माइकोप्लाज्मा का पता लगाना, रोकथाम और हटाना - सब एक ही चरण में!
माइकोप्लाज़्मा
माइकोप्लाज्मा, जिसे माइकोप्लाज्म के नाम से भी जाना जाता है, आज तक खोजा गया सबसे छोटा और सरल प्रोकैरियोट है, जिसका व्यास 0.1 से 0.3 माइक्रोमीटर है। यह फिल्टर से गुजर सकता है और उच्च बहुरूपता प्रदर्शित करता है, जो गोलाकार, छड़ के आकार का, तंतुमय और शाखित जैसे विभिन्न आकारों में दिखाई देता है। प्रयोगशालाओं और बायोफार्मास्युटिकल उत्पादन में, सेल कल्चर माइकोप्लाज्मा संदूषण के लिए प्रवण होते हैं। साहित्य के अनुसार, संग्रहीत सेल लाइनों में माइकोप्लाज्मा संदूषण की घटना लगभग 15%-35% है, और बायोफार्मास्युटिकल उद्योग में, यह 0.44%-6.70% तक है [1].
चित्र 1: माइकोप्लाज्मा की आकृति विज्ञान
माइकोप्लाज्मा संदूषण का प्रभाव
बैक्टीरिया और फंगल संदूषण का पता लगाना, रोकना और हटाना अपेक्षाकृत आसान है, लेकिन माइकोप्लाज्मा संदूषण को पहचानना मुश्किल है। 10^7-10^9 CFU/ml जितनी उच्च वृद्धि घनत्व पर भी, संदूषण के कोई स्पष्ट संकेत नहीं हो सकते हैं (जैसे मैलापन या pH परिवर्तन)। माइकोप्लाज्मा संदूषण कोशिकाओं में विभिन्न परिवर्तनों को जन्म दे सकता है (चित्र 2 देखें)।
चित्र 2: माइकोप्लाज्मा संदूषण के बाद कोशिका अवस्था में परिवर्तन
माइकोप्लाज्मा का पता लगाने के लिए अनुप्रयोग परिदृश्य
माइकोप्लाज्मा संदूषण के विशिष्ट स्रोत
- कोशिकाओं के बीच क्रॉस-संदूषण;
- कार्य वातावरण या प्रयोगात्मक उपकरण का संदूषण;
- प्रयोगकर्ता द्वारा खराब सड़न रोकने वाली तकनीक;
- संवर्धन मीडिया या अन्य अभिकर्मकों का संदूषण;
- कोशिका तैयार करने के लिए प्रयुक्त मूल ऊतक या अंग का संदूषण।
जब कोशिका संवर्धन माइकोप्लाज्मा संदूषण का सामना करता है तो क्या करें
चित्र 3: माइकोप्लाज्मा संदूषण के लिए सम्पूर्ण समाधान
कोशिकाओं में माइकोप्लाज्मा संदूषण के लिए तीन-इन-वन समाधान
1. माइकोप्लाज्मा का पता लगाना
एक-चरण आइसोथर्मल माइकोप्लाज्मा जांच:
चित्र 4: एक-चरण माइकोप्लाज्मा जांच की संचालन प्रक्रिया
पीसीआर-आधारित माइकोप्लाज्मा जांच:
चित्र 5: विभिन्न माइकोप्लाज्मा सांद्रता वाले नमूनों के पीसीआर प्रवर्धन की जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस छवि
चित्र 6: विभिन्न माइकोप्लाज्मा सांद्रता वाले नमूनों के पीसीआर प्रवर्धन की जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस छवि
तालिका 1: माइकोप्लाज्मा के प्रकार जिनका पता लगाया जा सकता है
नोट: नीला भाग एक-चरण आइसोथर्मल जांच और पीसीआर विधियों दोनों द्वारा पता लगाने योग्य माइकोप्लाज्मा प्रकारों को दर्शाता है।
2. माइकावे माइकोप्लाज्मा उन्मूलन अभिकर्मक (1000×)
MycAway माइकोप्लाज्मा एलिमिनेशन रिएजेंट (1000×) एक मिश्रित फॉर्मूलेशन है जो कोशिकाओं को नुकसान पहुँचाए बिना, माइकोप्लाज्मा वृद्धि के लिए आवश्यक डीएनए और आवश्यक प्रोटीन संश्लेषण को बाधित करके माइकोप्लाज्मा को प्रभावी ढंग से समाप्त करता है। यह आपकी कोशिकाओं को अधिकतम रूप से बचाता है और माइकोप्लाज्मा संदूषण के कारण होने वाले नुकसान को कम करता है।
चित्र 7: कोशिका उन्मूलन प्रभाव का प्रदर्शन
माइकोप्लाज्मा उन्मूलन अभिकर्मक की विशेषताएं:
- कम विषाक्तता: न्यूनतम साइटोटॉक्सिसिटी, बाद के सेल प्रयोगों को प्रभावित नहीं करती जैसे कोशिका व्यवहार्यता परीक्षण और ट्रांसफ़ेक्शन;
- उच्च स्थिरता: प्रभावकारिता बनाए रखते हुए लंबी अवधि के लिए -20 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जा सकता है;
- प्रयोग करने में आसान: बस उत्पाद को माइकोप्लाज्मा-दूषित संस्कृति माध्यम में जोड़ें और इनक्यूबेट करें;
- तेजी से काम करने वाला: मात्र 3 दिन में परिणाम दिखना;
- व्यापक परछाई: अधिकांश प्रयोगशाला माइकोप्लाज्मा प्रकारों के विरुद्ध प्रभावी।
चित्र 8: माइकोप्लाज्मा उन्मूलन अभिकर्मक का साइटोटॉक्सिसिटी परीक्षण आरेख
3. माइकोप्लाज्मा की रोकथाम
उत्पाद जानकारी
| वर्ग | प्रोडक्ट का नाम | बिल्ली नं. | विशेष विवरण |
|
खोज | 40612ईएस25/60 | 25/100 टी | |
| MycAway™ माइकोप्लाज्मा रियल-टाइम qPCR डिटेक्शन किट हॉट | 40618ईएस25/60 | 25/100 टी | |
| 40601ईएस10/20 | 10/20 परख | ||
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हटाना | MycAway™ स्प्रे (उपयोग के लिए तैयार) | 40605ईएस02/03 | 1/2×500 एमएल |
| 40607ईएस03/08 | 1/5×1 एमएल | ||
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रोकथाम | 40608ईएस03/08 | 1/5×1 एमएल | |
| 40609ES60 | 100 एमएल | ||
| 40610ES60 | 100 एमएल |