図1. 逆転写プロセスの概略図

より高速で、より感度が高く、操作が簡単な RT-qPCR 分子診断試薬の追求は、現在の主要な開発トレンドとなっています。RT-qPCR プロセスの重要な原材料の 1 つとして、逆転写酵素は、より高速な逆転写速度、より高い合成収率、より優れた耐熱性を備えている必要があります。RT-qPCR により適した逆転写酵素を得るために、Yeasen は、M-MLV に基づく遺伝子組み換えにより、RNase H 活性が低く、熱安定性が高く、連続合成能力が強い Hifair ^TMシリーズの逆転写酵素を開発しました。

図2. 逆転写作用の模式図

Hifair ™逆転写酵素

Yeasen はさまざまな Hifair ^TM逆転写酵素を揃えており、酵素やプレミックスなど、さまざまな製品形態を提供できます。実際のニーズに応じて選択できます。次の表は、さまざまな Yeasen 逆転写酵素の特性と推奨用途を示しています。

表1 Hifair ^™逆転写酵素の選択ガイドライン

図3. Hifair ^TM V 逆転写酵素とブランド T* の逆転写酵素をそれぞれ 55℃ と 58℃ で 30 分間インキュベートし、残留酵素活性を検出しました。結果は、Hifair ^TM V 逆転写酵素は 58℃ で 30 分間インキュベートした後も 70% の活性を維持できることを示しており、これはブランド T* の活性よりもはるかに高いものでした。

2.RT-qPCRの検出率は他のブランドよりも優れていました。検出範囲は1 pg-1 μgであった。

図4. 293T細胞の全RNA 1 pg-1 μg（7勾配）をテンプレートとして使用し、Hifair ^TM VワンステップRT-gDNA消化SuperMix for qPCR（カタログ番号11142）、V*、T*を使用して逆転写を行いました。得られたcDNAはqPCRによって定量分析されました。結果は、11142ESの感度が1 pgに達する可能性があり、他のブランドの感度よりも優れていることを示しました。

Yeasenの逆転写酵素変異体ライブラリ

Yeasen は、ZymeEditor ^TMプラットフォームで逆転写酵素の進化を推進し続けています。これまでに、さまざまなアプリケーションで優れたパフォーマンスを発揮するさまざまな逆転写酵素変異体を選別し、多様なアプリケーション分野のさまざまな顧客グループのニーズに完全に対応できるようになりました。