--येसेन ट्यूनल परख किट अधिक सुंदर प्रतिदीप्ति दिखाता है

टीडीटी ट्रांसफ़ेरेस द्वारा फ्लूओरेसिन-डीयूटीपी को निक्ड डीएनए से बांधना एपोप्टोसिस का पता लगाने के लिए सबसे आम तरीकों में से एक है, उदाहरण के लिए रोश से इन सीटू सेल डेथ किट इसी सिद्धांत पर आधारित है। उत्पाद में टीडीटी ट्रांसफ़ेरेस गतिविधि सीधे लेबलिंग दक्षता को प्रभावित करती है। एंजाइम उत्पादन पर आधारित येसेन बायोलॉजिकल्स, एंजाइमों पर आधारित उच्च गुणवत्ता वाले उत्पादों को विकसित करने का प्रयास करता है, और हमारे ग्राहकों की उच्च गुणवत्ता की आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए तीन फ्लोरेसिन (एलेक्सा फ्लुअर 640, एलेक्सा फ्लुअर 488, और एफआईटीसी)-लेबल वाले ट्यूनल एसेज़ लॉन्च किए हैं।

वर्तमान में, 120 से अधिक अनुसंधान समूह इस उत्पाद का उपयोग कर रहे हैं और थेरानोस्टिक्स और ईएमबीओ मॉलिक्यूलर मेडिसिन जैसी आधिकारिक पत्रिकाओं में कई अंग्रेजी लेख प्रकाशित कर चुके हैं।

पता लगाने का तंत्र

एपोप्टोसिस के अंतिम चरण में, गुणसूत्री डीएनए के डबल-स्ट्रैंड ब्रेक या सिंगल-स्ट्रैंड ब्रेक से बड़ी संख्या में चिपचिपे 3-OH सिरे बनते हैं, और डीऑक्सीराइबोन्यूक्लियोटाइड टर्मिनल ट्रांसफर (TdT) की क्रिया के तहत, फ्लोरेसिन/एंजाइम-लेबल वाला dUTP डीएनए के 3-टर्मिनल सिरे से बंध जाता है, जिससे एपोप्टोसिस का पता फ्लोरोसेंस के पता लगाने के माध्यम से लगाया जा सकता है, जिसे डीऑक्सीराइबोन्यूक्लियोटाइड टर्मिनल ट्रांसफेरेज़-मध्यस्थ निक एंड लेबलिंग कहा जाता है। इस विधि को टर्मिनल-डीऑक्सीन्यूक्लियोटाइडिल ट्रांसफेरेज़ मध्यस्थता निक एंड लेबलिंग (TUNEL) कहा जाता है, और सिद्धांत को चित्र 1 में दिखाया गया है।

चित्र 1: टर्मिनल-डिऑक्सीन्यूक्लियोटाइडिल ट्रांस्फरेज मीडिएटेड निक एंड लेबलिंग (TUNEL) का योजनाबद्ध आरेख

उत्पाद की विशेषताएँ

  • आवेदन की विस्तृत श्रृंखला

इसका उपयोग पैराफिन-एम्बेडेड ऊतक खंडों, जमे हुए ऊतक खंडों, सुसंस्कृत कोशिकाओं और ऊतकों से पृथक कोशिकाओं के लिए किया जा सकता है।

  • उच्च पहचान संवेदनशीलता

एपोप्टोटिक कोशिकाओं की बहुत छोटी मात्रा का पता लगाया जा सकता है।

  • कम पृष्ठभूमि हस्तक्षेप

उच्च संकेत-से-शोर अनुपात.

  • अवलोकन बहुमुखी प्रतिभा

प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी अवलोकन, प्रवाह-माध्यम से पता लगाना।

डेटा की प्रस्तुति

1、माउस प्रीएडिपोसाइट (3T3-L) ट्यूनल परख

चित्र 2: माउस प्रीडिपोसाइट 3T3-L एपोप्टोसिस का पता लगाना। पहली पंक्ति नकारात्मक नियंत्रण को दर्शाती है और दूसरी पंक्ति सकारात्मक नियंत्रण को दर्शाती है। जांच अभिकर्मक: कैट नं. 40306 ट्यूनल एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट (एफआईटीसी)

2、पैराफिन अनुभाग नमूनों का टनल पता लगाना

चित्र 3: LY3009120 अकेले या वेमुराफेनीब और ओबाटोक्लैक्स के साथ संयोजन में उपचर्म ग्राफ्ट ट्यूमर मॉडल में थायराइड कैंसर को प्रभावी ढंग से विलंबित किया गया। IF=8.8. नमूना प्रकार: पैराफिन-एम्बेडेड ट्यूमर ऊतक (नग्न चूहों से लिया गया)। जांच अभिकर्मक: कैट नं. 40307 ट्यूनल एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट (एलेक्सा फ्लुओर 488)।

3、सेल क्रॉल का ट्यूनल पता लगाना

चित्र 4: विभिन्न उपसमूहों में एंडोथेलियल कोशिकाओं के एपोप्टोसिस पर जिंक सल्फेट का प्रभाव। नमूना प्रकार: HUVEC (मानव गर्भनाल शिरा एंडोथेलियल कोशिकाएँ)। जांच अभिकर्मक: कैट नं. 40308 ट्यूनल एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट (एलेक्सा फ्लुओर 640)

4、एपोप्टोसिस का पता लगाने के लिए फ्लो साइटोमेट्री

चित्र 5: पीए उपचार पुनर्प्रोग्रामिंग के दौरान एपोप्टोसिस की घटना को प्रभावी ढंग से कम कर सकता है। IF=3.7. नमूना प्रकार: iPS कोशिकाएँ। जांच अभिकर्मक: कैट नं. 40307 ट्यूनल एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट (एलेक्सा फ्लुओर 488)।

साहित्य उद्धरण

[1] ली सी, वांग क्यू, गु एक्स, एट अल. पोरस Se@ SiO2 नैनोकंपोजिट चूहे के अस्थि मज्जा मेसेनकाइमल स्टेम सेल के माइग्रेशन और ऑस्टोजेनिक भेदभाव को बढ़ावा देता है जिससे एक चूहे के मॉडल में हड्डी के फ्रैक्चर के उपचार में तेजी आती है [जे]।इंटरनेशनल जर्नल ऑफ नैनोमेडिसिन, 2019, 14: 3845. (आईएफ 4.76)

[2] मियाओ टी, कियान एल, यू एफ, एट अल. हाई ऑक्सीडाइज्ड लो डेंसिटी लिपोप्रोटीन प्रेरित मानव कोरोनरी धमनी एंडोथेलियल कोशिकाओं की चोटों पर हाइड्रॉक्सीसैफ़्लोर येलो के सुरक्षात्मक प्रभाव [जे]। विकास, 2019, 22: 581-589।(आईएफ 6.208 )

[3] वेन वाई, लियू जी, झांग वाई, एट अल. माइक्रोआरएनए-205 एंड्रोजन रिसेप्टर को डाउन-रेगुलेट करके मधुमेह मेलिटस-प्रेरित इरेक्टाइल डिसफंक्शन से जुड़ा हुआ है [जे]। जर्नल ऑफ सेलुलर एंड मॉलिक्यूलर मेडिसिन, 2019, 23(5): 3257-3270।(आईएफ 4.41)

[4] जू टी, डिंग डब्ल्यू, एओ एक्स, एट अल. एआरसी एमपीटीपी उद्घाटन के अवरोध के माध्यम से प्रोग्राम्ड नेक्रोसिस और मायोकार्डियल इस्केमिया/रिपर्फ्यूजन चोट को नियंत्रित करता है [जे]। रेडॉक्स बायोलॉजी, 2019, 20: 414-426।(आईएफ 8.37)

[5] ली पी, हाओ एल, गुओ वाई वाई, एट अल. क्लोरोक्वीन ऑटोफैगी को रोकता है और हाइपोक्सिक चूहे न्यूरॉन्स में माइटोकॉन्ड्रियल डिसफंक्शन और एपोप्टोसिस को खराब करता है [जे]। लाइफ साइंसेज, 2018, 202: 70-77.(आईएफ 3.40)

[6] चेन एच, गुआन बी, चेन एक्स, एट अल। बैकालिन रक्त-मस्तिष्क अवरोध विघटन और रक्तस्रावी परिवर्तन को कम करता है और विलंबित टी-पीए उपचार के साथ इस्केमिक स्ट्रोक चूहों में न्यूरोलॉजिकल परिणाम में सुधार करता है: ONOO−-MMP-9 मार्ग की भागीदारी [जे]। ट्रांसलेशनल स्ट्रोक रिसर्च, 2018, 9(5): 515-529.(आईएफ 4.87)

[7] लियू क्यू, कियान वाई, ली पी, एट अल. स्तन कैंसर के उपचार में 131 आयोडीन-लेबल वाले मल्टीफंक्शनल कॉपर सल्फाइड-लोडेड माइक्रोस्फीयर के संयुक्त चिकित्सीय प्रभाव [जे]। एक्टा फार्मास्युटिका सिनिका बी, 2018, 8(3): 371-380.(आईएफ 6.88)

[8] हान वाईक्यू, मिंग एसएल, वू एचटी, एट अल. मायोस्टैटिन नॉकआउट उच्च प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों के उत्पादन के माध्यम से मानव गर्भाशय ग्रीवा कैंसर कोशिकाओं में एपोप्टोसिस को प्रेरित करता है [जे]। रेडॉक्स बायोलॉजी, 2018, 19: 412-428.(आईएफ 8.37)
[9] वांग एस, जू वाई, वेंग वाई, एट अल. एस्टिलबिन ऑक्सीडेटिव तनाव और सूजन को कम करके सिस्प्लैटिन-प्रेरित नेफ्रोटॉक्सिसिटी को बेहतर बनाता है [जे]। खाद्य और रासायनिक विष विज्ञान, 2018, 114: 227-236.(आईएफ 3.78)

[10] लियू एल, पैंग एक्सएल, शांग डब्ल्यूजे, एट अल. ओवर-एक्सप्रेस्ड माइक्रोआरएनए-181ए सीआरवाई1 से बंध कर टीएलआर/एनएफ-κबी मार्ग के डाउन-रेगुलेशन के माध्यम से क्रोनिक किडनी रोग वाले चूहों में ग्लोमेरुलर स्केलेरोसिस और रीनल ट्यूबलर एपिथेलियल चोट को कम करता है [जे]। मॉलिक्यूलर मेडिसिन, 2018, 24(1): 49.(आईएफ 3.46)

[11] ली जी, यिन क्यू, जी एच, एट अल. सर्वाइकल कैंसर कोशिकाओं में सीडी55-विशिष्ट लिगैंड पेप्टाइड की स्क्रीनिंग और एंटीट्यूमर प्रभाव पर एक अध्ययन [जे]। ड्रग डिज़ाइन, डेवलपमेंट और थेरेपी, 2018, 12: 3899.(आईएफ 3.27)

[12] कियान वाई, वांग वाई, जिया एफ, एट अल. कैंसर थेरेपी और एपोप्टोसिस मॉनिटरिंग को बढ़ावा देने के लिए एआईई प्रॉपर्टी के साथ ट्यूमर-माइक्रोएन्वायरमेंट नियंत्रित नैनोमिसेल [जे]। बायोमटेरियल्स, 2019, 188: 96-106।(आईएफ 9.85)

[13] ली ज़ेड, ली डी, ली क्यू, एट अल. ट्यूमर-टार्गेटिंग कीमोथेरेपी के लिए इन सीटू लो-इम्यूनोजेनिक एल्ब्यूमिन-कॉन्जुगेटिंग-कोरोना गाइडिंग नैनोपार्टिकल्स [जे]। बायोमटेरियल साइंस, 2018, 6(10): 2681-2693।(आईएफ 5.31)

[14] लियू वाई, ज़ी एक्स, होउ डब्ल्यू, एट अल. जीडी3+-आयन-प्रेरित कार्बन-डॉट्स सेल्फ-असेंबली एग्रीगेट्स को बेहतर फ्लोरोसेंस/एमआरआई डुअल इमेजिंग और एंटीट्यूमर थेरेपी के लिए फोटोसेंसिटाइज़र से लोड किया गया[जे]। नैनोस्केल, 2018, 10(40): 19052-19063.(आईएफ 7.17)
[15] लियू क्यू, कियान वाई, ली पी, एट अल. 131 I-लेबल वाले कॉपर सल्फाइड-लोडेड माइक्रोस्फीयर हेपेटिक धमनी एम्बोलिज़ेशन के माध्यम से हेपेटिक ट्यूमर का इलाज करने के लिए [जे]। थेरानोस्टिक्स, 2018, 8(3): 785.(यदि 8.12)

अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्नों

क्यू: गैर-विशिष्ट फ्लोरोसेंट लेबलिंग की उपस्थिति?

1) ऊतक/कोशिकाओं में स्वयं न्यूक्लिऐस या पॉलीमरेज़ गतिविधि का उच्च स्तर होता है, जो आसानी से गैर-विशिष्ट फ्लोरोसेंट लेबलिंग की उपस्थिति को जन्म दे सकता है, जैसे कि चिकनी मांसपेशी कोशिकाएँ। समाधान यह है कि कोशिकाओं या ऊतकों को लेने के तुरंत बाद उन्हें ठीक किया जाए और इन एंजाइमों को गलत सकारात्मक परिणाम देने से रोकने के लिए उन्हें पर्याप्त रूप से ठीक किया जाए।

2) अनुपयुक्त फिक्सेटिव्स, जैसे कि कुछ अम्लीय फिक्सेटिव्स का उपयोग, गलत सकारात्मकता की ओर ले जाता है। ताजा तैयार 4% तटस्थ पैराफॉर्मेल्डिहाइड फिक्सेटिव की सिफारिश की जाती है।

3) गैर-विशिष्ट प्रतिदीप्ति तब भी हो सकती है जब TUNEL परख का प्रतिक्रिया समय बहुत लंबा हो और कोशिका या ऊतक की सतह को गीला न रखा जा सके। प्रतिक्रिया समय को नियंत्रित करने का ध्यान रखें और सुनिश्चित करें कि TUNEL परख प्रतिक्रिया समाधान नमूने को अच्छी तरह से कवर करता है।

क्यू: प्रतिदीप्ति पृष्ठभूमि बहुत अधिक है?

1) जो कोशिकाएं उच्च दर से विभाजित और बढ़ती हैं, जिनमें प्रतिलेखन का स्तर भी उच्च होता है, उनमें कभी-कभी नाभिक में DNA का टूटना भी देखा जाता है।

2) लंबे समय तक उत्तेजक प्रकाश के संपर्क में रहने से गलत सकारात्मक परिणाम सामने आते हैं।

क्यू: कम लेबलिंग दक्षता?

1) इथेनॉल या मेथनॉल के साथ फिक्सेशन से लेबलिंग दक्षता कम हो जाती है।

2) फिक्सेशन का समय बहुत लंबा है, जिसके परिणामस्वरूप क्रॉस-लिंकिंग की डिग्री बहुत अधिक है। फिक्सेशन का समय कम करना उचित है।

3) ऊतक अनुभाग बहुत मोटा है, जो निर्धारण प्रभाव को असंतोषजनक बनाता है, और इसे 10 माइक्रोन के भीतर नियंत्रित करना बेहतर है।

(4) प्रतिदीप्ति शमन: प्रतिदीप्ति 10 मिनट के सामान्य प्रकाश में गंभीर रूप से बुझ जाएगी। इसका समाधान प्रकाश संचालन से बचना है।

उत्पाद विवरण

प्रोडक्ट का नाम

मद संख्या।

विनिर्देश

एनेक्सिन वी-एफआईटीसी/7-एएडी एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट

40311ईएस20/50/60

20टी/50टी/100टी

एनेक्सिन वी-एफआईटीसी/पीआई एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट

40302ईएस20/50/60

20टी/50टी/100टी

एनेक्सिन वी-पीई/7-एएडी एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट

40310ईएस20/50/60

20टी/50टी/100टी

एनेक्सिन वी-ईजीएफपी/पीआई एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट

40303ईएस20/50/60

20टी/50टी/100टी

एनेक्सिन वी-वाईएसफ्लोर™ 488/7-एएडी एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट

40313ES60

100टी

एनेक्सिन वी-वाईएसफ्लोर™ 488/पीआई एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट

40305ईएस20/50/60

20टी/50टी/100टी

एनेक्सिन वी-वाईएसफ्लोर™ 647/पीआई एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट

40304ईएस20/50/60

20टी/50टी/100टी

एनेक्सिन V-YSFluor™ 647/7-AAD एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट

40312ईएस20/50/60

20टी/50टी/100टी

ट्यूनल एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट (एफआईटीसी)

40306ईएस20/50/60

20टी/50टी/100टी

ट्यूनल एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट (YSFluor™ 488)

40307ईएस20/50/60

20टी/50टी/100टी

ट्यूनल एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट (YSFluor™ 640)

40308ईएस20/50/60

20टी/50टी/100टी

जाँच करना