La PCR quantitativa fluorescente è un esperimento altamente sensibile che richiede un alto grado di precisione nell'operazione da parte del personale di laboratorio. Pertanto, durante il processo dell'esperimento qPCR, inevitabilmente incontriamo problemi:
I. Problemi relativi a fattori non sperimentali
- Nel laboratorio sono in corso numerosi progetti di esperimenti qPCR e gli strumenti sono occupati, lasciando le miscele di reazione preparate con cura senza un metodo di smaltimento chiaro.
- Sono presenti numerosi campioni quantitativi, il compito di aggiungere campioni è oneroso e vi è il rischio di errori nell'aggiunta dei campioni dovuti a vertigini, con conseguenti risultati sperimentali inaffidabili.
- Tempi di esecuzione lunghi delle macchine, numero limitato di prove sperimentali e attività sperimentali non possono essere completate regolarmente come pianificato.
- Le attrezzature di laboratorio vengono sostituite con nuovi strumenti, nel laboratorio sono presenti diversi strumenti quantitativi e i reagenti quantitativi non sono compatibili con gli strumenti.
II. Problemi limitati da fattori sperimentali
Problemi di quantificazione con geni a bassa abbondanza. Progettazione di primer complessi e processi di screening, sensibilità e riproducibilità dei pozzetti replicati...
In qualità di produttore esperto dedicato alla ricerca e allo sviluppo di reagenti qPCR, YEASEN ha sviluppato meticolosamente una soluzione di premiscelazione qPCR ad alte prestazioni – UNICON™ di Hieff Master Mix universale blu qPCR SYBR verde, che può risolvere i problemi sperimentali sopra menzionati in un colpo solo. L'Universal ROX utilizzato in questo prodotto sostituisce il tradizionale ROX, compensando le differenze del percorso ottico tra le varie piattaforme di strumenti, rendendolo adatto a tutti gli strumenti qPCR. Inoltre, il prodotto impiega un metodo di modifica degli anticorpi e include additivi che migliorano l'amplificazione genica, migliorando significativamente le prestazioni di amplificazione del prodotto. Bilancia perfettamente le esigenze di alte prestazioni dei ricercatori nella comunità scientifica con i requisiti di alta efficienza delle imprese industriali.
Caratteristiche del prodotto
- Largo strumento compatibilità: IL premiscelato contiene UN specifico tipo Di riferimento tintura, eliminando IL Bisogno A regolare IL ROX concentrazione.
- Facile Tracciamento: IL blu premiscelato consente per diretto visualizzazione A distinguere se IL campione ha stato aggiunto, semplicemente di osservando IL colore.
- Alto Stabilità: IL sistema È preparato A camera temperatura, E IL misto sistema Potere Essere immagazzinato A 4°C per su A 24 ore senza Qualunque modifica In IL test risultati.
- Rapid Impostare: Compatibile con Entrambi standard E veloce programmi, consentendo IL quantitativo sperimentare A Essere completato In COME veloce COME 46 minuti.
- Eccellente Amplificazione Prestazione: Alto amplificazione efficienza, Bene specificità, capace Di rilevamento geni A IL separare copia numero.
Informazioni per l'ordinazione
| Posizionamento del prodotto | Nome del prodotto | Gatto# |
| Premiscela quantitativa universale ad alta sensibilità | 11184ES | |
| Tracciamento del colore Alta sensibilità Fluorescenza Quantitativo Premiscela | 11188ES | |
| 11189ES | ||
| 11190ES |
Prestazioni del prodotto
1. Elevata sensibilità: in grado di rilevare fino a una singola copia
Figura 1. Hieff UNICON™ Universal Blue premix può rilevare efficacemente un intervallo di quantità di template su 7 ordini di grandezza, con elevata efficienza di amplificazione e una buona relazione lineare entro un ampio intervallo lineare. Il template utilizzato era 2 µL di plasmide con una concentrazione da 10^6 a 10^0 copie, amplificando il gene umano IL23R.
2.Il rilevamento valutare E specificità Sono Bene: ampiamente applicabile A amplificatori con 30-70% GC contenuto
Figura 2. Hieff UNICON™ Universal Blue premix è ampiamente applicabile ad amplificatori con contenuto di GC del 30-70%, garantendo un tasso di rilevamento di specificità estremamente elevato. Utilizzando 2 µL di cDNA 293T come modello, sono state progettate 1000 coppie di primer per amplificatori da 200 bp (contenuto di GC% 30%-70%) con il software Primer5 e 27 di questi amplificatori sono stati amplificati in modo casuale.
3. Alta risoluzione: può distinguere accuratamente le differenze nella concentrazione del modello di 2 volte
Figura 3. UNICON™ di Hieff Premiscela universale blu può distinguere accuratamente differenze nella concentrazione del modello di 2 volte. Il modello utilizzato era una diluizione a gradiente di 2 volte di 2 µL di soluzione madre di cDNA 293T, amplificando il gene GAPDH.
4. Buona riproducibilità dei pozzetti duplicati: 90 pozzetti duplicati
Figura 4. Hieff UNICON™ La premiscela Universal Blue mostra un'eccellente riproducibilità, con curve di amplificazione di 90 pozzetti duplicati che mostrano un'elevata coincidenza e una deviazione standard dei valori Ct inferiore a 0,2. Utilizzando 1 µL di cDNA 293T come stampo, è stato amplificato il gene GAPDH.
5.Buona stabilità: la premiscela non subisce alterazioni nelle prestazioni di amplificazione anche dopo essere stata congelata e scongelata 50 volte
| Cicli di congelamento-scongelamento | 0 volte | 10 volte | 30 volte | 50 volte |
| Ct medio | 23.11 | 23.17 | 23.18 | 23.25 |
| ▲Ct | - | 0,06 | 0,07 | 0,14 |
Figura 5. Hieff UNICON™ Il premix Universal Blue non mostra alcun cambiamento nelle prestazioni di amplificazione dopo essere stato congelato e scongelato 50 volte. Utilizzando 1 µL di cDNA 293T come stampo, il gene C2orf68 è stato amplificato con premix che aveva subito diversi numeri di cicli di congelamento-scongelamento.
Cliente Fritorno
Fonte del campione: linea cellulare del cancro ovarico del topo ID8, HM1
Fonte del campione: RNA del tessuto adiposo epididimale del topo
Fonte del campione: RNA fogliare di Arabidopsis thaliana
Letteratura con elevato fattore di impatto pubblicata parzialmente utilizzando YEASEN qPCR Mix
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[4] Dong W, Zhu Y, Chang H, et al. Un modulo SHR-SCR specifica il destino delle cellule corticali dei legumi per consentire la nodulazione. Nature. 2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z.(SE=69,504)
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