मैक्रोफेज ध्रुवीकरण और ट्यूमर कोशिका हत्या पर आरओएस उत्पादन का प्रभाव (पीएमआईडी: 35665496; पीएमआईडी: 35301299; पीएमसीआईडी: PMC8931093पीएमसीआईडी: PMC9353410.

सामान्य प्रश्न

प्रश्न 1: आरओएस परीक्षण के लिए कौन से नमूने उपयुक्त हैं?

A1: इसका उपयोग आम तौर पर स्तनधारी कोशिकाओं का पता लगाने के लिए किया जाता है, और यह केवल जीवित कोशिकाओं या विवो में प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों का पता लगाने के लिए उपयुक्त है।

प्रश्न 2: क्या आरओएस परीक्षण किट सीरम या प्लाज्मा में पता लगाने के लिए उपयुक्त है?

A2: सीरम या ऊतक होमोजीनट में ROS का पता लगाने के लिए उपयुक्त नहीं है। ताजा ऊतक से तैयार एकल-कोशिका निलंबन का प्रयास किया जा सकता है।

प्रश्न 3: क्या पौधों या बैक्टीरिया का पता लगाया जा सकता है?

A3: यह केवल जीवित कोशिकाओं या विवो में प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों का पता लगाने के लिए उपयुक्त है, क्योंकि ऑक्सीजन के हाइड्रॉक्सिल रेडिकल और सुपरऑक्साइड रेडिकल का आधा जीवन बहुत छोटा है, और यह केवल जीवित कोशिकाओं का पता लगाने के लिए उपयुक्त है। पौधे या बैक्टीरिया, जिनका उपयोग प्रोटोप्लास्ट की तैयारी के बाद पता लगाने के लिए किया जा सकता है, यह किट विवो में आरओएस का पता नहीं लगा सकती है।

प्रश्न 4: मैं अत्यधिक प्रतिदीप्ति पृष्ठभूमि से कैसे बच सकता हूँ?

A4: जांच ऊष्मायन के बाद, किसी भी शेष जांच को धोना सुनिश्चित करें जो सेल में प्रवेश नहीं किया है।

प्रश्न 5: क्या मैं सामान्य कोशिकाओं में ROS की मात्रा का पता लगा सकता हूँ?

A5: सामान्य कोशिकाओं में प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों की सामग्री बहुत कम होती है, और पता लगाने का प्रभाव बहुत अच्छा नहीं हो सकता है।

प्रश्न 6: नकारात्मक और सकारात्मक प्रतिदीप्ति मान समान हैं, क्या हो रहा है?

A6: यह जांच की एकाग्रता के कारण हो सकता है बहुत बड़ा है, यह जांच एकाग्रता 5-7.5 μM और ऊष्मायन समय को कम करने की सिफारिश की जाती है: 15-20 मिनट।

प्रश्न 7: सकारात्मक नियंत्रण की प्रतिदीप्ति कमजोर है, क्या हो रहा है?

A7: सकारात्मक नियंत्रण रोसुप को आमतौर पर 100 μM पर केंद्रित किया गया था, और उत्तेजना के 30 मिनट -4 घंटे बाद प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों में उल्लेखनीय वृद्धि देखी गई थी। प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों के सकारात्मक नियंत्रण का प्रभाव विभिन्न कोशिकाओं के बीच बहुत भिन्न हो सकता है। यदि उत्तेजना के बाद 30 मिनट के भीतर ROS में वृद्धि नहीं देखी जाती है, तो प्रेरण समय बढ़ाया जा सकता है या रोसुप की सांद्रता को उचित रूप से बढ़ाया जा सकता है।

A8: एक ही जांच, विभाजित नहीं, पहले 5 बार प्रभाव बहुत अच्छा है, इस बार यह रंगा नहीं है, क्या बात है?

प्रश्न 8: 1. सेल की स्थिति अच्छी नहीं है, जिसके परिणामस्वरूप धुंधलापन दक्षता कम है; 2. सकारात्मक दवा का प्रेरण समय बहुत कम है, और 37 डिग्री सेल्सियस पर अंधेरे में 30 मिनट-4 घंटे तक इनक्यूबेट करके प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों का स्तर काफी हद तक बढ़ाया जा सकता है; 3. जांच को 4 बार से अधिक बार जमाया और पिघलाया गया है, धुंधलापन दक्षता कम हो गई है, और प्रतिदीप्ति संकेत अस्थिर है (कभी-कभी मजबूत, कभी-कभी कमजोर, और बुझाने में आसान)। यह अनुशंसा की जाती है कि जांच को अलग किया जाए और बार-बार जमने-पिघलने के चक्रों से बचने के लिए प्रकाश से सुरक्षित -20 डिग्री सेल्सियस फ्रीजर में संग्रहीत किया जाए।

प्रश्न 9: परीक्षण के लिए कौन से उपकरणों का उपयोग किया जा सकता है?

A9: प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप, लेजर कन्फोकल माइक्रोस्कोप, प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रोफोटोमीटर, प्रतिदीप्ति माइक्रोप्लेट रीडर, फ्लो साइटोमीटर, आदि प्रतिदीप्ति मान का पता लगा सकते हैं।

इस उत्पाद का उपयोग करने वाले ग्राहकों द्वारा प्रकाशित वैज्ञानिक अनुसंधान प्रकाशन (आंशिक)

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