आइसोथर्मल न्यूक्लिक एसिड प्रवर्धन तकनीक को विभिन्न प्रवर्धन सिद्धांतों के अनुसार कई श्रेणियों में विभाजित किया जा सकता है। वर्तमान में, सबसे आम और व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली लूप-मध्यस्थ आइसोथर्मल प्रवर्धन तकनीक (LAMP) है जिसे जापानी विद्वान नोटोमी एट अल ने 2000 में विकसित किया था। Bst DNA पोलीमरेज़ आइसोथर्मल प्रवर्धन तकनीक का मुख्य एंजाइम है। LAMP में Bst DNA पोलीमरेज़ का कार्य और प्रदर्शन क्या है?

1. Bst DNA पोलीमरेज़ LAMP में क्या भूमिका निभाता है?
2. लियोफिलाइज्ड बीएसटी प्लस डीएनए पोलीमरेज़ क्या है?
3. उत्पाद की विशेषता क्या है? लियोफिलाइज़्ड बीएसटी प्लस डीएनए पॉलीमरेज़(14405ES)?
4. लियोफिलाइज्ड का उत्पाद प्रदर्शन क्या है बीएसटी प्लस डीएनए पोलीमरेज़(14405ES)?
5. संबंधित उत्पाद
6. पढ़ने के संबंध में

1. Bst DNA पोलीमरेज़ LAMP में क्या भूमिका निभाता है?

LAMP की तकनीकी विशेषता लक्ष्य जीन के छह क्षेत्रों के लिए चार प्राइमरों को डिजाइन करना और 60 ~ 65 ℃ की निरंतर तापमान स्थिति के तहत BST DNA पोलीमरेज़ का उपयोग करके प्रवर्धन प्रतिक्रिया को अंजाम देना है, जिससे 15-60 मिनट के भीतर 109-1010 गुना प्रवर्धन प्राप्त होता है। Bst DNA पोलीमरेज़ में मजबूत थर्मल स्थिरता, स्ट्रैंड विस्थापन गतिविधि और पोलीमरेज़ गतिविधि होती है। यह पीसीआर थर्मल डिनैचुरेशन प्रवर्धन चक्र के बिना निरंतर तापमान की स्थिति के तहत एक तेज़, कुशल और विशिष्ट प्रवर्धन टेम्पलेट हो सकता है, और 1 घंटे के भीतर पूरे LAMP प्रयोग को पूरा कर सकता है।

2. लियोफिलाइज्ड बीएसटी प्लस डीएनए पोलीमरेज़ क्या है?

ग्लिसरॉल-मुक्त बीएसटी प्लस डीएनए पॉलीमरेज़ को फ्रीज करने के लिए लियोफिलाइज्ड बीएसटी प्लस डीएनए पॉलीमरेज़ का उपयोग किया जाता है, जो ग्लिसरॉल-मुक्त बीएसटी एंजाइम अस्थिरता की समस्या को हल करता है। साथ ही, इस उत्पाद में मजबूत 5 '- 3' डीएनए पॉलीमरेज़ गतिविधि, स्ट्रैंड विस्थापन गतिविधि और डीयूटीपी सहनशीलता है, जो प्रदूषण विरोधी आइसोथर्मल प्रवर्धन प्रतिक्रिया के लिए अधिक उपयुक्त है, यह ग्राहकों के लिए फ्रीज-सूखे उत्पादों के उत्पादन में उपयोग करने के लिए सुविधाजनक है।

चित्र 1: 14405ES-लाइओफिलाइज़्ड बीएसटी प्लस डीएनए पॉलीमरेज़ (60 U/μL，ग्लिसरोल-मुक्त)

3. लियोफिलाइज्ड की उत्पाद विशेषता क्या है बीएसटी प्लस डीएनए पोलीमरेज़(14405ES)?

• ग्लिसरॉल-मुक्त एंजाइम, लाइओफिलाइज़ेशन के लिए उपयुक्त
• लागत कम करने के लिए सामान्य तापमान पर परिवहन
• मजबूत स्ट्रैंड विस्थापन गतिविधि, संवेदनशील और स्थिर
• तेजी से पुनः विघटन और सुविधाजनक संचालन

4. लियोफिलाइज्ड का उत्पाद प्रदर्शन क्या है बीएसटी प्लस डीएनए पोलीमरेज़(14405ES)?

4.1 फ्रीज सूखे पाउडर आकार: टी0 क्षण की तुलना में, पाउडर का आकार 45 ℃ - 15DAYS फ्रीज सुखाने के बाद अपरिवर्तित रहता है।

चित्र 2. फ़्रीज़-ड्राई पाउडर का आकार

4.2 स्थिरता

थर्मल त्वरण के बाद फ्रीज-सूखे पाउडर का प्रदर्शन अभी भी तरल अभिकर्मक के अनुरूप हो सकता है, और फ्रीज-सूखे पाउडर (14405ES)
सार्वभौमिक है और इसका उपयोग फ्लोरोसेंट डाई विधि और पीएच सूचक विधि के लिए किया जा सकता है।

4.2.1 फ्लोरोसेंट डाई विधि——स्थिरता

आरटी-लैंप फ्लोरोसेंट डाई प्रवर्धन प्रणाली में, थर्मल त्वरण के टी0, 45 ℃ -7 दिनों और 45 ℃ -15 दिनों के बाद ग्लिसरॉल-मुक्त बीएसटी फ्रीज-सूखे पाउडर का प्रदर्शन ग्लिसरॉल-मुक्त बीएसटी एंजाइम के तरल संस्करण के अनुरूप है, और एनटीसी चरम पर नहीं है।

प्रायोगिक स्थितियाँ:

नोट: नियंत्रण समूह समान सांद्रता वाला ग्लिसरॉल Bst एंजाइम रहित तरल संस्करण है।

चित्र 3. स्थिरता परिणाम

4.2.2 फ्लोरोसेंट डाई विधि——आरटी-लैंप प्रणाली के फ्रीज-ड्राइंग के बाद बीएसटी एंजाइम का प्रदर्शन

RT-LAMP फ्लोरोसेंट डाई एम्पलीफिकेशन सिस्टम में, 45 ℃ - 15 दिनों के बाद RT-LAMP सिस्टम में फ्रीज-ड्राय किए गए ग्लिसरॉल-फ्री Bst फ्रीज-ड्राय पाउडर का उत्पाद प्रदर्शन ग्लिसरॉल-फ्री Bst एंजाइम के तरल संस्करण के अनुरूप था। फ्रीज-ड्राय के बाद नियंत्रण समूह और RT-LAMP सिस्टम में उत्पाद की पहचान दर क्रमशः 100% (16/16) और 94% (15/16) थी।

प्रायोगिक स्थितियाँ:

नोट: नियंत्रण समूह समान सांद्रता वाला ग्लिसरॉल Bst एंजाइम रहित तरल संस्करण है।

चित्र 4. RT-LAMP प्रणाली के फ्रीज-ड्राइंग के बाद Bst एंजाइम का प्रदर्शन

4.2.3 पीएच सूचक विधि ——स्थिरता

आरटी-लैंप पीएच सूचक प्रवर्धन प्रणाली में, टी0 समय की तुलना में, थर्मल त्वरण के 45 ℃ - 15 दिनों के बाद बीएसटी फ्रीज-सूखे पाउडर की पहचान दर 88% (7/8) थी।

प्रायोगिक स्थितियाँ:

नोट: नियंत्रण समूह समान सांद्रता वाला ग्लिसरॉल Bst एंजाइम रहित तरल संस्करण है।

चित्र 5. स्थिरता परिणाम

4.2.4 पीएच सूचक विधि——पुनः हिमीकरण स्थिरता

RT-LAMP pH इंडिकेटर एम्पलीफिकेशन सिस्टम में, 45 ℃ - 7 दिनों के रिफ़्रीज़िंग के बाद, प्रदर्शन स्थिर है। नियंत्रण समूह तरल Bst एंजाइम है। नियंत्रण समूह की तुलना में, थर्मल त्वरण के बाद 14405ES की पहचान दर 94% (30/32) है।

प्रायोगिक स्थितियाँ:

नोट: नियंत्रण समूह समान सांद्रता वाला ग्लिसरॉल Bst एंजाइम रहित तरल संस्करण है।

चित्र 6. पुनः हिमीकरण स्थिरता परिणाम

4.3 विशिष्टता

आरटी-एलएएमपी फ्लोरोसेंट डाई प्रवर्धन प्रणाली में, 48-वेल एनटीसी चरम पर नहीं था, और 14405ईएस की विशिष्टता 100% थी।

प्रायोगिक स्थितियाँ:

नोट: नियंत्रण समूह समान सांद्रता वाला ग्लिसरॉल Bst एंजाइम रहित तरल संस्करण है।

चित्र 7. विशिष्ट परिणाम

5. संबंधित उत्पाद

येसेन द्वारा उपलब्ध कराए जा सकने वाले संबंधित उत्पाद तालिका 1 में दर्शाए गए हैं।

तालिका नंबर एक।संबंधित उत्पाद

6. पढ़ने के संबंध में

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