그림 1 DSS 급성 대장염 절편의 HE 염색 결과

2.제브라피쉬 모델링

1) 다니오 배아는 메틸블루가 포함된 E3 배아배지에서 28.5℃에서 1 dpf까지 배양하였다.

2) 0.5% DSS 음용수를 E3 배지로 구성한 후 0.22 μm 필터 멤브레인을 통해 여과하였습니다.

3) 다니오에게는 3 dpf에서 6 dpf까지 0.5% DSS를 처리했습니다.

4) 실험 결과: 0.5% DSS 약물 치료 모두에서 다니오 간색이 어두워지고 염증 스트레스가 나타났습니다.

그림 2 DSS는 다니오 간에서 염증 반응을 유발합니다.

3.돼지 성형

1) 생후 4~5일 된 요크셔 돼지 새끼, 실험군: DSS 관류, 대조군: 식염수 관류

2) 돼지 한 마리당 DSS 1.25g/kg을 매일 섭취하고 5일간 주입함

3) 실험 결과: DSS 주입 후, 실험군의 혈장 D-만니톨 흡수율이 대조군보다 유의하게 높았는데, 이는 돼지에서 육안으로 확인 가능한 장염 증상이 나타났다는 것을 의미한다.

그림 3 DSS는 대조군보다 돼지 새끼에서 더 높은 농도의 D-만니톨을 유도합니다.

4.초파리 모델링

1) 5~10일 된 암컷 초파리를 5% 자당 용액으로 적신 3.75cm 크로마토그래피지(Fisher) 공급 배지가 들어 있는 2.5 × 2.5 × 1cm 바이알이 들어 있는 빈 바이알에 넣었습니다.

2) 다른 성분을 함유한 배지는 5% 자당용액을 이용하여 별도로 제조하였으며, 그 종류에는 각각 3% DSS와 25 μg/ml 블레오마이신이 포함되었다.

3) 크로마토그래피 종이가 들어 있는 플라스크에 초파리를 넣고 29°C에서 3일간 배양했으며, 이 기간 동안 살아남은 초파리를 매일 새로운 배지가 들어 있는 빈 플라스크로 옮겼습니다.

4) 실험 결과: DSS는 치사적 기능을 가지고 있으며 DSS는 ISC 전구세포의 증식을 유도합니다.

그림 4 DSS는 초파리에서 ISC 전구세포의 증식을 유도합니다.

IV. 모델링의 성공 여부를 어떻게 평가하나요?

1. 질병활동지수(DAI점수)

체중, 대변의 굳기, 대변의 잠혈 등 세 가지 측면을 평가하고 점수를 매겼으며, DAI 점수는 세 가지 지표의 합계였습니다.

표 2 DAI 채점 규칙

점수(학생의 일하다)	체중감량률	대변 ​​점도	대변 ​​잠혈
0	0	정상	부정
1	1-5%	부드러운 대변	옅은 파란색
2	5-10%	점액성 대변	파란색(색상)
3	10-20%	묽고 액체 같은 대변	딥블루
4	>20%	/	육안으로 보면 피가 섞인 대변

2. 조직학적 변화의 점수 매기기

조직학적 변화는 위의 합계로 평가되었고, 급성 대장염 모델에서는 림프절 형성은 평가되지 않았습니다. 조직학적 분석의 표준 방법은 HE 염색(Cat. NO: 60524ES60)이었습니다.

표 3 조직학적 변화 점수

점수(학생의 작업의) )	궤양(숫자)	상피세포 변화	염증성 침윤	림프절(번호)
0	0	정상	없음	없음
1	1	컵 모양의 세포가 없음	주변 암부 침투	1
2	2	컵형 세포의 대량 삭제	점막 근육층 침투	2
3	3	지하 동굴	점막 근육층의 일반화된 침윤 점막의 두꺼워짐	3
4	>3	큰 결손 또는 다발성 지하굴의 재생	점막하 침윤	>3

3.대장 길이

급성 대장염 모델에서는 8일째에 대장 길이가 짧아지는 현상이 발견되었으며, 만성 대장염 모델에서는 더욱 두드러졌습니다.

4.요약

DSS UC 동물 모델 구축은 모델링 조건을 느끼기 위한 사전 테스트가 선행되어야 하며, 각 그룹에서 8-10개의 샘플로 사전 테스트를 실시하고 대조군을 설정하는 것이 좋습니다. 일반적으로 체중 감소, 느슨한 대변, 설사, 혈변 또는 대변 잠혈, 궤양이 나타나면 DSS 약물이 효과적이고 모델링이 성공한 것으로 간주할 수 있습니다.

VI.Yeasen DSS 모델링 사례 연구

Yeasen DSS(Cat. No: 60316ES, MW:36000~50000)는 UC 모델 구축에 널리 사용됩니다. Yeasen

DSS는 수입 브랜드와 비교 가능한 결과를 내는 UC 모델을 성공적으로 구축할 수 있습니다.

목적: 다양한 제조업체에서 생산한 DSS로 유발된 급성 대장염에 걸린 쥐의 체중 변화 정도를 비교합니다.

마우스 유형: BALB/c 마우스

모델링 프로토콜: DSS 농도 2%, 1주일 동안 연속 자유 흐름 음수.

결론: Yeasen DSS를 투여한 쥐의 체중 감소 추세는 수입 브랜드와 일치했습니다.

그리고 우리는 급성 대장염 모델링 시간이 주로 약 7일에 집중되어 있고, 그 효과가 매우 크다는 것을 발견했습니다. 다음 표는 일부 고객의 데이터 피드백입니다.

표 4 DSS를 사용한 다양한 유형의 장염 모델링

곰팡이	주형	몰딩 솔루션	성형 결과	추천사
급성 대장염	BALB/c 마우스, 암컷, 6-8주, 25g	7일 동안 지속적으로 자유롭게 소비할 수 있는 3%-5% DSS	대장 길이가 짧아지고 HE 염색이 나타나며 염증이 뚜렷한 5일차 진료 결과	빠른 모델링 속도와 짧은 시간. 급성 대장염의 특성에 부합 모델
	C57BL/6 마우스, 수컷, 8주, 20g	3%-5% DSS를 경구투여, 지속투여	5일차 현재, 대장 길이가 짧아짐, 체중 감소, 대변에 혈액이 섞임, 설사	높은 모델링 속도와 짧은 시간. 급성 대장염 모델 특성과 일치
만성 대장염	C57BL/6 마우스, 수컷, 8주, 22g	1-2% DSS를 경구투여, 지속투여	40일차 현재, 대장 길이가 짧아짐, 체중 감소, 대변에 혈액이 섞임, 설사	높은 모델링 비율. 만성 대장염 모델 특성과 일치
대장암	C57BL/6 마우스, 수컷, 8주, 21g	1%-2% DSS 자유롭게 3주 동안 5일간 이용 가능	14주 현재, 대장 길이 단축, 체중 감소, HE 염색, 염증 분명한	높은 모델링 비율. 대장암 모델 특성과 일치

제품 특징:

1. 증상은 인간 UC의 증상과 매우 유사하여 대장염의 메커니즘을 연구하고 약력학을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.
2. 고형물 형성율 : 자유음용 DSS 수용액, 간편하고 쉬움,
3. 다양한 대장염 모델을 구축할 수 있습니다: 급성 대장염, 만성 대장염, AOM과 결합하여 대장염 관련 암(CAC) 모델을 구축할 수도 있습니다.
4. 쥐, 래트, 얼룩말, 돼지, 초파리 등 다양한 종류의 동물 모델링에 적합합니다.
5. 높은 안전성: DSS는 자연 생태계에 의해 분해될 수 있어 환경에 안전합니다. 6, 높은 순도: 높은 순도(98%), 유황 함량 17-19%;

VII. 자주 묻는 질문

급성 DSS 대장염 모델이든 만성 DSS 대장염 모델이든, 장염의 심각성과 성공률은 마우스 종(다른 유전적 배경), DSS 농도, 투여 주기에 관련이 있습니다.

표 5 DSS 대장염 모델링에 대한 자주 묻는 질문

발생 가능한 문제	가능한 원인	제안된 솔루션
쥐에서의 높은 치사율	DSS 농도가 너무 높습니다	DSS 투여 농도 감소
장염 증상이 없거나 거의 없는 쥐	DSS 농도가 너무 낮습니다	DSS 투여 농도 증가, 사이클 간격 단축(10-14일)
동일한 쥐 그룹에서 장염 증상은 매우 다양했습니다.	막힌 캡	매일 쥐의 물병을 ​​확인하세요

VIII.제품 주문

제품 이름	카탈로그 번호	사양
덱스트란 황산나트륨염(DSS) 대장염 모델링을 위한 덱스트란 나트륨 설페이트 MW:36000~50000	60316ES25	25g
덱스트란 황산나트륨염(DSS) 대장염 모델링을 위한 덱스트란 나트륨 설페이트 MW:36000~50000	60316ES60	100g
덱스트란 황산나트륨염(DSS) 대장염 모델링을 위한 덱스트란 나트륨 설페이트 MW:36000~50000	60316ES76	500g
덱스트란 황산나트륨염(DSS) 대장염 모델링을 위한 덱스트란 나트륨 설페이트 MW:36000~50000	60316ES80	1kg
헤마톡실린 및 에오신 염색 키트 헤마톡실린 에오신(H&E) 염색 키트	60524ES60	2 x 100ml

동물에서의 급성 췌장염 모델링

케룰레인은 위, 담관 및 췌장 분비를 자극하는 콜레시스토키닌(CCK)과 기능 및 구성이 유사한 위 조절 분자입니다. Rainfrogin은 세포간 접착 분자(ICAM-1)와 같은 NF-κB 상향 조절 단백질, NADPH 산화효소 및 Janus 키나제와 같은 염증 관련 요인을 매개로 하는 신호 전달 경로를 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 또한 쥐, 생쥐, 개 및 시리아 햄스터에서 급성 췌장염(AP) 모델을 확립하는 데 성공적으로 사용되었습니다.

성형의 장점:

1. 쉬운 조작
2. 낮은 비용
3. 빠른 프로토타입 제작
4. 다중 모드의 약물 전달

모델링 메커니즘:

1. 세포 내 NF-KB를 자극하여 췌장 폐포 세포에서 세포 간 접착 분자(ICAM-1) 발현을 상향 조절합니다. 표면 ICAM-1은 호중구의 폐포 세포 접착을 촉진하여 췌장 염증 효과를 향상시킵니다.
2. 소화 효소 분비의 조절 장애와 세포질 공포화를 유도하여 폐포 세포의 죽음과 췌장 부종을 유발하여 췌장염을 유발합니다.
3. 염증을 촉진하는 요인의 활성화.

관련 시약

예센은 10펩타이드 분자 형태, 순도 ≥97% (HPLC) 레인 프로긴을 제공합니다. 성형 효율이 높고 가격이 저렴하며 즉시 공급됩니다.

제품 이름	카탈로그 번호	사양
케룰레인	60321ES03	1mg(1밀리그램)
DMSO 디메틸 설폭사이드(세포 배양 등급)	60313ES60	100ml

당뇨병 질병 모델링

스트렙토조신(STZ)은 특정 유형의 스트렙토마이세스 균류인 아우레오바시디움 풀룰란스에서 생산되는 항종양 항생제이며 합성도 가능합니다. 종종 췌장암 치료에 사용됩니다. 동시에 STZ는 특정 동물 종의 췌장 섬 β 세포에 선택적으로 파괴적인 효과를 미치며 많은 동물에서 당뇨병을 유발할 수 있으며 일반적으로 쥐와 생쥐를 사용하여 동물 모델을 만듭니다. 항백혈병, DNA 메틸화 및 항신염에서 널리 연구되었습니다.

1.1 동물의 준비

수컷 동물을 사용해 보세요. 암컷은 모델링 효율성에 영향을 미치는 호르몬을 함유하고 있습니다. 일부 연구에 따르면 암컷 동물은 모델링 비율이 낮고 수컷보다 사망률이 높을 수 있으며, 특히 1형의 경우 그렇습니다.

1형 당뇨병(Type I diabetes)은 일반적으로 체중에 따라 선택할 수 있으며, 쥐의 경우 170-200g, 생쥐의 경우 17-22g을 권장하며, 1~2주 적응 영양 공급 후 공복 상태에서 STZ를 주사하면 모델링 속도가 비교적 이상적입니다.

2형 당뇨병의 경우, 쥐(예: SD/Wistar)는 생후 4-5주, 체중 90-100g에 선발하여 4-6주 동안 고지방(고당) 사료를 섭취시켜 체중이 약 240-280g이 되도록 합니다. 생쥐(예: C57/ICR/Kunming 생쥐)는 생후 4-5주, 체중 16-20g에 선발하여 4-6주 동안 고지방(고당) 사료를 섭취시켜 체중이 약 30-35g이 되도록 합니다. 새로 구입한 동물이나 먹이 환경을 바꾸는 동물은 고지방(고당) 사료로 전환하기 위해 적절한 연령/체중을 선택하기 전에 1주일 동안 일반 사료를 섭취시켜야 합니다. 마우스(예: C57/ICR/Kunming 마우스)의 경우, 4-5주령, 체중 16-20g을 선택하고, 4-6주 동안 고지방(고당) 사료를 먹여 체중이 약 30-35g이 되도록 합니다. 새로 구입한 동물이나 먹이 환경이 바뀐 경우, 1주일 동안 동물에게 정상적인 사료를 적응적으로 먹인 다음, 적절한 주별 연령/체중 동물을 선택하고 고지방, 고당 사료로 전환해야 합니다. 모델링 성공 측면에서, 쥐의 경우 SD가 권장되고 마우스의 경우 C57이 권장됩니다.

1.2 성형 전 급지

모델링 전 사료 공급, 1형 당뇨병 모델은 비교적 빠르며, 보통 쥐는 정상 사료를 2주간 적응적으로 섭취한 후 모델링을 시작할 수 있다. 2형 당뇨병 모델: 고지방 식이 유도와 소량의 STZ 투여. 모델링 전에 고지방(고당분) 사료를 공급하였는데, 이로 인해 인슐린 저항성이 유도되었다.

1.3 시약의 준비

① 고지방(고당) 사료

고지방(고당) 사료성분 : 자당 10%, 라드 10%, 콜레스테롤 5% 함유

고지방, 고당분 사료는 기본 쥐 사료에 자당, 농축 라드, 달걀 노른자를 다음의 질량 비율로 결합하여 만들었습니다: 라드 18%, 자당 20%, 달걀 노른자 3%, 기본 사료 59%.

② STZ 용매인 구연산나트륨 완충액의 제조

액체 A 및 액체 B의 제조: 구연산(FW:210.14) 2.1g을 달아 100mL의 이중 증류수에 넣어 액체 A를 만든다. 구연산나트륨(FW:294.10) 2.94g을 달아 100mL의 이중 증류수에 넣어 액체 B를 만든다.

구연산나트륨 완충액 제조: A액과 B액을 일정 비율(1:1.32 또는 1:1)로 혼합한 후, pH 미터로 pH값을 측정하여 pH값을 4.2~4.5, 즉 필요한 구연산나트륨 완충액으로 조절한다.

1.4 주사 전 준비

STZ 주사를 준비하기 전에, STZ 동결 건조 분말을 건조하고 멸균된 바이알에 넣고 외부를 알루미늄 호일이나 주석 호일로 포장한 다음, 시트르산 나트륨 완충액이 담긴 얼음 욕조에서 미리 냉각한 후 백업을 위해 동물실로 가져갔습니다.

참고 사항: STZ 동결 건조 분말을 -20°C 냉장고에서 꺼낸 후, 약 10분 동안 실온에서 건조하고 빛을 차단하여 완전히 해동되도록 합니다(매우 중요).

1.5 주사액의 제조

쥐의 체중을 측정하고, 밤새 금식(물 없음)한 후 혈당 농도를 측정했습니다. 쥐를 그룹화하여 동물 수와 주사할 용량에 따라 STZ 주사를 준비했습니다. STZ를 1% 농도(w/V)로 녹이고, 여과하고 살균합니다. STZ가 완전히 녹았다는 것을 명심하세요.

주목:

①STZ는 불안정하고 불활성화되기 쉬우며, 급속 칭량 후 남은 시약은 여전히 ​​건조 및 빛 차단이 필요하며 건조한 알루미늄 호일(또는 주석 호일) 종이로 포장하는 것이 좋습니다.

②주사에 능숙하지 않은 경우, STZ를 한번에 녹이지 말고, 숙련도에 따라 10마리/군, 15마리/군 등 여러 군으로 나누어 녹이는 것이 좋습니다.

③STZ를 미리 계량하여 동물군 분류에 필요한 양만큼 분주할 수도 있습니다.

1.6 주입

동물의 공복 체중에 따라 복강내 또는 꼬리정맥에 주사한다. 주사 조작 기술이 능숙하지 않으면 두 그룹을 번갈아 주사해야 하며, 주사는 30분 이내에 완료해야 한다. 참고: 대부분의 주사는 빠른 주사가 필요하다.

주목:

1형 당뇨병 모델: 쥐 투여량 70-65mg/kg

2형 당뇨 모델: 1~2개월 동안 고당, 고지방을 섭취한 쥐에게 25~40mg/kg의 용량으로 STZ를 투여했습니다.

1.7 주입 후

STZ를 주입한 후, 동물에게 충분한 물과 사료(당뇨 쥐의 기본적인 생활 특성)를 주어야 하며, 침구는 매일 교체하여 케이지를 건조하게 유지해야 합니다. 먹이를 줄 때는 강한 햇빛을 피하십시오. 가능한 한 자주 살균하십시오.

참고: STZ 모델링 후, 겉보기 혈당 수치의 변동은 3가지 시간적 단계를 보입니다. 일과성 고혈당(1- 2시간), 일과성 저혈당(6-10시간), 지속적 고혈당(>72시간). 인슐린과 포도당은 적절히 보충해야 합니다.

2. STZ 유도 당뇨병 모델링의 모델링 효과 평가를 위한 지표

다음 지표는 대조군과 비교하여 계산되었습니다.

1. 일반적 지표: 과도한 음주, 과도한 식사 및 과도한 배뇨 현상, 체중 감소
2. 기타 지표: 공복 혈당, 공복 혈청 인슐린 수치, 혈청 인슐린 수치, 인슐린 민감도, 포도당 내성 등.
3. 혈청 생화학적 지표: T-Cho, TG, HDL-C, LDL-C, CR, BUN, Alt 등.
4. 병리학적 슬라이드: 췌장의 조직병리학적 슬라이드

3. STZ 유도 당뇨 모델 실패 이유에 대한 설명

1. 1. STZ의 품질이 핵심이며, 모델링을 위한 STZ 순도는 98% 이상이어야 합니다(HPLC 테스트).
2. 2. STZ 실패: 건조하게 보관해야 하며 습기를 피하십시오. 분말을 장시간 실온에 두지 마십시오. 용해된 STZ는 매우 불안정하며 중성에서 반감기는 15분입니다. 산성 pH로 STZ를 용해하는 데 주의하십시오. 바람직하게는 얼음 욕조에서 용해하십시오.
3. 복강내 주사가 장이나 다른 장기에 주사되는지 여부.

모델이 표준에 미치지 못하는 경우, 모델이 표준에 미치지 못하는 경우 3일 더 재주입하는 것이 좋습니다.

4. STZ에 의한 마우스/래트의 높은 사망률의 원인에 대한 설명

4.1. 쥐의 무게가 너무 가볍습니다.

4.2. 충분한 식수가 보장되어야 합니다(식수가 부족하면 쥐가 쉽게 죽을 수 있습니다).

4.3. 고혈당과 저혈당은 쥐를 죽일 수 있으므로, 쥐를 죽이는 것을 피하려면 인슐린이나 일시적인 설탕 보충을 통해 주사할 수 있습니다. 두 가지 방법이 있습니다. ① 일반적으로 고혈당입니다. 인슐린 보충 방법은 중간 작용 인슐린을 보충합니다. 예를 들어, Novolin N 또는 NPH(중성 어류 단백질 아연 인슐린)를 2~3단위씩 투여하면 3~5일 후에 쥐의 일반적인 사망률이 낮아집니다. ② 설탕 보충 방법은 쥐를 금식시킨 후 주사가 저혈당 상태에 있었고, 4시간 후에 20% 포도당을 복강 내 주사하면 저혈당 주사로 인한 쥐의 죽음을 피할 수 있습니다.

4.4. 동물들이 서로를 죽이는 것을 방지합니다. 음식이 부족하고 물 공급이 부족하면 서로를 찢어발기고 같은 종류를 갉아먹기 때문에 음식과 물은 충분한 양으로 공급해야 하며, 바람직하게는 두 가지 방법으로 공급해야 합니다.

4.5.감염 예방. 당뇨 쥐는 소변을 많이 보고, 침구가 축축하고 자주 갈아줘야 하므로 당뇨 쥐는 다른 쥐보다 감염되기 쉽고, 특히 요로감염과 복부감염이 많다. 복강내 주사, 피하 주사, 혈당 측정 등 침습적 수술 전후에는 살균에 주의해야 한다. 예를 들어, 테트라사이클린(또는 겐타마이신 안과 연고)을 국소적으로 바르면 혈당 측정 후 감염을 예방할 수 있다.

5. 당뇨병 모델링에 영향을 미치는 요인

당뇨병 질환 모델링의 영향 요인에는 STZ 모델링 시약의 품질, 동물 상태 및 투여 방법이 포함됩니다. 그 중 시약의 주요 특성은 순도, 안정성, 용해도 특성 등입니다. 동물 상태는 주로 유전적 배경, 남성 및 여성, 성별, 체중, 먹이 환경, 식이 구조 등을 포함하며 투여 모드에는 투여 시간, 투여 간격 및 투여 경로가 포함됩니다. 차별화된 요소는 차별화된 모델링 효과를 가져옵니다.

6. STZ 모델링 방법론 아이디어 정리

영향 요인을 표준화하면 모델링 목적과 모델링 안정성을 달성할 수 있습니다. 이론적으로 모든 동물 모델링 실험에는 사전 실험이 필요합니다.

STZ 유도 당뇨병 모델의 경우 STZ의 투여량은 사전 테스트 결과를 참조해야 하며, 문헌이나 다른 사람의 투여량을 맹목적으로 따르지 말고 직접 사용해야 합니다. 쥐의 평균 체중과 금식(저혈당 상태) 저항성, 금식 시간, 주사 시기, 이전 수유 과정, 포도당 측정 시간 등이 다르기 때문에 사전 테스트를 통해 자신의 실험 쥐에 따라 투여량 측정을 결정하는 것이 가장 과학적입니다. 가장 과학적인 방법은 사전 테스트를 통해 약물의 투여량을 결정하는 것입니다.

7. 높은 모델링 성공률 STZ 사용 지침

STZ의 보관, 용해, 분주 및 기타 사용상 주의사항은 해당 시약의 공식 홈페이지를 참조하세요.

8.제품

높은 성공률: 순도 ≥98% (HPLC 측정); 품질 안정, 비용 효율성, 즉시 공급, 판매 후 보증.

제품 이름	카탈로그 번호	사양
스트렙토조신	60256ES60/76	100/500mg
스트렙토조신	60256ES80	1g
구연산, 일수화물 구연산 일수화물	60347ES25	25g
구연산 삼나트륨염, 이수화물	60348ES25	25g

(STZ성형의 활용에 대한 자세한 내용은 예센 홈페이지 특집기사를 확인해주세요)

제품 라인 게시된 기사(일부)

• Li, , Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. 장내 공생체 유래 발레르산은 방사선 손상으로부터 보호합니다. Gut Microbes,.2020.1-18. IF=10.245
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류마티스 관절염 모델링

류마티스 관절염(RA)은 지속적인 활막염과 전신 염증을 특징으로 하는 만성 염증성 관절 질환으로, 뼈와 연골이 침식되어 결국 관절이 강직되고 변형될 수 있습니다.

프로인트 보조제는 20세기 40년대에 쥘스 프로인트가 발명한 것으로, 항원 수용액과 오일을 같은 양으로 섞은 후 유화제를 첨가하여 유중수형으로 만든 항원 에멀전으로, 동물 실험에서 가장 흔히 쓰이는 보조제이다. 프로인트 보조제는 결핵균을 함유한 Complete Freund's Adjuvant (CFA)와 결핵균을 함유하지 않은 Incomplete Freund's Adjuvant (IFA)로 나뉘며, 주로 마우스에서 콜라겐 유도 관절염 CIA 모델과 보조제 유도 관절염 AA 모델을 유도하는 데 사용된다.

1. 콜라겐 유도 관절염(CIA) 모델링 단계(참고용)

1) 관련 시약을 준비하고, 실험군과 대조군 설정에 주의하세요.

2) 소 2형 콜라겐(CII.)을 4°C에서 하룻밤 동안 2 mg/mL의 농도로 빙초산 용액에 용해시켰습니다.

3) 프로인트 불완전 보조제에 불활성화된 결핵균을 2-5 mg/mL 농도로 보충하여 프로인트 완전 보조제를 제조하였다. Yisheng Biotech에서 제공한 60718ES 프로인트 완전 보조제에서 결핵균의 농도는 10 mg/mL 미만이었다.

4) 소 콜라겐 타입 2(CII.) 아세트산 용액을 프로인트 완전 보조제와 동일한 양으로 혼합하여 유화시킨다.

5) 각 실험 마우스의 등에 0.1-0.2 mL을 피하 주사합니다.

6) 3주 후, 동일량의 펀드 불완전 보조제를 소 콜라겐 2형(CII.) 아세트산 용액에 혼합하여 유화시키고, 각 마우스의 꼬리 바닥 부분 피하 주사로 총 0.1-0.2 mL을 주입하였다.

7) 병리학적 검사: 실험군과 대조군의 쥐를 꺼내고, 4% 포름알데히드를 48시간 이상 고정하고, 5% 질산염을 2시간 동안 탈회시키고, 크실렌을 침투시키고, 파라핀 포매했습니다. 절편을 만들고, HE 염색을 하고, 통상적인 광학 현미경으로 관찰했습니다.

2. 보조제 유도 관절염(AA) 모델링 단계(참조용)

1) 관련 시약을 준비하고, 실험군과 대조군 설정에 주의하세요.

2) 관찰 기록: 일반적으로 2차 면역 후 7~12일 후에 80% 이상의 마우스가 관절염 증상을 보인다. 마우스의 관절 부위의 발적, 부기, 활동성에 따라 임상 증상을 등급화하고, 관찰 기록은 실험 전과 실험 후 각각 3일, 5일, 7일, 12일에 관찰하였으며 등급 분류 기준은 다음과 같다.

등급 지수	징후
0	활동은 정상이며 홍반 및 부기 징후가 없습니다.
1	정상적인 활동, 피부 발적, 그러나 심각한 부기는 없음
2	활동에 약간의 영향을 받으며 발과 발 또는 무릎 관절에 발적과 부기가 나타납니다.
3	활동에 영향을 미치고 발, 발가락 또는 무릎이 약간 변형되고 붉어지고 부어 오릅니다.
4	발가락이나 무릎, 발톱, 발가락 또는 무릎의 움직임 장애, 심한 발적 및 붓기, 경직 또는 기형

3) 마우스 측정 : 실험 전후의 마우스 뒷다리 관절의 부피는 마우스 발톱발 부피 측정기를 이용하여 측정하였고, 각 마우스의 뒷다리 무릎 관절의 부피는 약 5mm 이하로 측정하여 3회 반복 측정한 후 평균값을 기록하였으며, 3일에 한 번씩 시험을 실시하였다.

4) 병리학적 검사: 실험군과 대조군의 쥐를 꺼내고, 4% 포름알데히드를 48시간 이상 고정하고, 5% 질산염을 2시간 동안 탈회시키고, 크실렌을 침투시키고, 파라핀을 포매했습니다. 절편을 만들고, HE 염색을 하고, 통상적인 광학 현미경으로 관찰했습니다.

3. 자주 묻는 질문

발생할 수 있는 문제	답변
60718ES 프로인트 완전 보조제(CFA)와 60719ES 프로인트 불완전 보조제(IFA)의 차이점은 무엇입니까?	프로인트 완전 보조제(CFA)에는 열로 죽고 불활성화된 결핵균이 포함되어 있어 강력한 면역 반응을 자극합니다. 불완전 프로인트 불완전 보조제(IFA)에는 결핵균이 없으며 약한 면역 반응을 자극합니다.
60718ES 프로인트 완전 면역 보조제(CFA)에 들어 있는 BCG의 구체적인 양은 얼마입니까?	BCG 함량이 10mg/mL 미만입니다.
류마티스 관절염 동물 모델링에 사용할 때, 프로인트 완전 보조제(CFA)와 프로인트 불완전 보조제(IFA)를 어떻게 선택해야 합니까?	쥐는 일반적으로 생쥐보다 더 민감하므로, 생쥐는 일반적으로 CFA로 치료하며, 쥐는 IFA로 치료할 수도 있지만, CFA를 사용하는 것이 더 좋습니다.

관련상품 추천

나누다	제품 이름	카탈로그 번호	사양
류마티스 관절염 모델	완전 프로인트 보조제(CFA)	60718ES	10ml/5x10ml
	불완전 프로인트 보조제(IFA)	60719ES	10ml/5x10ml

고혈압 모델링

고혈압은 전신 동맥 혈압(수축기 및/또는 이완기 혈압)이 증가하는 것을 특징으로 하며 , 전신 동맥 혈압(수축기 혈압 ≥ 140 mmHg 및/또는 이완기 혈압 ≥90 mmHg)으로 나타나며, 가장 흔한 만성 질환이며 심혈관 및 뇌혈관 질환의 가장 중요한 위험 요소이며, 종종 심장, 신장, 뇌 및 기타 장기에 기능적 또는 유기적 손상이 있는 임상 증후군을 동반합니다. 고혈압의 예방 및 치료에 대한 연구는 매우 실질적인 의의가 있으며, 동물 고혈압 모델의 확립은 고혈압 연구의 중요한 부분입니다.

동물 고혈압 모델은 유전적으로 연관된 모델과 비유전적으로 연관된 모델로 나눌 수 있습니다. 유전적으로 연관된 모델에는 유전적 및 유전자 조작 동물 모델이 포함되는 반면 비유전적으로 연관된 모델은 일반적으로 환경적, 수술적 및 약물적 요인에 의해 유도된 모델을 말합니다. 모델링의 연구 대상에는 일반적으로 돼지, 양, 토끼, 개, 생쥐 및 쥐 등이 포함되지만 대부분의 실험은 생쥐와 쥐를 모델로 하고 있으며 일반적으로 사용되는 동물 고혈압 모델은 자발성 고혈압 쥐의 SHR 모델과 약물 유도 고혈압 모델입니다.

1. 동물 유전성 고혈압 모델

1.1 자발적 고혈압 쥐의 SHR 모델

자발적 고혈압 쥐, 즉 SHR 쥐는 고혈압 발병률이 거의 100%이며 가장 널리 사용되는 동물 모델입니다. 정상 쥐의 수축기 혈압은 110-120mmHg이고 SHR 쥐의 혈압은 생후 4-6주 후에 증가하기 시작하며 번식 후 혈압은 200mmHg 이상으로 높습니다.

장점: 고혈압의 발병률이 높고, 질병의 경과가 짧으며, 발병 시 표적 장기의 병리학적 변화를 관찰할 수 있습니다.

단점: 번식 주기가 길고, 먹이 조건에 특정한 요구가 있으며, 가격이 일반 쥐보다 약간 비싼 편입니다.

1.2 뇌졸중 발생성 자발성 고혈압 쥐의 SHRsp 모델

뇌졸중에 걸리기 쉬운 자발성 고혈압 쥐, 즉 SHRsp 쥐는 고혈압 발병률이 거의 100%이고 뇌졸중 발병률은 거의 80%입니다. SHRsp 쥐의 혈압은 생후 4~6주 후에 증가하기 시작했으며 생후 10~15주 후에는 200mmHg에 도달할 수 있습니다.

장점: 고혈압 발생률은 100%에 가깝고, 뇌졸중 발생률은 80%로 뇌졸중 연구에 이상적인 동물 모델입니다.

단점: 재배주기가 길고, 유전자조작이 번거롭고, 돌연변이가 일어나기 쉽고, 파손되기 쉽다.

2. 약물 유발 고혈압 모델

2.1 앙지오텐신 II (AngII.) 유도

2.1.1 실험 방법 (참고용)

8-12주령 수컷 마우스에 삼투 펌프 피하 주사로 앙지오텐신 II와 생리식염수를 주입하였고, AngII의 투여량은 일반적으로 2-4주 동안 100 ng/(kg·min)이었다. 투여 시간은 실제 상황에 따라 단축 또는 연장될 수 있다.

2.1.2 실험 사진(문헌에서 발췌)

적용 1: 앙지오텐신 II. 28일 동안 NaCl 용액을 섭취한 쥐의 경우, 실험군은 대조군에 비해 혈압이 상당히 증가했습니다.

그림 5. 생쥐의 혈압과 심박수의 변화 (A는 수축기 혈압, B는 평균 혈압, C는 이완기 혈압, D는 심박수)

2.2 데옥시코르티코스테론 아세테이트(DOCA) 유도

데옥시코르티코스테론 아세테이트(DOCA)는 레닌-안지오텐신 시스템을 억제하여 혈장 레닌 활동을 낮추고 그로 인해 혈압을 상승시킵니다. 일반적으로 DOCA 지속 방출 펌프를 피하 이식하거나 DOCA를 주사한 후 NaCl 용액을 첨가하여 고혈압을 유발합니다.

본 연구는 주로 고혈압에서의 레닌-안지오텐신계(RAS) 및 수분과 나트륨 대사 연구에 적용 가능하며, 이 모델은 혈압을 안정적으로 상승시킬 수 있고 방법이 간단합니다.

2.2.1 실험 방법 (참고용)

250~275 g의 정상 수컷 쥐의 좌측 신장을 절제하고, DOCA와 실리카겔로 만든 고무 매체를 쥐 양쪽 어깨뼈 사이 피부 아래에 놓거나 좌측 신장을 제거한 후 DOCA를 50 mg/(kg·d)/일로 피하 주사하였으며, DOCA 쥐는 수유 중에 1% NaCl 용액을 마셔야 했고, 수술 후 3~5주 후에 쥐의 혈압을 측정하였다.

2.2.2 실험 사진(문헌에서 발췌)

응용 1: 편측 신장을 제거한 후 DOCA를 첨가한 결과 대조군 쥐의 혈압은 비교적 일정했으나 실험군 쥐의 혈압이 현저히 상승하였다.

그림 6. 마우스의 혈압 변화 다이어그램

2.3 N-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) 유도 고혈압 동물 모델

L-NAME은 일산화질소 합성효소의 경쟁적 저해제로, 일산화질소가 상승하면 내피 기능을 촉진하고 혈압을 낮추는 활성 물질입니다. 일산화질소 합성효소의 경쟁적 저해제인 L-NAME은 일산화질소의 혈관 확장 효과를 약화시켜 고혈압을 유발할 수 있습니다. 따라서 장기간 NO 결핍으로 인한 고혈압의 동물 모델을 확립할 수 있으며, 모델 실험 연구 대상은 대부분 쥐에서 볼 수 있습니다.

주로 고혈압의 일산화질소계와 심혈관계 연구에 적합하며, 이 모델은 혈압을 안정적이고 지속적으로 상승시킬 수 있으며 방법이 간단합니다.

2.3.1 실험 방법 (참고용)

3-4주령 수컷 쥐에 L-NAME을 20-50 mg/(kg·d)으로 복강내 주사(또는 gave)하여 4주간 하루 한 번씩 투여하였고, 대조군은 증류수만을 복강내 주사(또는 gave)하여 쥐의 변화를 매일 관찰하였다.

실험 후 실험군과 대조군의 체중, 혈압, 심박수, 혈청 생화학적 지표, 기타 생화학적 지표를 측정하였다.

2.3.2 실험 표 및 그림(문헌에서 발췌)

응용 1: 등록 후, 모델군의 혈압은 L-NAME 섭취 기간의 연장에 따라 점차 증가하여 4주차에 고혈압 기준에 도달하였으며, 이는 해당 대조군에 비해 유의하게 높았다.

응용 프로그램 2: 쥐에게 4주간 관개 후 고혈압이 형성되었으며, 이는 해당 대조군 쥐보다 유의하게 높았으며, 계피씨드 물 추출물은 압력을 감소시키고 신장 병변을 개선할 수 있습니다.

2.4 약물 유발 고혈압 모델의 비교

약물 유발 고혈압 모델	앙지오텐신 II. （ 2 부）	데옥시코르티코스테론 아세테이트 （ 도카 ）	N-니트로-L-아르기닌 메틸 에스테르(L-NAME)
방법 설명	삼투펌프 피하주사, AngII. 일반적으로 복용량은 100 ng/(kg·min)이다.	먼저 단측 신장을 절제하고 DOCA 50 mg/(kg·d)을 피하주사하고 1% NaCI 용액을 동시에 섭취시켰다.	20~50 mg/(kg·d) L-NAME의 복강내 주사(또는 위관영양)는 1% NaCI 용액을 음용하는 것과 같은 효과를 나타내어 성형을 촉진할 수 있다.
금형 사이클	2-4주	3-5주	4-5주
응용 시나리오	산화 스트레스 손상 및 RAS에 대한 연구	RAS 관련 연구 및 나트륨수 대사 관련 연구	NO 시스템, 심혈관계 관련 연구

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분류 하다	제품 이름	카탈로그 번호	사양
고혈압 모델	L-NAME 염산염(L-NAME HCl)	52302ES	100mg
	안지오텐신 II 인간	54041ES	10mg
	데옥시코르티코스테론 아세테이트	54344ES	50mg/500mg
류마티스 관절염 모델	완전 프로인트 보조제(CFA)	60718ES	10ml/5x10ml
	불완전 프로인트 보조제(IFA)	60719ES	10ml/5x10ml
대장염 모델	덱스트란 황산나트륨염(DSS) 분자량:36000~50000 DSS 대장염 모델링 등급	60316ES	25g/100g/500g/1kg
급성 췌장염의 동물 모델	케룰레인	60321ES	1mg(1밀리그램)
당뇨병 질병 모델	스트렙토조신(STZ)	60256ES	100mg/500mg/1g

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