES), un outil puissant pour une purification efficace et pratique des protéines, même pour les protéines membranaires difficiles.

Performances du produit

1. Haute spécificité et capacité de liaison élevée : avantages clés pour la capture des protéines cibles

Yeasen Gel d'affinité anti-DYKDDDDK (Flag) (Cat#20584ES) est préparé en couplant de manière covalente des anticorps monoclonaux IgG2b de souris de haute qualité avec un gel d'agarose hautement réticulé à 4 %. Ce procédé de fabrication unique confère au produit une spécificité extrêmement élevée, lui permettant de reconnaître et de lier avec précision les protéines de fusion avec l'étiquette Flag. Qu'il s'agisse de la protéine de fusion Flag N-terminale modifiée par Met (Protéine Met-Flag), la protéine de fusion Flag N-terminale (Drapeau-Protéine), ou la protéine de fusion Flag C-terminale (Drapeau protéiné), le gel peut les gérer facilement.

Dans la purification des protéines membranaires, cette spécificité est particulièrement importante car ces protéines sont structurellement complexes et sujettes à une liaison non spécifique avec d'autres protéines. La spécificité élevée du gel Flag réduit efficacement l'interférence des protéines non spécifiques, garantissant une grande pureté des protéines membranaires purifiées. De plus, le gel a une capacité de liaison élevée pour les protéines de fusion marquées Flag (au moins 1,1 mg de protéines/mL (gel). Cela signifie que même si la protéine cible est exprimée à de faibles niveaux, elle peut toujours être efficacement capturée et purifiée à l'aide du gel Flag.

2. Haute pureté et haut rendement : permettre des applications en aval

Yeasen Gel d'affinité anti-DYKDDDDK (Flag) (Cat#20584ES) présente une liaison non spécifique minimale des impuretés, ce qui permet d'obtenir des échantillons de protéines très purs après purification. Cela est crucial pour les applications en aval telles que les tests de bioactivité et l'analyse structurelle. Les échantillons de protéines de haute pureté fournissent des données expérimentales plus précises, établissant ainsi une base solide pour les études des chercheurs.

3. Flux de travail expérimental optimisé : simplification des défis de purification des protéines

La purification des protéines doit être réalisée dans des conditions douces pour éviter d’endommager la structure des protéines, en particulier pour les protéines membranaires complexes. Yeasen Gel d'affinité anti-DYKDDDDK (Flag) (Cat#20584ES) est conçu dans cet esprit. Sa mémoire tampon de stockage est TBS contenant 50% de glycérol à pH 7.4, qui non seulement protège l'activité du gel mais fournit également un environnement doux pour la purification des protéines.

Le processus de purification avec le gel Flag est simple et efficace. Pour faciliter l'utilisation de l'élution du peptide Flag 1×, le pack du produit comprend un peptide Flag 1× gratuit (Cat#20572ES). Cela rend le processus d'élution doux (avec presque aucun dommage aux protéines) et très pratique (améliorant encore la facilité d'expérimentation).

4. Plusieurs tailles et options d'expédition flexibles : répondre à divers besoins expérimentaux

Compte tenu des différentes échelles et des besoins des différents laboratoires, Yeasen propose le gel Flag en plusieurs tailles, notamment 1 ml, 5 ml, 25 ml et 100 mlQu'il s'agisse d'une exploration préliminaire à petite échelle ou d'une production de protéines à grande échelle, il existe une option adaptée. Pour les achats annuels en gros volume, les clients peuvent choisir de recevoir les expéditions par lots, ce qui leur permet de bénéficier de remises sur les prix tout en évitant la pression d'un inventaire excessif.

Données de test

M : Marqueur protéique 1 : Échantillon brut pré-colonne de protéine Flag-N/Flag-M/Flag-C 2 : Flux post-colonne de la protéine Flag-N/Flag-M/Flag-C 3 : Élution (élution à pH 2,7) 4 : Élution (élution à pH 12) 5 : Élution (1×Élution du peptide drapeau) 6 : Gel purifié (élution pH 2,7) 7 : Gel purifié (élution pH 12) 8 : Gel purifié (1×Élution du peptide drapeau) un：Drapeau-N   b：Drapeau-M   c：Drapeau-C

Figure 1.   Yeasen Gel d'affinité anti-DYKDDDDK (Flag) résultats de purification pour les protéines à faible expression (Flag-N (a), Flag-M (b), Flag-C (c)) présentés en SDS-PAGE.

M : Marqueur protéique 1 : Échantillon brut pré-colonne de protéine Flag-C 2 : Flux post-colonne de la protéine Flag-C 3 : Élution (élution à pH 2,7) 4 : Élution (élution à pH 12) 5 : Élution (1×Élution du peptide drapeau) 6 : Gel purifié (pH 2.7 élution) 7 : Gel purifié (élution pH 12) 8 : Gel purifié (1×Élution du peptide drapeau) un：Yeasen b：Marque S*   c：Marque G*

Chiffre 2. Comparaison de Yeasen (a) avecBrand S* (b) et BGels anti-drapeau rand G* (c) dans la purification de protéines à faible expression (par exemple, protéines membranaires) présentés en SDS-PAGE.

Conclusions :

1. Yeasen Gel d'affinité anti-DYKDDDDK (Flag) (Cat#20584ES) présente une spécificité élevée et peut se lier aux étiquettes Flag dans diverses positions (protéines de fusion Flag N-terminales, protéines de fusion Flag N-terminales modifiées par Met, protéines de fusion Flag C-terminales).

2. Dans des conditions d’expression extrêmement faible de la protéine cible (par exemple, les protéines membranaires), Yeasen Gel d'affinité anti-DYKDDDDK (Flag) (Cat#20584ES) atteint des rendements et des puretés nettement supérieurs à ceux des concurrents. L'utilisation de Yeasen le peptide 1×Flag gratuit (Cat#20572ES) pour l'élution fournit des résultats encore meilleurs.

Solutions complètes pour les protéines de fusion marquées par un drapeau :

Entérokinase recombinante (Cat#20395ES):Une protéase spécifique qui clive l'extrémité carboxyle de la lysine précédée de quatre acides aspartiques : Asp-Asp-Asp-Asp-Lys. Cette séquence fait partie de l'étiquette Flag de l'octapeptide (DYKDDDDK). L'entérokinase recombinante (rEK) peut facilement retirer l'étiquette Flag des protéines de fusion, ce qui en fait un outil idéal pour étudier la structure et la fonction des protéines natives.

Perles magnétiques anti-DYKDDDDK (drapeau) (Cat#20565ES):Microsphères magnétiques polymères préparées en couplant de manière covalente des anticorps monoclonaux de souris anti-DYKDDDDK (Flag) de haute qualité avec des billes magnétiques à base de silice (diamètre de 200 nm). Ces billes conviennent à l'immunoprécipitation (IP) ou à la co-immunoprécipitation (Co-IP) de protéines portant le tag Flag.

Informations sur le produit

Nom du produit	Numéro de produit	Spécification
Gel d'affinité anti-DYKDDDDK (Flag)	20584ES03/25/08	1 mL/5 mL/25 mL
Entérokinase bovine recombinante, His, exprimée dans la levure	20395ES60/76/90	100 Tu/500 U/5000 U
Perles magnétiques anti-DYKDDDDK (drapeau)	20565ES03/08	1 mL/5 mL