नोट: चित्र इंटरनेट से उद्धृत

जेसी-10 जांच

जे.सी.-10जेसी-1 का व्युत्पन्न, एक संभावित-निर्भर जांच है जिसका उपयोग फ्लो साइटोमेट्री, फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोपी और माइक्रोटिटर प्लेट-आधारित फ्लोरोसेंस परख द्वारा माइटोकॉन्ड्रियल ट्रांसमेम्ब्रेन क्षमता निर्धारित करने के लिए किया जाता है। स्वस्थ कोशिकाओं में, जेसी-10 चुनिंदा रूप से माइटोकॉन्ड्रिया में जमा होता है, जिससे लाल समुच्चय बनते हैं जो 590 एनएम पर एक व्यापक उत्तेजना स्पेक्ट्रम और उत्सर्जन बड़े मूल्यों को प्रदर्शित करते हैं।हालांकि, कम माइटोकॉन्ड्रियल ट्रांसमेम्ब्रेन क्षमता वाली एपोप्टोटिक और नेक्रोटिक कोशिकाओं में, जेसी-10 माइटोकॉन्ड्रिया से बाहर फैल जाता है और जेसी-10 मोनोमर्स का उत्पादन करता है, जिसके परिणामस्वरूप ग्रीन एमिशन (525 एनएम) की ओर बदलाव होता है। इसे मायोसाइट्स, न्यूरॉन्स, बरकरार ऊतकों और पृथक माइटोकॉन्ड्रिया सहित विभिन्न प्रकार के नमूनों में माइटोकॉन्ड्रियल ट्रांसमेम्ब्रेन क्षमता के संकेतक के रूप में सफलतापूर्वक उपयोग किया गया है।

JC-10--JC-1 का प्रतिस्थापन

• स्थिरता: जेसी-10 में पता लगाने में कम पूर्वाग्रह होता है क्योंकि जलीय मीडिया में इसकी घुलनशीलता और संवेदनशीलता अधिक होती है।
• उन्नत संकेत: JC-10 का संकेत-से-पृष्ठभूमि अनुपात JC-1 से अधिक है।
• बढ़ी हुई संवेदनशीलता: जेसी-10, परीक्षण की गई सभी कोशिका रेखाओं में जेसी-1 की तुलना में माइटोकॉन्ड्रियल ट्रांसमेम्ब्रेन क्षमता हानि में सूक्ष्म परिवर्तनों का बेहतर पता लगाने में सक्षम है।
• विस्तृत अनुप्रयोग: जेसी-10 का उपयोग प्राथमिक चूहे हेपेटोसाइट्स में किया जा सकता है।
• सुविधाजनक: JC-10 फ्लोरोसेंट एंजाइम मार्कर, सेल इमेजर्स और फ्लो साइटोमीटर के साथ संगत है।

टिप्पणियाँ: कॉमेडोन द्वारा प्रेरित माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली क्षमता परिवर्तन को JC-10 और JC-1 के साथ जर्कैट कोशिकाओं में मापा गया। जर्कैट कोशिकाओं को कैम्पटोथेसिन (10 mM) के साथ 4 घंटे तक उपचारित करने के बाद, JC-1 और JC-10 डाई अपसैंपलिंग समाधान कुओं में डाले गए और 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट किए गए। JC-1 और JC-10 के एकत्रित और मोनोमेरिक रूपों की प्रतिदीप्ति तीव्रता को नोवोस्टार एंजाइम लेबलर (BMG लैबटेक) का उपयोग करके Ex/Em = 490/525 nm और 490/590 nm पर मापा गया।

परिणामों का विश्लेषण

जेसी-1 मोनोमर का पता लगाने पर, उत्तेजना प्रकाश को 490 एनएम पर सेट किया जा सकता है और उत्सर्जन प्रकाश को 530 एनएम पर सेट किया जा सकता है; जेसी-1 पॉलीमर का पता लगाने पर, उत्तेजना प्रकाश को 525 एनएम पर सेट किया जा सकता है और उत्सर्जन प्रकाश को 590 एनएम पर सेट किया जा सकता है। एपोप्टोसिस का पता फ्लो साइटोमेट्री द्वारा लगाया गया, हरे रंग के प्रतिदीप्ति का पता FL-1 चैनल के माध्यम से लगाया गया, और लाल प्रतिदीप्ति का पता FL-2 चैनल के माध्यम से लगाया गया। FL-1+, FL-2 + सामान्य कोशिकाएं हैं और FL-1+, FL-2- एपोप्टोटिक कोशिकाएं हैं।

नोट: छवि स्रोत चीन स्ट्रीमलाइन एसोसिएशन वेबसाइट फ़ोरम है

बिना किसी संदेह के कार्य करें

प्रश्न: जेसी-1 माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली क्षमता फ्लोरोसेंट जांच, क्या इस उत्पाद का उपयोग ऊतक वर्गों को दागने के लिए किया जा सकता है?

उत्तर: रंगाई से पहले कोशिकाओं की गतिविधि सुनिश्चित करने के लिए जीवित ऊतक को अलग-अलग कोशिकाओं में विभाजित करें।

प्रश्न: क्या मैं जेसी-1 से रंगने से पहले कोशिकाओं को ठीक कर सकता हूँ?

उत्तर: नहीं। जेसी-1 डाई माइटोकॉन्ड्रिया में संभावित-निर्भर तरीके से जमा होती है और इसका उपयोग कोशिकाओं, ऊतकों या शुद्ध माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली क्षमता का पता लगाने के लिए किया जा सकता है। स्थिरीकरण विद्युत क्षमता को बाधित करता है, जिसके परिणामस्वरूप जांच माइटोकॉन्ड्रिया पर जमा होने में असमर्थता और विशिष्टता का नुकसान होता है।

क्यू: जेसी-1 कार्यशील विलयन में एकत्रित कण हैं और मैं अभिरंजन से पहले उन्हें अपकेन्द्रण द्वारा हटाने की योजना बना रहा हूँ, क्या अपकेन्द्रण के लिए कोई अनुशंसित मापदंड हैं?

उत्तर: जेसी-1 वर्किंग सॉल्यूशन को 13,000 ग्राम पर लगभग 1-2 मिनट तक सेंट्रीफ्यूज किया जा सकता है।

आदेश की जानकारी

प्रोडक्ट का नाम	मद संख्या।	विनिर्देश
जेसी-1 माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली क्षमता फ्लोरोसेंट जांच	40705ईएस03/08	1 मिलीग्राम/5 मिलीग्राम
जेसी-10 माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली क्षमता फ्लोरोसेंट जांच	40707ईएस03/08	1 मिलीग्राम/5 मिलीग्राम