Lo strumento di ricerca RNA circolare -Rnase R

Lo strumento di ricerca sull'RNA circolare - RNAse R

—— Accelerare lo sviluppo di farmaci a RNA circolare

Negli ultimi anni, il vaccino/farmaco a mRNA è gradualmente entrato nella visione del pubblico. Il vaccino/farmaco a mRNA ha i vantaggi di una progettazione rapida, di un basso costo e di una facile produzione, ma poiché l'mRNA stesso è facile da degradare, attualmente è principalmente migliorata la stabilità della preparazione dell'mRNA aggiungendo un cappello e una coda e la traduzione assistita dell'mRNA. Negli ultimi anni, i ricercatori hanno scoperto un nuovo tipo di RNA: l'RNA circolare (Circular RNA, circRNA). Tali RNA sono una struttura ad anello chiuso covalente, che non è facile da degradare. Rispetto all'mRNA, il circRNA è più stabile e può ottenere una traduzione non dipendente dal cappello. Pertanto, la scoperta del CIRCRNA offre possibilità per lo sviluppo di una nuova generazione di vaccini e farmaci a RNA con una stabilità più semplice e migliore.

Figura 1: Il processo del vaccino a RNA 1

Il processo di produzione del CIRCRNA include: preparazione del modello, trascrizione in vitro, rimozione del modello di DNA, circolarizzazione e purificazione. Dopo che l'RNA è circolarizzato, è necessario utilizzare la ribonucleasi R (Ribonucleasi R, RNASE R) per digerire l'RNA non pilotato per raggiungere lo scopo di arricchire il CirCRNA. Yeasen ha un'ingegneria enzimatica molecolare e una piattaforma di evoluzione razionale. Garantisce la qualità del prodotto allo stesso tempo. Il team di ricerca e sviluppo di Yeasen ha sviluppato con successo un enzima RNASE R con elevata purezza e alta attività.

RNASI R (CAT#14606ES) è un'esonucleasi dell'acido ribonucleico 3'→ 5' Mg2+dipendente derivata da E. coli. Può digerire tutti gli RNA lineari e non digerisce CirCRNA, lariat RNA. Viene spesso utilizzata per rimuovere molecole di RNA lineare e realizzare lo scopo di arricchire RNA non lineare come CirCRNA e lariat RNA.

Caratteristiche

Purezza proteica (SDS-PAGE) ≥95%

Figura 2: Rilevamento della purezza delle proteine: diversi volumi (1 μL, 2 μL, 3 μL) del prodotto (Cat#14606ES) mostrano un'elevata purezza ≥95%.

Nessun residuo esonucleasi

Figura 3: 20 U di RNASE R sono state aggiunte a 0,5 μg di λDNA-Hind III Digest, incubando a 37 ℃ per 4 ore. Il risultato mostra che non è stato riscontrato alcun residuo L'esonucleasi è stata rilevata nei prodotti RNASE R (CAT#14606ES).

Capacità di digestione lineare dell'RNA e CircRNA

Figura 4: RNASE R (CAT#14606ES) può digerire molecole di RNA lineari
Figura 5: Il CircRNA può tollerare il trattamento con RNASE R (CAT#14606ES).

Prodotto

Gatto

Misurare

RNAsi R (20U/μL)

14606ES

250U/2500U/10000U
RNasi R (grado GMP, 20 U/μL) 14615ES 250U/2500U/10000U

T7 RNA polimerasi di grado GMP (250U/μL)

10625ES

10KU/100KU/2500KU
CleaScrip™ T7 RNA Polimerasi (dsRNA basso, 250 U/μL) 10628ES 10KU/100KU/2500KU

Riferimento

  1. Qu L, Yi Z, Shen Y et al. Vaccini circolari a RNA contro SARS-CoV-2 e varianti emergenti. Cella.Italiano: 2022;185(10):1728-1744.e16.doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Chen L, Wang C, Sun H, et al. La cassetta degli attrezzi bioinformatica per la scoperta e l'analisi del circRNA. Breve bioinformazione. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

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