蛍光定量PCRは、実験室の担当者による操作に高い精度が求められる非常に感度の高い実験です。そのため、qPCR実験プロセス中に、次のような問題に必然的に遭遇します。
I. 非実験的要因に関する問題
- 研究室には多数の qPCR 実験プロジェクトがあり、機器が占有されているため、慎重に準備された反応混合物を明確な廃棄方法がないまま残しています。
- 定量サンプル数が多く、サンプルを追加する作業が面倒であり、めまいによるサンプル追加エラーが発生し、実験結果が信頼できないリスクがあります。
- 機械の稼働時間が長く、実験の実行回数が限られており、実験タスクを定期的に計画どおりに完了することができません。
- 実験室の設備は新しい機器に置き換えられており、実験室には複数の定量機器があり、定量試薬は機器と互換性がありません。
II. 実験的要因によって制限される問題
低存在遺伝子の定量化の問題。複雑なプライマー設計とスクリーニング プロセス、感度、および複製ウェルの再現性...
YEASENはqPCR試薬の研究開発に注力するベテランメーカーとして、高性能qPCRプレミックスソリューションであるHieff UNICON™ユニバーサルブルーqPCR SYBRグリーンマスターミックスを細心の注意を払って開発しました。このソリューションは、前述の実験上の悩みを一挙に解決できます。この製品に使用されているユニバーサルROXは従来のROXに代わるもので、さまざまな機器プラットフォーム間の光路差を補正し、すべてのqPCR機器に適しています。さらに、この製品は抗体修飾法を採用し、遺伝子増幅を強化する添加剤を含んでいるため、製品の増幅性能が大幅に向上しています。科学界の研究者の高性能ニーズと産業企業の高効率要件を完璧にバランスさせています。
製品の特徴
- 幅広い機器互換性: プレミックスには特定のタイプの参照染料が含まれているため、ROX 濃度を調整する必要がありません。
- 簡単な追跡: 青いプレミックスにより、色を観察するだけでサンプルが追加されたかどうかを直接視覚的に判別できます。
- 高い安定性: システムは室温で調製され、混合システムはテスト結果に変化なく最大 24 時間 4°C で保存できます。
- 迅速なセットアップ: 標準プログラムと高速プログラムの両方に対応しており、定量実験をわずか 46 分で完了できます。
- 優れた増幅性能: 高い増幅効率、優れた特異性、単一コピー数での遺伝子の検出が可能。
注文情報
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製品の位置付け |
製品名 |
猫＃ |
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高感度ユニバーサル定量プレミックス |
11184ES |
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色追跡高感度蛍光定量プレミックス |
11188ES |
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11189ES |
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11190ES |
製品のパフォーマンス
1.高感度：1コピーまで検出可能
図 1. Hieff UNICON™ Universal Blue プレミックスは、7 桁にわたるテンプレート量の範囲を効果的に検出でき、高い増幅効率と、広い直線範囲内での良好な直線関係を実現しています。使用したテンプレートは、濃度 10^6 ～ 10^0 コピーのプラスミド 2 µL で、ヒト IL23R 遺伝子を増幅しています。
2.検出率と特異性は良好で、GC含有量が30～70%のアンプリマーに広く適用可能
図 2. Hieff UNICON™ Universal Blue プレミックスは、GC 含有量が 30 ～ 70% のアンプリマーに幅広く適用でき、極めて高い特異性検出率を保証します。2 µL の 293T cDNA をテンプレートとして使用し、Primer5 ソフトウェアを使用して 200 bp アンプリマー (GC% 含有量 30% ～ 70%) 用のプライマー 1000 組を設計し、これらのアンプリマーのうち 27 個をランダムに増幅しました。
3.高解像度：2倍のテンプレート濃度の違いを正確に区別できる
図 3. Hieff UNICON™ Universal Blue プレミックスは、 2 倍のテンプレート濃度の違いを正確に区別できます。使用したテンプレートは、GAPDH 遺伝子を増幅する 293T cDNA ストック溶液 2 µL の 2 倍勾配希釈液です。
4.重複ウェルの良好な再現性：90個の重複ウェル
図 4. Hieff UNICON™ Universal Blue プレミックスは優れた再現性を示し、90 個の重複ウェルの増幅曲線は高い一致を示し、Ct 値の標準偏差は 0.2 未満です。1 µL の 293T cDNA をテンプレートとして使用して、GAPDH 遺伝子を増幅しました。
5.優れた安定性：プレミックスは50回凍結・解凍しても増幅性能に影響しません。
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凍結融解サイクル |
0 回 |
10回 |
30回 |
50回 |
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平均CT |
23.11 |
23.17 |
23.18 |
23.25 |
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▲Ct |
- |
0.06 |
0.07 |
0.14 |
図 5. Hieff UNICON™ Universal Blue プレミックスは、50 回の凍結融解後も増幅性能に変化が見られません。1 µL の 293T cDNA をテンプレートとして使用し、異なる回数の凍結融解サイクルを経たプレミックスで C2orf68 遺伝子を増幅しました。
顧客フィードバック
サンプルソース: マウス卵巣癌細胞株 ID8、HM1
サンプルソース: マウス精巣上体脂肪RNA
サンプルソース: シロイヌナズナの葉のRNA
YEASEN qPCR Mixを使用して部分的に出版された、インパクトファクターの高い文献
[1] Li Y、Wang D、Ping X、et al。局所温熱療法は白色脂肪の褐色化を誘導し、肥満を治療する。Cell. 2022;185(6):949-966.e19.doi:10.1016/j.cell.2022.02.004.( IF=66.850 )
[2] Seki T, Yang Y, Sun X, et al. 寒冷による全身代謝の変化による褐色脂肪を介した腫瘍抑制. Nature. 2022;608(7922):421-428. doi:10.1038/s41586-022-05030-3. ( IF=69.504 )
[3] Chen P, Wang W, Liu R, et al. 嗅覚感覚経験は神経細胞IGF1を介して神経膠腫形成を制御する。Nature. 2022;606(7914):550-556. doi:10.1038/s41586-022-04719-9.( IF=69.504 )
[4] Dong W、Zhu Y、Chang H、et al。SHR-SCRモジュールはマメ科植物の皮質細胞の運命を特定し、根粒形成を可能にする。Nature。2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z.( IF=69.504 )
[5] Lu XY、Shi XJ、Hu A、et al。摂食はmTORC1-USP20-HMGCR軸を介してコレステロール生合成を誘導する。Nature。2020;588(7838):479-484。doi:10.1038/s41586-020-2928-y。( IF=69.504 )
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[7] Liu S, Hua Y, Wang J, et al. RNAポリメラーゼIIIは相同組換えによるDNA二本鎖切断の修復に必要である。Cell. 2021;184(5):1314-1329.e10. doi:10.1016/j.cell.2021.01.048.( IF=66.850 )
[8] Liu CX、Li X、Nan F、et al。環状RNAの構造と分解は自然免疫におけるPKR活性化を制御する。Cell。2019;177(4):865-880.e21. doi:10.1016/j.cell.2019.03.046.( IF=66.850 )
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