L'angiogenesi è strettamente associata alla guarigione delle ferite, all'infiammazione, all'artrite reumatoide, alla retinopatia diabetica, alla degenerazione maculare e alla crescita tumorale. Durante la crescita di un organismo, l'angiogenesi è una parte importante della crescita di nuovi tessuti. In età adulta, fatta eccezione per eventi periodici che sono strettamente regolati in organi speciali, quasi tutti i tessuti normali sono privi di una grande quantità di angiogenesi fisiologica a causa dell'equilibrio tra fattori endogeni pro-angiogenici e anti-angiogenici. Quando l'equilibrio viene interrotto nella direzione della promozione dell'angiogenesi, le cellule endoteliali microvascolari (EC) passeranno a un fenotipo angiogenico, avviando così una risposta angiogenica, che può essere eliminata o accelerata.
Nello studio, i tradizionali metodi sperimentali di angiogenesi in vivo includono micropocket corneale, mesentere, impianti di spugna/matrice, analisi del disco (DAS), pesce zebra, ecc. Tuttavia, questi esperimenti non sono solo tecnicamente impegnativi, costosi e richiedono molto tempo, ma comportano anche questioni etiche. Rispetto agli esperimenti di angiogenesi in vivo, è più economico e pratico utilizzare una matrice speciale per mantenere l'angiogenesi cellulare in vitro. La matrice di mantenimento della crescita cellulare più comunemente utilizzata è una preparazione di membrana basale solubile estratta da tumori di topo EHS - gel di matrice.
I componenti principali del gel matrice sono laminina, collagene di tipo IV, eparan solfato proteoglicano (HSPG) e nestina, e contiene anche fattori di crescita come TGF-beta, EGF, IGF, FGF, attivatore tissutale del plasminogeno e altri fattori di crescita contenuti nei tumori EHS. Fornisce supporto, resistenza alla trazione e supporto di impalcatura per tessuti e cellule e può anche fungere da sottostruttura tridimensionale per l'adesione e il movimento cellulare, nonché da serbatoio per fattori di crescita, chemiochine e citochine. Può anche agire come segnale per la morfogenesi e la differenziazione cellulare. Yeasen ha sviluppato e prodotto CeturegelTM matrix gel, che è privo di LDEV (virus che eleva la lattato deidrogenasi), ha un contenuto di endotossina ultra basso ed è stato testato per il micoplasma per garantire l'assenza di contaminazione da micoplasma. Include diversi tipi di matrix gel come concentrazione di base, alta concentrazione e basso fattore di crescita.
Caratteristiche del prodotto
Elevata sicurezza: LDEV (virus potenziatore della lattato deidrogenasi) libero
Versatilità di concentrazione: Intervallo di concentrazione da 8 a 20 mg/mL
Buona stabilità del lotto: Rigoroso processo di produzione e controllo qualità per garantire prestazioni stabili tra i lotti
Bassa endotossina: contenuto di endotossina ≤4 EU/mL
Rilevamento di contaminanti: nessun residuo di micoplasmi, batteri e funghi rilevato.
Esperimento di angiogenesi
- Preparazione del gel matrice
1) Un giorno prima dell'esperimento, rimuovere il CeturegelTM matrice gel dal congelatore e riporla in frigorifero a 4°C durante la notte per farla sciogliere, quindi preraffreddare i materiali di consumo utilizzati.
2) Posizionare il CeturegelTM Matrix Gel va conservato in un contenitore per il ghiaccio prima dell'esperimento.
3) Aprire la confezione di sterilizzazione dei vetrini angiogenici e rimuovere i vetrini.
4) Aggiungere 10 μl di CeturegelTM Matrix Gel in ogni pozzetto, facendo attenzione che la punta della pistola sia perpendicolare alla parte superiore del pozzetto interno quando si aggiunge CeturegelTM Matrix Gel per impedire che il gel della matrice scorra attraverso il pozzetto superiore lasciando residui di gel.
- Gel
1) Per prima cosa, coprite il vetrino con un coperchio e preparate una piastra Petri da 10 cm, posizionando al suo interno un tovagliolo di carta imbevuto d'acqua per creare una scatola bagnata.
2) Collocare il vetrino nella capsula di Petri e chiudere il coperchio.
3) Mettere l'intera capsula di Petri in una CO2 incubatore e lasciarlo per circa 30 minuti per attendere che il gel si condensi, mentre si prepara la sospensione cellulare.
- Diffusione cellulare
1) Preparare le cellule digerite in una sospensione cellulare con una densità di 2×105 cellule/ml e mescolare bene.
2) Rimuovere i vetrini contenenti i vasi sanguigni che si sono solidificati in gel.
3) Aggiungere 50 μl di sospensione cellulare in ogni pozzetto, facendo attenzione a mantenere la punta della pistola perpendicolare alla parte superiore del pozzetto superiore e a non toccare il gel nel pozzetto inferiore.
4) Aggiungere il terreno di coltura cellulare, coprire e lasciare riposare; dopo un po' di tempo, tutte le cellule affonderanno e cadranno sulla superficie del gel matrice.
- Acquisizione delle immagini
Osserva, scatta foto e conserva le immagini regolarmente in base al tasso di crescita delle cellule.
- Presentazione dei risultati
Nota：Risultati dell'angiogenesi e della fluorescenza
Raccomandazione del prodotto
| Acido pseudolarico | IOnumero di telefono | Nforma |
| 40183ES08/10 | 5/10 ml | |
| 40184ES08/10 | 5/10 ml | |
| 40185ES08/10 | 5/10 ml | |
| 40186ES08/10 | 5/10 ml | |
| 40187ES08/10 | 5/10 ml | |
| CeturegelTM Matrice ad alta concentrazione,Senza fenolo rosso,Senza LDEV | 40188ES08/10 | 5/10 ml |
| 40190ES08/10 | 5/10 ml | |
| CeturegelTM Matrice per la coltura di organoidi,Senza fenolo rosso,Senza LDEV | 40191ES08/10 | 5/10 ml |