La peste suina africana (PSA) è una malattia infettiva acuta, grave e altamente contagiosa causata dal virus della peste suina africana (PSAV) che infetta i maiali domestici o i cinghiali. La sua morbilità e mortalità possono raggiungere il 100%, mettendo seriamente a repentaglio l'industria suina globale e causando incalcolabili perdite economiche. L'Organizzazione mondiale per la salute animale (OIE) la elenca come malattia animale soggetta a denuncia.

Attualmente non esiste un vaccino o un trattamento efficace per la peste suina africana. Una diagnosi rapida e accurata della peste suina africana tramite metodi diagnostici di laboratorio è fondamentale per prevenire la diffusione della malattia. L'OIE raccomanda la qPCR come strumento principale per la diagnosi di routine della PSA.

Yeasen è un produttore con una vasta esperienza nella R&S di materie prime IVD. Di fronte alla peste suina africana, Yeasen risponde positivamente e collabora con i clienti per sviluppare tre soluzioni di processo complete, dall'estrazione al rilevamento del virus della peste suina africana. Quindi, quali sono le tre soluzioni? E quali sono le applicazioni di queste soluzioni? Continua a leggere...

Figura 1. Soluzioni Yeasen per la rilevazione della peste suina africana

Soluzione I: TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)(inchiesta）

Caratteristiche del prodotto

👍Sistema anti-inquinamento UDG, che previene efficacemente il rischio di contaminazione da aerosol

👍Stabilità a lungo termine della soluzione PCR premiscelata (master mix + primer + sonde) a temperatura ambiente, semplificando notevolmente la difficoltà di rilevamento

👍Elevata efficienza di amplificazione e buona ripetibilità

👍Adatto per multipiattaforma e multisistema

Mostra caso

👉Stabilità a lungo termine della soluzione PCR premiscelata
Cat#13171 è stato utilizzato per configurare la soluzione PCR premiscelata che può essere posizionata a 37°C per 7 giorni e congelata e scongelata ripetuta 15 volte nell'amplificazione del sistema plasmidico ASF. I risultati hanno mostrato che il valore Ct e la sensibilità della soluzione PCR non sono significativamente diversi dopo aver posizionato 7 giorni a 37℃ e il valore Ct non è cambiato significativamente dopo congelata e scongelata ripetuta 15 volte.

Figura 2. Cat#13171 TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)(Informarsi) utilizzato in soluzione PCR premiscelata con stabilità a lungo termine nell'amplificazione del sistema plasmidico ASF. 2A-Valore Ct a 37℃ per 0 giorni e 7 giorni 2B-Sensibilità a 37℃ per 0 giorni e 7 giorni 2C-Stabilità dopo congelamento-scongelamento 15 volte

👉Reagenti stabili e riproducibili
Sono stati selezionati quattro lotti diversi di Cat#13171 per ripetere l'esperimento di amplificazione del sistema plasmidico ASFV 20 volte. Non vi sono state differenze significative nei valori Ct, con un CV inferiore all'1%.

Figura 3.Test di ripetibilità di Yeasen Cat#13171

👉Multipiattaforma multisistema applicabile
Yeasen Cat#13171 è stato utilizzato per amplificare i doppi plasmidi della peste suina africana ASFV/ACT rispettivamente sulle piattaforme Bio-Rad CFX96, ABI Q5 e Slan. Si può vedere che Yeasen Cat#13171 è adatto a vari tipi di strumenti e i dati sono affidabili e stabili.

Figura 4. Sistema Bio-Rad CFX96 Real-Time PCR

Figura 5. Sistema PCR in tempo reale ABI Q5

Figura 6. Sistema PCR in tempo reale Slan

Soluzione II:Master mix qPCR multiplex TaqMan universale

Il master mix qPCR multiplex Universal TaqMan di Yeasen (Cat#11211) è profondamente ottimizzato per un'amplificazione efficiente di modelli a bassa concentrazione utilizzando la DNA polimerasi Taq Hot-Start modificata con anticorpi e il buffer multiplex abbinato. Questo prodotto supporta fino a reazioni PCR 4-plex in una singola provetta ed è ideale per la genotipizzazione e l'analisi qPCR multiplex.

Caratteristiche del prodotto

👍Forte tolleranza alle impurità del sangue, può essere utilizzato con il reagente di estrazione dell'acido nucleico Yeasen Cat#13720 Nucleic Acid Release Reagent V2, ideale per qPCR diretto
👍Sensibilità ultra elevata a 3 copie/reazione, migliora notevolmente la precisione del rilevamento
👍Stabilità a lungo termine della soluzione PCR premiscelata (master mix + primer + sonde) a temperatura ambiente, semplificando notevolmente la difficoltà di rilevamento

Mostra caso

👉Forte tolleranza alle impurità del sangue
Rispetto a prodotti simili di altri marchi, Yeasen Cat#11211 ha una tolleranza più elevata agli inibitori nei campioni di sangue. I risultati hanno mostrato che Yeasen Cat#11211 ha un'elevata tolleranza a EDTA e citrato di sodio e può sopportare lo 0,5% di sangue intero.

Figura 7. Cat#11211 Master mix qPCR multiplex TaqMan universale e per le soluzioni qPCR ASF vengono utilizzati mix master di vari marchi integrati rispettivamente con 3 mM EDTA (3A), 6 mM citrato di sodio (3B), 0,5% sangue (3C).

👉Sensibilità ultra elevata a 3 copie/reazione

L'amplificazione del plasmide ASFV con 20 repliche è stata eseguita sulla base dei prodotti di diverse marche. I risultati degli esperimenti mostrano che il tasso di rilevamento dei prodotti Yeasen è più elevato.

Figura 8. Confronto dei tassi di rilevamento tra prodotti simili di marche diverse (3 copie nel sistema finale)

👉Stabilità a lungo termine, stabile per 7 giorni a temperatura ambiente

La soluzione PCR del sistema a doppio plasmide ASFV/ACT può mantenere prestazioni stabili dopo 7 giorni a 4℃, 25℃ e 37℃. Si può vedere che il valore Ct e il valore di fluorescenza non sono cambiati in modo significativo.

Figura 9. Stabilità della soluzione PCR

Soluzione III: Amplificazione isotermica

I prodotti Yeasen supportano la tecnologia di amplificazione isotermica che consente di rilevare la PSA in modo più rapido ed efficiente. Cat# 14402 Hieff™ Bst Plus DNA polimerasi (40 U/μL) è derivato dalla DNA polimerasi I termofila Geobacillus sp, priva di attività esonucleasica 5'-3'. Questo prodotto ha una maggiore attività della DNA polimerasi 5'-3', attività di spostamento del filamento e tolleranza dUTP, che è più adatta per reazioni di amplificazione isotermica anti-inquinamento, come LAMP, CPA, ecc.

Caratteristiche del prodotto

👍Elevata efficienza di amplificazione

👍Amplificazione ad alta resa

👍Tolleranza dUTP, può essere utilizzato in combinazione con Cat#10303 Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG)(Informarsi), termolabile, 1 U/μL per prevenire il rischio di contaminazione da aerosol

Mostra caso

👉Alternativa superiore ai prodotti di marca N* importati

Il processo di amplificazione è stato eseguito utilizzando la DNA polimerasi Bst di Yeasen e N* Company, rispettivamente. Non c'era alcuna differenza significativa nel valore Ct e nell'intensità di fluorescenza tra i diversi marchi.

Figura 10. Curve di amplificazione di diverse marche

Ordinazione dei prodotti