उत्पाद परिचय

कोलेजनेज एंडोन्यूक्लिऐसेस का एक वर्ग है जो विशेष रूप से प्रो-एक्स-ग्लाइ-प्रो अनुक्रम (जो कोलेजन में अक्सर पाया जाता है और अन्य प्रोटीनों में बहुत कम पाया जाता है) को पहचान सकता है, तथा इस अनुक्रम में तटस्थ अमीनो एसिड (एक्स) और ग्लाइसिन (ग्लाइ) के बीच पेप्टाइड बंध को तोड़ सकता है, तथा संयोजी ऊतक में कोलेजन को हाइड्रोलाइज कर सकता है।

अनेक प्रोटीएज़ एकल-रज्जुकीय तथा विकृत कोलेजन पेप्टाइड्स को जल-अपघटित करने में सक्षम होते हैं, लेकिन कोलेजनेज एकमात्र ऐसा प्रोटीएज़ है, जो तीन-रज्जुकीय सुपरकोइल्ड संरचना वाले प्राकृतिक कोलेजन फाइबर को विघटित कर सकता है, तथा यह संयोजी ऊतकों में व्यापक रूप से पाया जाता है, जिनमें से सबसे अधिक शक्तिशाली अवायवीय जीवाणु क्लॉस्ट्रिडियम हिस्टोलिटिकम द्वारा स्रावित "कच्चा" कोलेजनेज है।

येसेन कोलेजनेज क्लॉस्ट्रिडियम हिस्टोलिटिकम से प्राप्त होता है, जो एक एंजाइम "मोटे" अर्क है, जिसमें न केवल कोलेजनेज होता है जो प्राकृतिक कोलेजन और जालीदार फाइबर को ख़राब कर सकता है, बल्कि इसमें कुछ अन्य प्रोटीएज़ जैसे पॉलीसैकराइडेस, लिपेस आदि भी होते हैं, जो संयोजी ऊतक और उपकला ऊतक के बाह्य कोशिकीय मैट्रिक्स में अन्य प्रोटीन, पॉलीसैकराइड और लिपिड को प्रभावी रूप से हाइड्रोलाइज़ कर सकते हैं, इसलिए यह ऊतक पाचन के लिए अधिक उपयुक्त है।

वर्तमान में, बाजार पर बैक्टीरियल कोलेजनेज को कोलेजनेज की गतिविधि में अंतर के अनुसार मुख्य रूप से पांच प्रकारों में विभाजित किया गया है: कोलेजनेज प्रकार I, प्रकार II, प्रकार III, प्रकार IV और प्रकार V।

कोलेजनेज़ का चयन

प्रोडक्ट का नाम	उपस्थिति	एंजाइम गतिविधि	आवेदन का दायरा
प्रकार I कोलेजनेज़）	भूरा या तन रंग का क्रिस्टलीय पाउडर	≥250 U/mg ठोस	इसमें उपकला, फेफड़े, वसा और अधिवृक्क ऊतक कोशिकाओं के पृथक्करण के लिए (कोलेजनेज, केसिनेज, क्लॉस्ट्रिडिया और ट्रिप्सिन) गतिविधि शामिल है।
प्रकार II कोलेजनेज़）	भूरा या तन रंग का क्रिस्टलीय पाउडर	≥125 U/mg ठोस	इसमें क्लोस्ट्रीडेस की अधिक सक्रियता होती है और यह यकृत, हड्डी, थायरॉयड, हृदय और लार ग्रंथि ऊतक कोशिकाओं के पृथक्करण के लिए उपयुक्त है
प्रकार III कोलेजनेज़）	भूरा या तन रंग का क्रिस्टलीय पाउडर	≥100 U/mg ठोस	इसमें कम प्रोटीयोलाइटिक गतिविधि होती है, जो पाचन ऊतक के जंक्शन भाग के लिए प्रभावी है, और अक्सर स्तनधारी ऊतक कोशिकाओं के पृथक्करण के लिए उपयोग किया जाता है
प्रकार IV कोलेजनेज़）	भूरा या तन रंग का क्रिस्टलीय पाउडर	≥125 सीडीयू/मिलीग्राम ठोस*	इसमें ट्रिप्सिन की कम सक्रियता होती है और इसका उपयोग आमतौर पर आइलेट और रिसेप्टर अखंडता के लिए कोशिका की तैयारी में किया जाता है
प्रकार वी कोलेजनेज़）	भूरा या तन रंग का क्रिस्टलीय पाउडर	≥125 सीडीयू/मिलीग्राम ठोस*	इसमें कम से कम 7 प्रोटीएज़ घटक होते हैं, जिनका उपयोग अग्नाशयी आइलेट ऊतक को अलग करने और संयोजी ऊतक को एकल कोशिकाओं में अलग करने के लिए किया जा सकता है

*सीडीयू = कोलेजन पाचन इकाइयाँ

उत्पाद की विशेषताएँ

1. उच्च पाचन क्षमता: क्लोस्ट्रीडियम हिस्टोलिटिकम के कच्चे एंजाइम अर्क में ऊतकों के लिए उच्च पाचन क्षमता होती है।
2. उत्प्रेरकों पर निर्भर: कोलेजनेज को सक्रिय करने वाले एंजाइमों की गतिविधि पर निर्भर रहना पड़ता है, जैसे कि Ca जैसे द्विसंयोजी धनायन।²⁺और Zn²⁺.
3. अवरोधकों से प्रभावित: कोलेजनेज़ के अवरोधकों में EDTA, EGTA आदि शामिल हैं; दूसरा है भारी धातु आयन (Hg²⁺, पीबी²⁺, सीडी²⁺); सिस्टीन, हिस्टिडीन, डीटीटी, 2-मर्कैप्टोएथेनॉल, ओ-फेनैंथ्रोलाइन आदि कुछ रासायनिक एजेंट भी हैं, जिनका कोलेजनेज़ पर निरोधात्मक प्रभाव होता है।
4. मजबूत हस्तक्षेप प्रतिरोध: कोशिकाओं के संवर्धन के लिए प्रयुक्त सीरम से कोलेजन प्रभावित नहीं होगा।

उपयोग हेतु सावधानियां

1. उपयोग: हैंक, अर्ल या अन्य संतुलित नमक के घोल में घोलें, अनुशंसित कार्यशील सांद्रता 0.05% ~ 0.5% (w/v) है
2. भंडारण तापमान: 2-8°C
3. उपयोग हेतु सुझाव:

(1) कोलेजन संरचना और जैवसंश्लेषण के अध्ययन के लिए, उच्च शुद्धता वाले कोलेजनेज की तैयारी अक्सर उपयोग की जाती है, और कोई अन्य प्रोटीयोलाइटिक गतिविधियों का उपयोग नहीं किया जाता है।

(2) ऊतक पृथक्करण के लिए, कच्चे कोलेजनेज़ की तैयारी, जैसे कि इलास्टेज, ट्रिप्सिन या पपैन, अक्सर उपयोग किए जाते हैं।

सामान्य प्रश्न

1. प्रयोग के दौरान पाचन क्रिया ख़राब होना

(1) यदि यह कमजोर एंजाइम गतिविधि या अपर्याप्त कैल्शियम आयनों के कारण होता है, तो कोलेजनेज को कम तापमान और शुष्क परिस्थितियों में संग्रहित किया जाना चाहिए, और कोलेजनेज समाधान को अलग करने के बाद जमाया जाना चाहिए

(2) यदि यह अपर्याप्त कैल्शियम आयनों के कारण होता है, तो कोलेजनेज़ समाधान में कैल्शियम आयनों की सांद्रता 5mM होनी चाहिए

2. उपयोग के दौरान कोशिका मृत्यु हो जाती है

(1) यदि प्रोटीज की अधिकता हो तो प्रोटीज संपर्क समय कम कर देना चाहिए या एल्बुमिन या निष्क्रिय सीरम मिला देना चाहिए

(2) यदि pH बदलता है, तो बफर (जैसे, HBSS) का उपयोग किया जाना चाहिए; अपने pH को बार-बार जांचें और समायोजित करें

(3) यदि ऑक्सीजन बहुत कम है, तो पाचन समाधान को बाँझ हवा से हवादार किया जाना चाहिए

3. प्रयोग के दौरान कोशिकाएँ क्षतिग्रस्त हो गईं

यदि यह बहुत अधिक प्रोटीएज़ के कारण होता है, तो प्रोटीएज़ की मात्रा कम कर देनी चाहिए या एल्बुमिन या निष्क्रिय सीरम मिला देना चाहिए

आदेश

सूची की संख्या	प्रोडक्ट का नाम	आकार
40507ES60	कोलेजनेज़ I	100 मिलीग्राम, 1 ग्राम
40508ES60	कोलेजनेज़ II	100 मिलीग्राम, 1 ग्राम
40509ES60	कोलेजनेज़ III	100 एमजी
40510ES60	कोलेजनेज़ IV	100 मिलीग्राम, 1 ग्राम
40511ES60	कोलेजनेज़ वी	100 एमजी

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सूची की संख्या	प्रोडक्ट का नाम	आकार
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