विवरण
हाईफेयर™ मल्टीप्लेक्स वन स्टेप आरटी-क्यूपीसीआर जांच किट (यूडीजी प्लस) एक मल्टीप्लेक्स क्वांटिटेटिव पीसीआर किट है जो टेम्पलेट के रूप में आरएनए पर आधारित है। प्रयोग की प्रक्रिया में, रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और क्वांटिटेटिव पीसीआर को एक ही ट्यूब में किया गया, जिससे प्रायोगिक संचालन सरल हो गया और संदूषण का जोखिम कम हो गया।
इस किट में, पहले स्ट्रैंड cDNA को गर्मी प्रतिरोधी हाईफेयर द्वारा कुशलतापूर्वक संश्लेषित किया गया थाटीएम वी रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस और UNICON द्वारा मात्रात्मक रूप से प्रवर्धित™ हॉटस्टार्ट टैक डीएनए पॉलीमरेज़। किट में मुख्य रूप से अनुकूलित एमपी बफर, एंजाइम मिक्स आदि शामिल हैं। बफर समाधान में पहले से ही Mg शामिल है2+ और dNTP। इसके अलावा, ऐसे कारक जो गैर-विशिष्ट पीसीआर प्रवर्धन को प्रभावी ढंग से रोक सकते हैं और कई qPCR प्रतिक्रियाओं की प्रवर्धन दक्षता में सुधार कर सकते हैं, जो प्रवर्धन दक्षता सुनिश्चित कर सकते हैं और कई प्रवर्धन प्रतिक्रिया तक ले जा सकते हैं। एयरोसोल संदूषण के जोखिम को प्रभावी ढंग से रोकने के लिए dUTP/UDG प्रणाली को जोड़ा गया था।
विशेषताएँ
1. जीअच्छी बहुमुखी प्रतिभा: यह रोगजनक सूक्ष्मजीवों, मानव जीनोम, पौधों और अन्य प्रजातियों के न्यूक्लिक एसिड के qPCR प्रवर्धन और पता लगाने के लिए उपयुक्त है.
2. उच्च संवेदनशीलता: सावधानीपूर्वक अनुकूलित बफर प्रणाली 250 प्रतियों/एमएल तक कम सांद्रता वाले टेम्पलेट्स की पहचान संवेदनशीलता में सुधार करती है.
3. डीयूपी/यूडीजी प्रणाली: डीयूटीपी/हीट-लैबाइल यूडीजी प्रदूषण रोधी प्रणाली को उत्पादों के एरोसोल प्रदूषण को कुशलतापूर्वक कम करने, झूठे सकारात्मक परिणामों को कम करने और प्रामाणिक परिणाम सुनिश्चित करने के लिए पेश किया गया है।.
4. सहायताइंग तेज़ कार्यक्रम: तेज़ 40 मिनट कार्यक्रम के साथ संगत.
5. सुपर स्थिरता: स्थिरई 37 डिग्री सेल्सियस पर 14 दिनों तक, 10 बार दोहराया गया जमाना और पिघलना।
अवयव
| अवयव | नाम | 16630ES60 (100 टी) | 16630ES80 (1000 टी) | 16630ES92 (10000 टी) |
| 16630-ए | 5×हाईफेयर एमपी बफर | 500 μएल | 5 एमएल | 50 एमएल |
| 16630-बी | हाईफेयर एंजाइम मिक्स | 100 μएल | 1 एमएल | 10 एमएल |
| 16630-सी | जीसी-एनहांसर | 500 μएल | 5 एमएल | 50 एमएल |
टिप्पणी: 1) 5×हाईफेयरटीएम एमपी बफर का संक्षिप्त रूप है हाईफेयरटीएम वी मल्टीप्लेक्स वन स्टेप आरटी-क्यूपीसीआर जांच बफर, जिसमें dNTPs, dUTP, Mg शामिल हैं2+, स्टेबलाइजर्स, एन्हांसर, और अधिक।
2) हाईफेयर एंजाइम मिक्स मुख्य रूप से शामिल है गर्मी प्रतिरोधी हाईफेयरटीएम वी रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस, यूनिकॉनटीएम हॉटस्टार्ट टैक डीएनए पॉलीमेरा और यूडीजीसे.
3) GC एन्हांसर वैकल्पिक है। कृपया GC एन्हांसर का निःशुल्क संस्करण देखें: कैट: 16901ES.
4) 16630-ए और 16630-बी, 16901-ए और के समतुल्य है 16901-बी, क्रमशः।
विशेष विवरण
| पीसीआर विधि | एक चरण आरटी-क्यूपीसीआर |
| नमूने का प्रकार | शाही सेना |
भंडारण
टीवह उत्पाद चाहिए होना संग्रहित पर -25° सेल्सियस~-15° सेल्सियस के लिए 1 वर्ष।
आंकड़ों
चित्र 1. उच्च पहचान दर
निर्देश
1. प्रतिक्रिया संघटन
| अवयव | आयतन (μएल) | अंतिम एकाग्रता |
| 5×हाईफेयर™ एमपी बफर | 5 | 1 × |
| हाईफेयर एंजाइम मिक्स | 1 | - |
| जीसी-एनहांसर | 0-5 | - |
| प्राइमर मिश्रण (10 μM) | 0.4 प्रत्येक | 0.16 माइक्रोएम |
| जांच मिश्रण (10 μM) | 0.2 प्रत्येक | 0.08 माइक्रोएम |
| शाही सेना | 1-5 | - |
| आरएनज़ मुक्त H2O | से 25 | - |
टिप्पणी:उपयोग से पहले अच्छी तरह मिश्रण तैयार कर लें, तथा तीव्र कंपन के कारण उत्पन्न अत्यधिक बुलबुले से बचें।
क) प्राइमर सांद्रता: भजन की पुस्तक मल्टीप्लेक्स प्राइमर सहित मिश्रण, स्थिति के आधार पर इष्टतम प्राइमर सांद्रता 0.1 और 1.0 μM के बीच हो सकती है।
ख) जांच सांद्रता: मल्टीप्लेक्स जांच लेबलिंग अंतर फ्लोरोसेंट समूह सहित जांच मिश्रण, स्थिति के आधार पर इष्टतम जांच सांद्रता 0.05 और 0 के बीच हो सकती है।5 μएम.
सी) टेम्पलेट कमजोरीकरण: क्यूपीसीआर अत्यधिक संवेदनशील है और टेम्पलेट को पतला करने की सिफारिश की जाती है। नियंत्रण सीटी मान 20 और 35 के बीच उपयुक्त है।
डी) सिस्टम की तैयारी: फ़िल्टर तत्व के साथ अन हेड। क्रॉस संदूषण और एरोसोल संदूषण से बचें।
2. अनुकूलित साइक्लिंग प्रोटोकॉल
| प्रतिक्रिया चरण | तापमान | समय | चक्र | |
| 1 | रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन | 50 डिग्री सेल्सियसए | 15 मिन | 1 |
| 2 | प्रारंभिक विकृतीकरण | 95° सेल्सियस | 5 मिनट | 1 |
| 3 | प्रवर्धन प्रतिक्रिया | 95° सेल्सियस | 15 सेकंड | 45 चक्र |
| 60 डिग्री सेल्सियसबी | 30 सेकंडसी |
टिप्पणी:ए) आरएवर्स ट्रांस्क्रिप्शन: तापमान 42 का चयन किया जा सकता हैडिग्री सेल्सियस या 50डिग्री सेल्सियस 10-15 मिनट के लिए.
बी) प्रवर्धन प्रतिक्रिया: तापमान को डिज़ाइन किए गए प्राइमरों के Tm मान के अनुसार समायोजित किया जाता है।
सी) प्रतिदीप्ति संकेत अधिग्रहणकृपया उपकरण मैनुअल की आवश्यकताओं के अनुसार प्रयोगात्मक प्रक्रिया निर्धारित करें।
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