वृत्ताकार आरएनए अनुसंधान उपकरण - आरएनएएसई आर

—— सर्कुलर आरएनए दवा विकास में तेजी लाना

हाल के वर्षों में, mRNA वैक्सीन/दवा धीरे-धीरे लोगों की नज़रों में आ गई है। mRNA वैक्सीन/दवाओं में तेज़ डिज़ाइन, कम लागत और आसान उत्पादन के फ़ायदे हैं, लेकिन क्योंकि mRNA खुद ही ख़राब होने में आसान है, इसलिए वर्तमान में यह मुख्य रूप से टोपी और पूंछ जोड़कर mRNA तैयारी की स्थिरता में सुधार करता है, और mRNA अनुवाद में सहायता करता है। हाल के वर्षों में, शोधकर्ताओं ने एक नए प्रकार के RNA की खोज की है - सर्कुलर RNA (सर्कुलर RNA, circRNA)। ऐसे RNA एक सहसंयोजक-बंद रिंग संरचना है, जिसे ख़राब करना आसान नहीं है। mRNA की तुलना में, circRNA अधिक स्थिर है और गैर-टोपी पर निर्भर अनुवाद प्राप्त कर सकता है। इसलिए, CIRCRNA की खोज सरल, बेहतर स्थिरता के साथ RNA वैक्सीन और दवाओं की एक नई पीढ़ी के विकास की संभावनाएँ प्रदान करती है।

चित्र 1: आरएनए वैक्सीन की प्रक्रिया 1

CIRCRNA की उत्पादन प्रक्रिया में शामिल हैं: टेम्पलेट तैयार करना, इन विट्रो ट्रांसक्रिप्शन, डीएनए टेम्पलेट हटाना, सर्कुलर और शुद्धिकरण। RNA के सर्कुलराइज़ होने के बाद, CirCRNA को समृद्ध करने के उद्देश्य को प्राप्त करने के लिए मानव रहित RNA को पचाने के लिए राइबोन्यूक्लिअस R (Ribonuclease R, RNASE R) का उपयोग करना आवश्यक है। येसेन के पास आणविक एंजाइमेटिक इंजीनियरिंग और तर्कसंगत विकास मंच है। यह एक ही समय में उत्पाद की गुणवत्ता सुनिश्चित करता है। येसेन आर एंड डी टीम ने उच्च शुद्धता और उच्च गतिविधि के साथ एक RNASE R एंजाइम को सफलतापूर्वक विकसित किया है।

आरएनएएसई आर (कैट#14606ईएस) यह एक Mg2+निर्भरता 3 '→ 5' राइबोन्यूक्लिक एसिड एक्सोन्यूक्लिएज है जो ई. कोली से प्राप्त होता है। यह सभी रैखिक आरएनए को पचा सकता है और CirCRNA, लैरीएट आरएनए को पचाता नहीं है। इसका उपयोग अक्सर रैखिक आरएनए अणुओं को हटाने और गैर-रैखिक आरएनए जैसे कि CirCRNA और लैरीएट आरएनए को समृद्ध करने के उद्देश्य को साकार करने के लिए किया जाता है।

विशेषताएँ

प्रोटीन शुद्धता (एसडीएस-पीएजीई) ≥95%

चित्र 2: प्रोटीन शुद्धता का पता लगाना: उत्पाद (कैट#14606ES) के विभिन्न आयतन (1 μL, 2 μL, 3 μL) उच्च शुद्धता ≥95% दर्शाते हैं।

कोई अवशिष्ट नहीं एक्सोन्यूक्लिऐस

चित्र 3: RNASE R के 20 यू को λDNA-Hind III डाइजेस्ट के 0.5 μg में मिलाया गया, 37 ℃ पर 4 घंटे तक इनक्यूबेट किया गया। परिणाम से पता चलता है कि कोई अवशिष्ट नहीं है एक्सोन्यूक्लिऐस का पता RNASE R (CAT#14606ES) उत्पादों से लगाया गया।

पाचन रैखिक आरएनए की क्षमता और सरिकआरएनए

चित्र 4: RNASE R (CAT#14606ES) रैखिक RNA अणुओं को पचा सकता है
चित्र 5: CircRNA RNASE R (CAT#14606ES) के उपचार को सहन कर सकता है।

उत्पाद

बिल्ली

आकार

आरएनएएस आर (20U/μL)

14606ईएस

250यू/2500यू/10000यू

आरएनेज़ आर (जीएमपी-ग्रेड, 20 यू/μL) 14615ईएस 250यू/2500यू/10000यू

T7 आरएनए पोलीमरेज़ जीएमपी-ग्रेड (250U/μL)

10625ईएस

10केयू/100केयू/2500केयू

क्लीस्क्रिप™ टी7 आरएनए पॉलीमरेज़ (कम डीएसआरएनए, 250 यू/μएल) 10628ईएस 10केयू/100केयू/2500केयू

संदर्भ

  1. क्यू एल, यी जेड, शेन वाई, एट अल। SARS-CoV-2 और उभरते वेरिएंट के खिलाफ सर्कुलर RNA टीके। कक्ष।2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. चेन एल, वांग सी, सन एच, एट अल. सर्कआरएनए खोज और विश्लेषण के लिए जैव सूचना विज्ञान टूलबॉक्स। संक्षिप्त बायोइनफॉर्म. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

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