हाईऐक्टी™ संवर्धित ऑर्गेनोइड्स में साइटोकाइन्स का सत्यापन

2021 में, ऑर्गेनोइड्स को "14वीं पंचवर्षीय योजना" राष्ट्रीय प्रमुख अनुसंधान और विकास योजना की एक प्रमुख परियोजना के रूप में सूचीबद्ध किया जाएगा। ऑर्गेनोइड्स बहुत लोकप्रिय हैं, और उन्हें प्राप्त करने का तरीका भी ध्यान का केंद्र बन गया है। संस्कृति के दौरान विभिन्न ऑर्गेनोइड्स को अलग-अलग साइटोकिन्स की आवश्यकता होती है। विशिष्ट सिग्नलिंग मार्गों को बढ़ावा देने या बाधित करने वाले साइटोकिन्स को जोड़कर, स्टेम कोशिकाओं को वांछित ऑर्गेनोइड्स में विभेदित करने के लिए बनाया जा सकता है। ऑर्गेनोइड संस्कृति में सबसे क्लासिक साइटोकिन संस्कृति प्रोटोकॉल WNER (क्रमशः: Wnt-3a, नोगिन, EGF और R-स्पोंडिन्स) है, और इन 4 कारकों के वृद्धि या कमी संयोजन को लगभग सभी ऑर्गेनोइड संस्कृति प्रयोगों पर लागू किया जा सकता है।

ऑर्गेनोइड संस्कृति में सामान्यतः प्रयुक्त साइटोकाइन्स

आर-स्पोडिन 1

समारोह: आर-स्पोडिन 1 Wnt विनियामकों के Rspo परिवार से संबंधित है, जिसमें 4 सदस्य शामिल हैं, अर्थात् Rspo1-4। यह परिवार एक सूक्ष्म पर्यावरणीय कारक है जो कई अंगों में वयस्क स्टेम कोशिकाओं को बनाए रखता है। RSPO1 एक स्रावित उत्प्रेरक प्रोटीन है। Rspo-1 विकासशील केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के कुछ क्षेत्रों में व्यक्त किया जाता है और यह अधिवृक्क ग्रंथि, अंडाशय, वृषण, थायरॉयड और श्वासनली में भी पाया जाता है।

Wnt सिग्नलिंग मार्ग के एक उत्प्रेरक के रूप में, Rspo1 Wnt सिग्नलिंग को बढ़ाकर कई पहलुओं में भूमिका निभाता है। यह गैस्ट्रिक उपकला ऑर्गेनोइड्स, छोटी आंत और बृहदान्त्र ऑर्गेनोइड्स, यकृत ऑर्गेनोइड्स, प्रोस्टेट ऑर्गेनोइड्स, अग्नाशय ऑर्गेनोइड्स और स्तन ऑर्गेनोइड्स के लिए आमतौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला विकास माध्यम है। कारक।

Wnt -3 ए

समारोह: Wnt-3a सिग्नलिंग प्रोटीन के Wnt परिवार से संबंधित है और भ्रूण और वयस्क ऊतकों की अखंडता को बनाए रखने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। Wnt परिवार अत्यधिक संरक्षित है और सिस्टीन से समृद्ध है। Wnts सेल झिल्ली रिसेप्टर्स और/या आसन्न सेल झिल्ली रिसेप्टर्स से बंध कर Wnt सिग्नलिंग मार्ग की मध्यस्थता करते हैं। Wnt सिग्नलिंग मार्ग को कैनोनिकल मार्ग और गैर-कैनोनिकल मार्ग में विभाजित किया जा सकता है, एक Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt7a, Wnt8, Wnt8b और Wnt10a सहित β-catenin द्वारा मध्यस्थता वाले कैनोनिकल सिग्नलिंग मार्ग में शामिल है; दूसरा गैर-कैनोनिकल सिग्नलिंग मार्ग है जो Wnt4, Wnt5a, Wnt6 और Wnt11 सहित β-catenin पर निर्भर है। Wnt परिवार के सबसे अधिक प्रतिनिधि संकेतन प्रोटीन के रूप में, Wnt3a व्यापक रूप से वितरित है और स्व-नवीकरण, प्रसार, विभेदन और गतिशीलता सहित बहुल सेलुलर कार्यों को विनियमित करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है।

ईजीएफ

समारोह: EGF एक शक्तिशाली वृद्धि कारक है जो कई उपकला विकास, एंजियोजेनेसिस, गैस्ट्रिक एसिड स्राव का अवरोध, फाइब्रोब्लास्ट प्रसार और संस्कृति में एपिडर्मल कोशिकाओं के कॉलोनी गठन को उत्तेजित करता है। EGF EGF परिवार का एक संस्थापक सदस्य है, जिसमें TGF-α, दो विनियामक प्रोटीन (AR), β-सेल प्रोटीन (BTC), एपिडर्मल प्रोटीन (EPR), हेपरिन-बाइंडिंग EGF-जैसे वृद्धि कारक (HB-EGF), एपिप्रोटीन और न्यूरेगुलिन (NRG1-6) भी शामिल हैं। शारीरिक रूप से, EGF रक्त, दूध, मूत्र, लार, वीर्य, ​​अग्नाशयी रस, मस्तिष्कमेरु द्रव और एमनियोटिक द्रव सहित विभिन्न शारीरिक तरल पदार्थों में मौजूद है। EGF EGF रिसेप्टर (ErbB) के लिए एक उच्च-आत्मीयता लिगैंड है। EGF EGF रिसेप्टर के द्विगुणन को बांधता है और प्रेरित करता है, जिससे प्रोटीन टायरोसिन किनेज सिग्नलिंग मार्ग की सक्रियता होती है, जिससे EGF परिवार के सिग्नल को प्रसारित किया जाता है।

नोगिन

समारोह: नोगिन TGF-β परिवार के लिगैंडों को बाधित कर सकता है और उन्हें संबंधित रिसेप्टर्स से बंधने से रोक सकता है।नोगिन को मूल रूप से BMP-4 के प्रतिपक्षी के रूप में खोजा गया था और फिर इसे अन्य BMPs (BMP-2, 7, 13 और 14) की गतिविधि को नियंत्रित करने के लिए दिखाया गया। नोगिन कशेरुकियों के बीच अत्यधिक संरक्षित है। स्रावित नोगिन प्रोटीन विकास के दौरान अस्थि मोर्फोजेनेटिक प्रोटीन की गतिविधि को नियंत्रित करते हैं। प्रोस्टेट कैंसर से ऑस्टियोलिटिक अस्थि मेटास्टेसिस के विकास में BMP सिग्नलिंग प्रतिपक्षी नोगिन की भूमिका।

बीएफजीएफ/एफजीएफ-2

समारोह: bFGF, माइटोजेनिक प्रोटीन के FGF सुपरफ़ैमिली का एक सदस्य है। यह कई प्रकार की कोशिकाओं के लिए एक अत्यधिक विशिष्ट कीमोटैक्टिक और माइटोजेनिक कारक है और अल्सर हीलिंग, संवहनी मरम्मत, दर्दनाक मस्तिष्क की चोट जैसे क्षतिग्रस्त ऊतकों के रीमॉडलिंग में शामिल प्रतीत होता है। bFGF मानव भ्रूण स्टेम सेल कल्चर माध्यम का एक महत्वपूर्ण घटक है। इसके अलावा, bFGF प्रोटीन एक हेपरिन-बाइंडिंग कैशनिक प्रोटीन है जो एंजियोजेनेसिस और ठोस ट्यूमर के विकास सहित विभिन्न रोग स्थितियों में शामिल है। इसलिए, bFGF को कैंसर कीमोप्रिवेंशन और चिकित्सीय रणनीतियों के लिए एक लक्ष्य माना जाता है। bFGF को अक्सर सेल कल्चर माध्यम के एक महत्वपूर्ण घटक के रूप में उपयोग किया जाता है, जैसे कि मानव भ्रूण स्टेम सेल कल्चर माध्यम, सीरम-मुक्त कल्चर सिस्टम।

एफजीएफ-10

समारोह: फाइब्रोब्लास्ट ग्रोथ फैक्टर 10 (FGF-10) एक हेपरिन-बाइंडिंग ग्रोथ फैक्टर है जो FGF परिवार से संबंधित है। इस परिवार के प्रोटीन कोशिका प्रसार और विभेदन को बढ़ावा देकर जन्मपूर्व विकास, जन्म के बाद की वृद्धि और विभिन्न ऊतकों के पुनर्जनन में केंद्रीय भूमिका निभाते हैं। FGF-10 मेसेनकाइमल कोशिकाओं द्वारा स्रावित होता है और बाह्यकोशिकीय FGF-BP से जुड़ता है, FGF-10 अधिमानतः उपकला FGF R2 (IIIb) को बांधता है और सक्रिय करता है, और FGF R1 (IIIb) के साथ कमजोर रूप से अंतःक्रिया करता है।

क्यूगुणवत्ता प्रबंधन प्रणाली का हाईऐक्टी™ साइटोकाइन

गुणवत्ता प्रबंधन प्रणाली

• आईएसओ 13485:2016 द्वारा प्रमाणित, साइटोकाइन्स का निर्माण प्रोटीन की स्वच्छता और स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए पूरी तरह से संलग्न अल्ट्रा-क्लीन उत्पादन प्रक्रिया के माध्यम से किया जाता है।
• "औषधियों के लिए अच्छे विनिर्माण अभ्यास" की प्रणाली का अनुपालन करना
• गुणवत्ता अनुमोदन प्रमाणपत्र (सीओए) प्राप्त करें
• एसेप्टिक प्रौद्योगिकी और द्वितीयक नसबंदी निस्पंदन
• दवा उत्पाद कच्चे माल उत्पादन आधार

गुणवत्ता आश्वासन प्रबंधन

• प्रबंधन कार्मिक प्रशिक्षण प्रणाली के लिए विशेष व्यक्ति जिम्मेदार है
• उपकरण रखरखाव और अंशांकन प्रक्रियाएं स्थापित करना
• कच्चा माल और आपूर्तिकर्ता प्रबंधन प्रणाली
• पूर्ण बैच उत्पादन रिकॉर्ड, बैच निरीक्षण रिकॉर्ड, पैकेजिंग रिकॉर्ड आदि।
• गुणवत्ता दस्तावेज़ रिकॉर्ड का लेखा-परीक्षण और निरीक्षण QA द्वारा किया गया है
• पूर्ण बैच उत्पादन और निरीक्षण रिकॉर्ड
• विश्लेषणात्मक विधियों का सत्यापन

गुणवत्ता नियंत्रण प्रणाली

• पीपुल्स रिपब्लिक ऑफ चाइना के फार्माकोपिया के 2020 संस्करण के तीसरे सामान्य नियम का अनुपालन करें: जैविक उत्पाद के उत्पादन के लिए कच्चे माल और एक्सीसिएंट्स का गुणवत्ता नियंत्रण

ऑर्गेनोइड संस्कृति सत्यापन

येसेन साइटोकाइन्स को मानव ट्यूमर ऑर्गेनोइड्स जैसे कि फेफड़े का कैंसर, गर्भाशय ग्रीवा का कैंसर, डिम्बग्रंथि का कैंसर, अग्नाशय का कैंसर और आंत के कैंसर, और सामान्य ऑर्गेनोइड्स जैसे कि मानव और माउस छोटी आंत के ऑर्गेनोइड्स पर सत्यापित किया गया है।

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