Il primo caso confermato di vaiolo delle scimmie è stato segnalato nel Regno Unito all'inizio di maggio, e si è rapidamente diffuso in paesi e regioni non endemici. Al 21 settembre 2022, sono stati confermati 106 paesi/regioni in tutto il mondo, con un totale di 63.117 casi. Il 16 settembre, Chongqing ha confermato un caso importato di vaiolo delle scimmie, il primo caso nella Cina continentale, che ha suscitato preoccupazione sociale.

Figura 1. Mappa globale dell'epidemia di vaiolo delle scimmie del 2022 (dal CDC)

1. Che cos'è il vaiolo delle scimmie?
2. La storia del vaiolo delle scimmie
3. Come si diffonde
4. Segni e sintomi
5. Metodo di rilevamento
6. Corrispondenza del prodotto
7. Ordinazione del prodotto

1. Che cos'è il vaiolo delle scimmie?

Il virus del vaiolo delle scimmie è un virus a DNA a doppio filamento con una lunghezza totale di circa 197 kb. Appartiene al genere Orthopoxvirus della famiglia Poxviridae. Virus). Esistono due rami del virus del vaiolo delle scimmie (ramo dell'Africa occidentale e ramo del bacino del Congo). Tra questi, il tasso di mortalità del ramo dell'Africa occidentale è di circa il 3,6% e il tasso di mortalità del ramo del bacino del Congo può raggiungere il 10,6%. Campioni di casi di vaiolo delle scimmie trovati in aree non endemiche da maggio 2022, l'analisi del sequenziamento ha mostrato il clade dell'Africa occidentale^[1].

Figura 2. Immagine del vaiolo delle scimmie (immagine del CCDC)

2. La storia del vaiolo delle scimmie

Il vaiolo delle scimmie fu scoperto nel 1958, quando si verificarono due focolai di una malattia simile al vaiolo in colonie di scimmie tenute per la ricerca. Nonostante il nome "vaiolo delle scimmie", la fonte della malattia rimane sconosciuta. Tuttavia, roditori africani e primati non umani (come le scimmie) potrebbero ospitare il virus e infettare le persone^[2].
Il primo caso umano di vaiolo delle scimmie è stato registrato nel 1970. Prima dell'epidemia del 2022, il vaiolo delle scimmie era stato segnalato in persone in diversi paesi dell'Africa centrale e occidentale. In precedenza, quasi tutti i casi di vaiolo delle scimmie in persone al di fuori dell'Africa erano collegati a viaggi internazionali in paesi in cui la malattia si verifica comunemente o tramite animali importati. Questi casi si sono verificati in più continenti^[2].

3. Come si diffonde

Può trasmettersi dagli animali all'uomo, dall'uomo all'uomo e dall'ambiente all'uomo.
È ormai chiaro che il vaiolo delle scimmie può infettare gli esseri umani in 3 modi: uno è dagli animali infetti alle persone. Il virus può entrare nel corpo attraverso la pelle rotta, le vie respiratorie o le mucose (occhi, naso o bocca). Il secondo è trasmesso attraverso il contatto ravvicinato tra persone, inclusi rapporti sessuali, baci, abbracci o toccamenti delle parti del corpo del vaiolo delle scimmie e il contatto con indumenti, lenzuola, asciugamani o stoviglie contaminati dal virus e altri oggetti che possono essere infetti. Il terzo è la trasmissione di goccioline respiratorie^[3].

4. Segni e sintomi

Le principali manifestazioni cliniche sono febbre, eruzione cutanea e linfoadenopatia.
I sintomi più comuni nella fase iniziale includono febbre, mal di testa, dolori muscolari e linfonodi ingrossati. L'eruzione cutanea compare da 1 a 3 giorni dopo l'insorgenza della malattia. L'eruzione cutanea tipica compare prima sul viso e si diffonde gradualmente agli arti e ad altre parti. L'eruzione cutanea è per lo più centrifuga., le eruzioni cutanee sul viso e sugli arti sono più comuni rispetto a quelle sul tronco, possono comparire sui palmi delle mani e sulle piante dei piedi e il numero di eruzioni cutanee varia da diverse a migliaia; può inoltre interessare la mucosa orale, il tratto digerente, i genitali, la congiuntiva e la cornea.
I sintomi durano in genere dai 14 ai 21 giorni e i pazienti solitamente li risolvono da soli. Eritema o iperpigmentazione o persino cicatrici possono rimanere dopo la caduta delle croste. Vale la pena notare che la crosta rimane contagiosa finché non cade e si forma un nuovo strato di pelle sottostante^[3].

5. Metodo di rilevamento

Per prevenire e controllare efficacemente l'epidemia di vaiolo delle scimmie e impedire che il virus venga importato e diffuso, le aziende globali di IVD hanno risposto attivamente. In qualità di fornitore di materie prime per la produzione di reagenti di rilevamento IVD e soluzioni reagenti, YEASEN fornisce una soluzione completa per aiutare a rilevare in modo efficiente il virus del vaiolo delle scimmie. Dall'estrazione dell'acido nucleico ai componenti reagenti (reagenti enzimatici e pseudovirus) e ai kit semilavorati (sonde primer, reagenti enzimatici e controlli plasmidici), YEASEN può fornirti in modo stabile.

Figura 3. Metodo di rilevamento del virus

5.1 Vantaggio del metodo

• Funzionamento efficiente e conveniente: un set di kit, inclusi tutti i componenti, senza operazioni ingombranti, aggiunta in un unico passaggio
• Elevata sensibilità di rilevamento: metodo di anticorpi geneticamente modificati, enzima Taq hot-start, 1 copie/reazione può anche essere rilevata
• Elevata stabilità del reagente: conservare a 37℃ per 1 settimana, prestazioni stabili dopo ripetuti congelamenti e scongelamenti
• Prevenzione dell'inquinamento UDG: il sistema dUTP/UDG viene aggiunto al sistema per prevenire efficacemente il rischio di contaminazione da aerosol.
• Applicabile a più piattaforme: adatto per Bio-Rad CFX96, ABI Q5 e Slan

5.2 Corrispondenza del prodotto

• Reagenti per l'estrazione degli acidi nucleici: MolPure™ Kit tampone magnetico DNA/RNA virale (Cat#18300ES)
• Reagente per la rilevazione del vaiolo delle scimmie: Kit qPCR in tempo reale per il virus del vaiolo delle scimmie(Cat#13862ES/Cat#13863ES)
• Pseudovirus del vaiolo delle scimmie: Pseudovirus del virus del vaiolo delle scimmie(Cat#12099ES/Cat#12100ES)

6. Prodotti consigliati

6.1 Kit qPCR in tempo reale per il virus del vaiolo delle scimmie (Cat#13862ES)

Vantaggi del prodotto:
Funzionamento efficiente e conveniente
Elevata sensibilità e buona specificità
Super stabilità
Buona ripetibilità

6.1.1 Mostra caso:

• Super stabilità termica per 37℃

L'MPXV è stato amplificato posizionando Cat#13862ES a 37℃ per 7 giorni. I risultati hanno mostrato che il valore Ct e il valore di fluorescenza non sono stati influenzati in modo significativo da 7 giorni a 37℃ e la stabilità termica era forte.

Figura 4. Verifica della stabilità accelerata a 37℃ di 7 giorni di Yeasen (Cat#13862ES)

• Super stabilità al congelamento-scongelamento

L'MPXV è stato amplificato mediante congelamento e scongelamento del Cat#13862ES a -20℃ rispettivamente per 10 volte, 20 volte e 50 volte.I risultati hanno mostrato che il congelamento e lo scongelamento 10 volte, 20 volte e 50 volte a -20℃ non hanno avuto effetti significativi sul valore Ct e sul valore di fluorescenza e la stabilità al congelamento e allo scongelamento è stata elevata.

Figura 5. Verifica della stabilità al congelamento-scongelamento a -20℃ di Yeasen (Cat#13862ES)

• Sensibilità ultra elevata, è possibile rilevare anche 1 copia/μL

Utilizzando il prodotto Yeasen monkeypox (Cat#13862ESES), sono state utilizzate 1000 copie/μL, 100 copie/μL, 10 copie/μL, 1 copia/μL e un bianco negativo (NTC) per rilevare MPXV. Si può vedere che può essere rilevata anche una singola copia (il valore Ct è di circa 38) e il test NTC a 48 pozzetti è stato ripetuto, con una linea di base stabile, picchi NTC negativi e nessun fenomeno di scodamento, con elevata sensibilità e elevata specificità.

Figura 6. Rilevamento della sensibilità MPXV

Figura 7. Rilevamento della specificità dell'MPXV

• I reagenti sono stabili e riproducibili

Il kit di rilevamento del vaiolo delle scimmie Yeasen (Cat#13862ESES) è stato selezionato per eseguire 10 test ripetuti per concentrazioni basse, medie e alte di campioni positivi. I risultati hanno mostrato che il CV dei campioni positivi nel canale FAM era inferiore o uguale al 2% e il controllo vuoto non presentava picchi né fenomeni di scodamento. , buona ripetibilità.

Figura 8. Test di ripetibilità

6.2 Kit qPCR in tempo reale per il virus del vaiolo delle scimmie (UDG Plus)(Cat#13863ES)

Vantaggi del prodotto:

⑴ Funzionamento efficiente e conveniente
⑵ Elevata sensibilità e buona specificità
⑶ Super stabilità
⑷ Buona ripetibilità
⑸ Prevenzione dell'inquinamento UDG

6.2.1 Mostra caso:

• Super stabilità termica per 37℃

L'MPXV è stato amplificato posizionando Cat#13863ES a 37℃ per 7 giorni e 14 giorni, rispettivamente. I risultati mostrano che dopo 7 giorni e 14 giorni a 37℃, non vi è alcun effetto significativo sul valore Ct e sul valore di fluorescenza, e la stabilità termica è forte.

Figura 9. Verifica della stabilità accelerata a 37℃ di 7 giorni e 14 giorni di Yeasen (Cat#13863ES)

• Super stabilità al congelamento-scongelamento

Cat#13863ES è stato congelato e scongelato a -20℃ per 50 volte per amplificare l'MPXV. I risultati hanno mostrato che il congelamento e lo scongelamento a -20℃ per 50 volte non hanno avuto effetti significativi sul valore Ct e sul valore di fluorescenza e la stabilità del congelamento e dello scongelamento era forte.

Figura 10. Verifica della stabilità al congelamento-scongelamento a -20℃ di Yeasen (Cat#13863ES)

• Elevata sensibilità e specificità

Sono state testate 5 copie/μL di MPXV e il bianco negativo (NTC) utilizzando il prodotto Yeasen monkeypox (Cat#13863ESES). I risultati hanno mostrato che la linea di base era stabile, il tasso di rilevamento di FAM era del 100%, il limite minimo di rilevamento era di 5 copie/μL e durante il test ripetuto a 48 pozzetti di NTC, la linea di base dei canali FAM e VIC era stabile, il picco negativo NTC non presentava alcun fenomeno di scodamento e aveva un'elevata sensibilità e un'elevata specificità.

Figura 11. Rilevamento della sensibilità MPXV

Figura 12. Rilevamento della specificità dell'MPXV

• Buona linearità dei reagenti

Il modello positivo è stato diluito 10 volte dalla concentrazione di 1×105 copie/μL, e il kit Yeasen qPCR monkeypox (Cat#13863ES) è stato utilizzato per ripetere il rilevamento due volte. Il logaritmo del numero di copie iniziale è l'ascissa, e il valore Ct è l'ordinata. È stata creata la curva standard, e i risultati hanno mostrato che il canale FAM del gene del vaiolo delle scimmie aveva un intervallo lineare di 10～1×105 copie/μL, e R2>0,99, che aveva una buona relazione lineare.

Figura 13. Test di linearità

• Reagenti stabili e riproducibili

Il kit Yeasen qPCR monkeypox (Cat#13863ES) è stato selezionato per eseguire 10 test ripetuti per basse, medie e alte concentrazioni di positivo e 20 test ripetuti per controllo negativo (NC) e controllo bianco (NTC). I risultati mostrano che: Canale FAM Il CV dei campioni positivi è inferiore al 3% e il controllo negativo e il controllo bianco non presentano picchi né fenomeni di scodamento; i valori Ct del canale VIC NC sono tutti inferiori a 35, il CV è inferiore allo 0,3% e l'NTC non presenta picchi né fenomeni di scodamento e la ripetibilità è buona.

Figura 14. Test di ripetibilità (FAM)

Figura 15. Test di ripetibilità (VIC)

7. Ordinazione del prodotto

Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd., fondata nel 2014, è un'impresa high-tech impegnata nella R&S e nella produzione di materie prime enzimatiche per utensili e anticorpi antigeni. I suoi prodotti includono enzimi diagnostici molecolari, proteine ​​e anticorpi utilizzati in prodotti farmaceutici, test di sicurezza alimentare, allevamento, giustizia e altri settori. Ci impegniamo a fornire ai clienti nel campo delle scienze della vita prodotti e servizi di alta qualità. Le linee guida per l'acquisto del prodotto per Monkeypox Virus sono le seguenti:

Tabella 1.Prodotti correlati

Riferimenti

[1] Centro cinese per il controllo e la prevenzione delle malattie: consigli sulla salute contro il vaiolo delle scimmie
[2] CDC:Informazioni sul vaiolo delle scimmie | Vaiolo delle scimmie | Poxvirus | CDC
[3] Yulin Evening News: Identificata la fonte del primo caso di vaiolo delle scimmie nella Cina continentale! Promemoria di emergenza per il controllo delle malattie del Guangxi