UCF.ME™ अल्ट्रान्यूक्लिअस, जिसे टोटिपोटेंट न्यूक्लिअस, ब्रॉड-स्पेक्ट्रम न्यूक्लिअस और नॉन-लिमिटिंग इनहिबिटरी एंडोन्यूक्लिअस के नाम से भी जाना जाता है, की उत्पत्ति सेराटिया मार्सेसेन से हुई थी, लेकिन बाद में इसे येसेन रिसर्च एंड डेवलपमेंट टीम द्वारा फिर से इंजीनियर किया गया और उत्पादित किया गया, जो ई. कोली में व्यक्त किया गया। इसका आणविक भार 26.5 kD और आइसोइलेक्ट्रिक पॉइंट 6.85 है। उल्लेखनीय रूप से, इसमें न्यूक्लिक एसिड को 2 से 5 बेस की लंबाई वाले 5'-मोनोफॉस्फेट ऑलिगोन्युक्लियोटाइड में पूरी तरह से विघटित करने की क्षमता है। अल्ट्रान्यूक्लिअस और साल्ट एक्टिव अल्ट्रान्यूक्लिअस दोनों ही बेंज़ोनेज के बेहतरीन विकल्प के रूप में काम करते हैं।
1. टोटिपोटेंट न्यूक्लिऐस क्या है?
2. टोटिपोटेंट न्यूक्लिऐस के उपयोग परिदृश्य क्या हैं?
3. टोटिपोटेंट न्यूक्लिऐस के क्या फायदे हैं?
4. अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न
5. संबंधित उत्पाद
1. टोटिपोटेंट न्यूक्लिऐस क्या है?
टोटिपोटेंट न्यूक्लिऐस आनुवंशिक रूप से संशोधित एंडोन्यूक्लिऐस होते हैं, जिनमें न्यूक्लिक एसिड के कई रूपों को विघटित करने की क्षमता होती है, जिसमें सिंगल-स्ट्रैंडेड, डबल-स्ट्रैंडेड, लीनियर, नेटिव और डिनेचर्ड न्यूक्लिक एसिड शामिल होते हैं। वे 3 से 5 बेस तक की लंबाई वाले 5'-मोनोफॉस्फेट ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड उत्पन्न करते हैं और कोई विशिष्ट बेस पहचान प्रदर्शित नहीं करते हैं। ये बहुमुखी न्यूक्लिऐस विभिन्न स्थितियों में मजबूत स्थिरता और पाचन गतिविधि प्रदर्शित करते हैं, जिससे वे नमूनों या उत्पादों में न्यूक्लिक एसिड अवशेषों को खत्म करने के लिए अत्यधिक कुशल बन जाते हैं। यह नमूने की शुद्धता और उत्पादों की जैविक प्रभावशीलता को बढ़ाता है, जिससे टोटिपोटेंट न्यूक्लिऐस वैज्ञानिक अनुसंधान, टीकों और प्रोटीन और पॉलीसैकराइड फार्मास्यूटिकल्स जैसे उद्योगों के लिए पसंदीदा एंजाइम तैयारी बन जाते हैं।
इसके अलावा, टोटिपोटेंट न्यूक्लिऐस वैक्सीन, एंटीबॉडी, सेल थेरेपी और अन्य जैविक उत्पादों की तैयारी के दौरान न्यूक्लिक एसिड को हटाने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं, जो FDA नियमों के अनुपालन को सुनिश्चित करते हैं, जिसमें कहा गया है कि चिकित्सीय उपयोग के लिए अंतिम उत्पाद में अवशिष्ट न्यूक्लिक एसिड 10 पीजी/खुराक से अधिक नहीं होना चाहिए। न्यूक्लिक एसिड को विघटित करके, टोटिपोटेंट न्यूक्लिऐस सेल लाइसेट्स की चिपचिपाहट को कम करते हैं, जिससे वायरस, एएवी वेक्टर और समावेशन निकायों जैसे सेल-व्युत्पन्न कणों के शुद्धिकरण के दौरान समाधान निस्पंदन/अल्ट्राफिल्ट्रेशन प्रक्रिया को सुविधाजनक बनाया जाता है। यह प्रसंस्करण को सुव्यवस्थित करता है, सेंट्रीफ्यूजेशन में सुधार करता है, अवक्षेपण और सतह पर तैरनेवाला की पृथक्करण दक्षता को बढ़ाता है, और क्रोमैटोग्राफिक शुद्धिकरण की प्रभावशीलता को बढ़ाता है, अंततः उपज और उत्पाद शुद्धता को बढ़ाता है।
2. टोटिपोटेंट न्यूक्लिऐस के उपयोग परिदृश्य क्या हैं?
अल्ट्रान्यूक्लिअस के अनुप्रयोगों की एक विस्तृत श्रृंखला है और यहां विशिष्ट उपयोग परिदृश्य दिए गए हैं।
2.1 वायरस शुद्धिकरण (लेन्टिवायरस, एएवी, पुनः संयोजक एडेनोवायरस वैक्सीन, निष्क्रिय वायरस, ऑन्कोलिटिक वायरस, आदि)
बायोमेडिकल क्षेत्र में वायरस का उपयोग काफी बढ़ रहा है, जो टीके, सेल थेरेपी, जीन थेरेपी और कई अन्य क्षेत्रों जैसे अनुप्रयोगों में फैला हुआ है। वायरस उत्पादन के लिए जिम्मेदार मेजबान कोशिकाएँ मुख्य रूप से निरंतर मार्ग कोशिकाएँ (CCL) हैं। CCLs अनियमित वृद्धि के लिए एक आनुवंशिक प्रवृत्ति प्रदर्शित करते हैं, जिससे उन्हें अनिश्चित काल तक प्रसार करने की क्षमता मिलती है। हालाँकि, CCLs से अवशिष्ट DNA की उपस्थिति संभावित जोखिम पैदा कर सकती है, जैसे कि अनियंत्रित मानव कोशिका प्रसार जिससे ट्यूमर का निर्माण हो सकता है। इसके अलावा, इन अवशिष्ट DNA टुकड़ों में संक्रामक वायरल जीनोम हो सकते हैं, जिससे ट्यूमरोजेनेसिस के साथ-साथ संक्रमण के जोखिम के बारे में चिंताएँ बढ़ जाती हैं। नतीजतन, जैविक उत्पादों में अवशिष्ट DNA के प्रबंधन के लिए कड़े नियंत्रण उपाय अनिवार्य हैं, जिससे उनकी सुरक्षा सुनिश्चित होती है। इस संबंध में, हमारा UCF.एमई™ अल्ट्रान्यूक्लिअस वायरस शुद्धिकरण के लिए एक सुरक्षित समाधान प्रदान करता है।
नमक प्रोटीन या वायरस एकत्रीकरण को कम करने में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, जिससे प्रोटीन और अन्य सेलुलर घटकों से डीएनए और आरएनए को अलग करने में सुविधा होती है। साल्ट एक्टिव अल्ट्रान्यूक्लिअस, एक गैर-विशिष्ट एंडोन्यूक्लिअस होने के कारण, उच्च नमक सांद्रता पर इष्टतम गतिविधि प्रदर्शित करता है। उच्च-नमक स्थितियों में, एंजाइमों को जारी डीएनए और आरएनए तक बेहतर पहुंच मिलती है, जिससे उनका क्षरण बढ़ जाता है। उच्च-नमक वातावरण में बढ़ी हुई गतिविधि वाले न्यूक्लिअस शुद्धिकरण प्रक्रियाओं को बढ़ाने में अधिक प्रभावी साबित होते हैं। साल्ट एक्टिव अल्ट्रान्यूक्लिअस का उपयोग सेल सुपरनैटेंट्स और लाइसेट्स में चिपचिपाहट को कम करने के लिए किया जा सकता है, जिससे उच्च नमक स्थितियों के तहत शुद्धिकरण दक्षता बढ़ जाती है। यह एंजाइम मेजबान न्यूक्लिक एसिड अवशेषों को पिकोग्राम स्तर तक कम कर देता है, जिससे वायरस शुद्धिकरण, वैक्सीन निर्माण और प्रोटीन और पॉलीसैकेराइड फार्मास्यूटिकल्स के उत्पादन सहित विभिन्न जैविक उत्पाद अनुप्रयोगों के प्रदर्शन और सुरक्षा में वृद्धि होती है।
2.2 ई. कोलाई में व्यक्त पुनः संयोजक प्रोटीन का शुद्धिकरण
ई. कोलाई में व्यक्त कुछ प्रोटीनों में समावेशन निकायों में एकत्र होने की प्रवृत्ति होती है, जो शुद्धिकरण प्रक्रिया को जटिल बनाता है क्योंकि वे अक्सर मेजबान डीएनए के साथ जुड़ जाते हैं। परिणामस्वरूप फटी हुई जीवाणु कोशिकाएँ उच्च चिपचिपाहट प्रदर्शित कर सकती हैं, जिससे प्रोटीन शुद्धिकरण दक्षता में उल्लेखनीय कमी आती है। हालाँकि, अल्ट्रासोनिक विघटन के दौरान जीवाणु समाधान में 10-50 U/mL UCF.ME™UltraNuclease डालने और विघटन के पूरा होने के बाद नमूने को 30 मिनट के लिए 37°C या रात भर 4°C पर इनक्यूबेट करने से जीवाणु समाधान में चिपचिपाहट को प्रभावी ढंग से कम किया जा सकता है। यह बदले में, शुद्धिकरण प्रक्रिया की दक्षता को काफी हद तक बढ़ाता है। संक्षेप में, आप प्रोटीन के प्रभावी शुद्धिकरण की सुविधा के लिए हमारे UCF.ME™ UltraNuclease पर भरोसा कर सकते हैं।
2.3 कोशिका समूहन को रोकें
हाल के वर्षों में, इम्यूनोएसे में क्रायोप्रिजर्व्ड परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं (PBMC) का उपयोग नाटकीय रूप से बढ़ गया है। PBMC कोशिकाओं की सबसे बड़ी विशेषता यह है कि पुनर्जीवन के बाद वे बहुत आसानी से गुच्छेदार हो जाती हैं, जिससे आसानी से कम कोशिका गुणवत्ता और अविश्वसनीय परीक्षण परिणाम हो सकते हैं। जब कोशिकाओं को पुनर्जीवित किया जाता है, तो UCF.ME™UltraNuclease की उचित सांद्रता (25-50 U/mL) को कल्चर माध्यम में मिलाया जाता है और कोशिकाओं को सह-संवर्धित किया जाता है, जो प्रभावी रूप से कोशिका गुच्छेदार होने से रोक सकता है। इसलिए, आप सफल परिणाम की संभावना बढ़ाने के लिए हमारे UCF.ME™ UltraNuclease का अधिकतम लाभ उठा सकते हैं।
3. टोटिपोटेंट न्यूक्लिऐस के क्या फायदे हैं?
3.1 अनुप्रयोगों की विस्तृत श्रृंखला
UCF.ME™ अल्ट्रान्यूक्लिअस विभिन्न प्रयोगात्मक स्थितियों के अंतर्गत डीएनए और आरएनए के विभिन्न रूपों को काट और विघटित कर सकता है तथा इसका प्रयोग विभिन्न जैविक उत्पादों में अवशिष्ट न्यूक्लिक एसिड को हटाने के लिए किया जा सकता है।
3.2 उच्च शुद्धता, उच्च एंजाइम गतिविधि
हमारे UCF.ME™ अल्ट्रान्यूक्लिऐस के लिए, इसकी एंजाइम शुद्धता 99% (HPLC) से अधिक या बराबर है, और इसकी एंजाइम गतिविधि 1.5*106 U/mg (सामान्य सब्सट्रेट के लिए एक पूर्ण मात्रात्मक विधि का उपयोग करके) से अधिक या बराबर है।
3.3 मजबूत अनुकूलनशीलता
UCF.ME™ अल्ट्रान्यूक्लिज़ में भंडारण और फ़्रीज़-थॉ में उच्च स्थिरता है। एंजाइम गतिविधि की प्रवृत्ति का पता लगाने के लिए हम UCF.ME™ अल्ट्रान्यूक्लिज़ को -20 °C, 4 °C और 37 °C पर संग्रहीत करते हैं। जब 2 सप्ताह के लिए 37 °C पर रखा गया, तो एंजाइम गतिविधि में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं हुआ।इस बीच, एंजाइम की स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए, हम सूखी बर्फ + बर्फ पैक के संयोजन का उपयोग करते हैं परिवहन UCF.ME™ UltraNuclease को अपने स्थान पर लाएँ। इसमें मजबूत सहनशीलता भी है और यह विभिन्न प्रकार की परिचालन स्थितियों के अनुकूल हो सकता है।
3.4 फार्माकोपिया का अनुपालन करें
UCF.ME™ UltraNuclease का निर्माण UCF.ME (अल्ट्रा क्लीन फैक्ट्री. मॉलिक्यूलर एंजाइम) में किया जाता है, जो एक तरह का अल्ट्रा-क्लीन एंजाइम है। अल्ट्रा-क्लीन एंजाइम क्या है? यह एक आणविक एंजाइम है जो बिना किसी HCD、HCR、HCP, DNASE FREE、RNASE FREE, कोई प्रोटीज अवशेष, कोई माइक्रोबियल अवशेष, कोई रोगजनक, पशु मूल, एंटीबायोटिक प्रदूषण, अल्ट्रा-लो एंडोटॉक्सिन अवशेष, उच्च एंजाइम गतिविधि और उच्च शुद्धता आदि के गुणवत्ता मानकों को प्राप्त करता है। इसलिए, आप हमारे उत्पादों पर सुरक्षित और भरोसेमंद तरीके से भरोसा कर सकते हैं।
3.5 जीएमपी उत्पादन
अल्ट्रान्यूक्लिअस उत्पादन की पूरी प्रक्रिया जीएमपी उत्पादन कार्यशाला में पूरी की जाती है, और गुणवत्ता निरीक्षण योजना सख्ती से होती है फार्माकोपिया यह विधि अनुसंधान एवं विकास से लेकर उत्पादन तक बड़े पैमाने पर मांग को पूरा करती है।
यूसीएफ.एमई™ अल्ट्रान्यूक्लिअस का साझेदार —— अल्ट्रान्यूक्लिअस एलिसा किट
सामान्य शुद्धिकरण चरणों में, UCF.ME™ अल्ट्रान्यूक्लिअस अशुद्धता को आसानी से हटाया जा सकता है। UCF.ME™ के अवशेषों का पता लगाने के लिए अल्ट्रान्यूक्लिअस, YEASEN ने सहायक अल्ट्रान्यूक्लिअस एलिसा किट विकसित की है, जो UCF.ME™ के अवशेषों का सटीक पता लगा सकती है नमूने में अल्ट्रान्यूक्लिअस। किट में उत्कृष्ट रैखिकता, पुनरावृत्ति, पुनर्प्राप्ति दर और विशिष्टता है।
अल्ट्रान्यूक्लिअस एलिसा किट
रैखिक सीमा 0.047 और 3 एनजी/एमएल के बीच है, और आर2 0.99 से अधिक है। अच्छे अंतर-बैच पुनरुत्पादन के साथ, हम नमूने में अल्ट्रा न्यूक्लियस की एक निश्चित सांद्रता जोड़ते हैं और पता लगाने के लिए एलिसा किट के 3 अलग-अलग बैचों का उपयोग करते हैं। जब न्यूक्लिऐस सांद्रता 3 और 0.186 एनजी/एमएल के बीच होती है, और सीवी 10% से कम होता है, तो पता लगाने की रिकवरी दर 70% से 110% के बीच होती है। इसके अलावा, विभिन्न सांद्रता वाले अल्ट्रा न्यूक्लियस की नकली नमूना रिकवरी दरें 70% से 130% के बीच होती हैं और अन्य ब्रांडों की तुलना में बेहतर होती हैं। इसकी मजबूत विशिष्टता भी है कि हमने 8 सामान्य नमूनों में अल्ट्रा न्यूक्लियस एंटीबॉडी के गैर-विशिष्ट बंधन का मूल्यांकन किया।
अल्ट्रान्यूक्लिअस की डीएमएफ फाइलिंग के बाद, येसेन ने डीएमएफ प्राप्त किया है संयुक्त राज्य अमेरिका एफडीए से नमक सक्रिय अल्ट्रान्यूक्लिऐस।
दाखिल संख्या है:
संख्या | प्रोडक्ट का नाम | फाइलिंग संख्या |
1 | अल्ट्रान्यूक्लिअस | एमएफ037298 |
2 | साल्ट एक्टिव अल्ट्रान्यूक्लिएज | एमएफ037815 |
4. अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न
प्रश्न 1: अल्ट्रान्यूक्लिअस को किस चरण में जोड़ना है?
उत्तर: यह आपके द्वारा उपयोग किए जा रहे नमूनों पर निर्भर करता है। वायरस शुद्धिकरण में, इसे आम तौर पर वायरस स्पष्टीकरण के बाद जोड़ा जाता है; ई. कोलाई प्रोटीन शुद्धिकरण में, इसे तब जोड़ा जा सकता है जब कोशिकाएँ लिस्ड होती हैं; सेल क्लंपिंग से निपटने में, इसे कोशिकाओं के साथ सह-खेती के लिए सीधे माध्यम में जोड़ा जा सकता है।
प्रश्न 2: यदि प्रतिक्रिया तापमान 37°C तक नहीं पहुंच सकता है, तो इसका उपयोग कैसे करें?
ए: अल्ट्रान्यूक्लिअस की एंजाइम गतिविधि तापमान, उपचार समय और एंजाइम गतिविधि इकाइयों से प्रभावित होती है। यदि तापमान 37 डिग्री सेल्सियस तक नहीं पहुंच सकता है, तो एंजाइम की मात्रा उचित रूप से जोड़ी जा सकती है, या ऊष्मायन समय बढ़ाया जा सकता है।
प्रश्न 3: क्या अल्ट्रान्यूक्लिऐस प्रोटीएज़ अवरोधकों के साथ संगत है?
ए: संगत, लेकिन ध्यान रखें कि कई प्रोटीज़ अवरोधकों में EDTA होता है। जब EDTA 1mM से अधिक होने लगता है, तो EDTA कुछ न्यूक्लिऐसेस की गतिविधि को बाधित कर देगा।
प्रश्न 4: अल्ट्रान्यूक्लिऐस को कैसे हटाया जाए?
ए: इसे टीएफएफ, डायलिसिस और क्रोमैटोग्राफिक कॉलम जैसी विधियों द्वारा हटाया जा सकता है।
प्रश्न 5: क्या अल्ट्रान्यूक्लिऐस एलिसा किट का उपयोग अन्य ब्रांडों के टोटिपोटेंट न्यूक्लिऐस अवशेषों का पता लगाने के लिए किया जा सकता है?
ए: हम ऐसा करने की सलाह नहीं देते हैं। ELISA किट पूरी तरह से अल्ट्रान्यूक्लिज़ के आधार पर विकसित की गई है और अल्ट्रान्यूक्लिज़ की सटीक मात्रा निर्धारित कर सकती है। अन्य ब्रांडों के अल्टीपोटेंट न्यूक्लिज़ अनुक्रम और उत्पादन प्रक्रिया के मामले में अल्ट्रान्यूक्लिज़ से अलग हो सकते हैं, और परीक्षण के परिणाम गलत हो सकते हैं।
5. संबंधित उत्पाद
येसेन द्वारा उपलब्ध कराए गए उत्पाद इस प्रकार हैं।
तालिका 1 संबंधित उत्पाद
प्रोडक्ट का नाम | एसकेयू | विशेष विवरण |
20157ईएस25/60/80/90 | 25केयू/100केयू/1एमयू/5एमयू | |
20159ईएस25/60/80/90 | 25केयू/100केयू/1एमयू/5एमयू | |
36701ES59 | 96टी | |
नमक सक्रिय अल्ट्रान्यूक्लिअस एलिसा किट | 36703ES96 | 96टी |