Ti preoccupa ancora la bassa efficienza della ricombinazione omologa di frammenti multi-frammento o super-lunghi e il piccolo numero di colonie?

Ancora per il vettore o il frammento è più prezioso, bassa resa, al fine di risparmiare materie prime, l'uso di un piccolo sistema di legatura a bassa concentrazione, ma l'efficienza di legatura è bassa e disturbata?

Prodotto YEASEN: Miglioramento significativo, bassa concentrazione, piccolo sistema e frammenti ultra lunghi dell'efficienza di legatura, elevato tasso di clonazione positiva, ti aiutano a completare facilmente il legatura.

Confronto tra la clonazione in un unico passaggio e i metodi tradizionali di clonazione con restrizione enzimatica

Vantaggio del prodotto

Orientamento: Clonazione in un unico passaggio di 1-7 frammenti di DNA.

Semplice: è possibile legare più frammenti in una sola provetta.

Veloce: legatura più rapida in 5 minuti.

Elevata efficienza: elevato tasso di clonazione positiva.

Sistema di piccole dimensioni: il sistema di legatura totale può avere dimensioni pari a soli 6 μL.

Lunghezza eccessiva: superiore a 25 kb (lunghezza vettore+frammento) per la legatura.

Prestazione Display

• Ricombinazione efficiente di un singolo frammento Sistema piccolo da 6 μL

Figura 1 10 ng di frammenti singoli a basso input sono stati legati nello stato di cellule recettive non rianimatorie del piccolo sistema da 6 μL.I risultati hanno mostrato che 10923ES aveva prestazioni migliori rispetto ai prodotti concorrenti, con elevata efficienza di legatura, più colonie e un tasso positivo del 100%. AB: piastra di conversione ricostituita. Il rapporto molare tra carrier (10 kb) e frammento di inserto (1 kb) era 1:2. C: identificazione PCR del frammento di inserto. M: YEASEN 10505ES. Volume del carrier: 40 ng/6 μL Sistema di reazione, condizioni di reazione: 50℃, 15 min.

• Ricombinazione efficiente multi-frammento

Figura 2 Sei frammenti (7,6 kb) legati. I risultati hanno mostrato che 10923ES ha avuto prestazioni migliori rispetto ai prodotti concorrenti, con più colonie e un tasso positivo del 100%. AB: Piastra di conversione ricostituita. Il rapporto molare tra carrier (11,6 kb) e frammento di inserto (7,6 kb) era 1:2. C: Identificazione PCR del frammento di inserto. M: YEASEN 10505ES, lunghezza PCR 2,6 kb. Volume carrier: 200 ng/20 μL Sistema di reazione, condizioni di reazione: 50℃, 50 min.

• Ricombinazione efficiente multi-frammento a bassa concentrazione

Figura 3 Legare separatamente i frammenti a bassa concentrazione cinque e sei. I risultati hanno mostrato che 10923ES ha mostrato una connettività stabile a basse concentrazioni, con un'elevata conta batterica e un tasso di positività del 100%. AB: piastra di conversione ricombinante. CD: immagine di elettroforesi di identificazione PCR del frammento di inserimento, M: YEASEN 10505ES, lunghezza PCR 2,6 kb.

• Stabilità del reagente

Figura 4 Dopo essere stato mantenuto a 37℃ per 7 giorni, i risultati hanno mostrato che 10923ES è rimasto stabile nel legare i cinque e i sei frammenti a basse concentrazioni. AF: piastra di conversione ricombinante. GH: immagine di elettroforesi di identificazione PCR del frammento di inserimento, M: YEASEN 10505ES, lunghezza PCR 2,6 kb.

Caso del cliente

• Riorganizzazione efficiente di piccoli sistemi

Fig. 5 10923ES è stato legato a un singolo frammento in un Sistema di reazione piccolo da 10 μL, con un tasso positivo del 100%. A: Piastra di conversione ricostituita. B: Identificazione PCR del frammento di inserto. Dimensioni del carrier: 5.631 bp; Dimensioni del frammento target: 1.384 bp.

Figura 6 Clone di mutazione puntiforme e di giunzione a frammento singolo di piccolo sistema da 10 μL, tasso positivo del 100%. A e C: Piastre di trasformazione della ricombinazione. B: Identificazione PCR dei frammenti di inserto, le corsie 1-5 sono colonia 1, colonia 2, controllo negativo, controllo positivo (genoma come stampo), controllo positivo (frammento purificato tramite PCR come stampo). D: Elettroforegramma dell'identificazione PCR dei frammenti di inserto.

• Ricombinazione efficiente di frammenti corti a bassa concentrazione

Fig. 7 10923ES collegamento del frammenti a bassa concentrazione. Rispetto ai prodotti concorrenti, il numero di colonie era elevato e il tasso positivo (10/11) era > 90,9%. AB: Piastra di conversione ricostituita. C: Identificazione PCR del frammento di inserto. Dimensioni del carrier: 3.000 bp; dimensioni del frammento target: 441 bp.

• Legatura multisegmento efficiente e veloce

Fico.8 10923ES legatura a quattro segmenti, connessione di combinazione GC elevata e segmento corto, rispetto al marchio S, ha una conta batterica più elevata di 10923ES e un tasso positivo del 100%. D: Compressa di conversione ricombinante. E: Mappa di identificazione del sequenziamento del frammento di inserto. F: Il sequenziamento di Sanger ha confermato la connessione riuscita tra vettore e frammenti e il sequenziamento nel sito di connessione era corretto.

Raccomandazione del prodotto Strength Star

10923ES Canale di ordine

Orientamento al prodotto	Nio sono	Art.No	Sspecifiche
1 – 7 frammenti sono stati uniti in un unico passaggio e la reazione di ricombinazione è stata completata nel tempo più rapido di 5 minuti	Clone di HieffTM Kit di clonazione universale II in un unico passaggio	10923ES20/50	20 tonnellate/50 tonnellate

Reuforico Pprodotti

Orientamento al prodotto	Nio sono	Art.No	Sspecifiche
PCR ad alta fedeltà	2× Hieff CanaceTM AdvanceFast PCR Master Mix (con colorante)	10164ES03/08	1 ml/5×1 ml
Aggiornamento rapido della PCR, può essere una PCR di colonia ed è adatta per l'amplificazione di modelli complessi	2×HieffTM Master Mix PCR HotStart Ultra-Rapid II	10167ES03/08	1 ml/5×1 ml