덱스트란나트륨황산염(DSS)을 이용한 궤양성 대장염 돼지 모델링 프로토콜
장 투과성 증가는 IBD의 원인 중 하나이므로 소장 및 대장 손상의 심각성을 평가하는 바이오마커로 사용할 수 있습니다. 전체 융모 축을 따라 흡수될 수 있는 불활성 소형 탄수화물 분자인 D-만니톨은 생체 내 장 투과성을 평가하는 데 사용되었습니다 [1] .
그림 1. 돼지 새끼
1. 모델 빌딩
2. 결과
3. 이 리소스에 대한 링크
4.
5. 제품 주문
6. 우리 시약을 사용한 출판된 기사
7. 독서를 고려하다
1. 모델 빌딩
1.1 동물 모델
생후 4~5일 된 요크셔 돼지 새끼
1.2 재료
1.3 프로토콜
a) 요크셔 돼지 새끼는 12시간 명암 주기가 조절되는 방에서 고무 바닥이 있는 금속 바닥 우리에 개별적으로 수용되었습니다. 실내 온도는 26℃로 유지되었고 가열 램프로 보충되었습니다.
b) 돼지 새끼에게는 하루 세 번 상업용 분유 대용품을 먹였으며, 이는 자유 섭취량과 유사했습니다.
c) 동물에게 외과적으로 위내 카테터를 장착했습니다. 카테터는 실리콘 패치(약 8×12mm)에 고정되었고, 위벽에 추가로 봉합한 후 약 30mm를 위 내강에 삽입했습니다. 각 동물은 카테터의 외부 부분을 일시적으로 보관할 수 있는 등쪽 주머니가 있는 맞춤형 조끼를 착용했습니다.
d) 동물을 양성 대조군(Pos), 음성 대조군(Neg) 및 실험군(Trp)으로 나누었습니다.
e) 양성 대조군(Pos): 관류 DSS(5일)+식염수(5일); 음성 대조군(Neg): 생리식염수 관류(10일); 실험군(Trp): DSS 주입(5일)+치료제(5일);
f) DSS 복용량 : 1.25g/kg, 5일간 경구 섭취
g) 종료 시점에서 동물은 흡입 마취제인 이소플루란을 통해 진정시키고 체중(BW)당 0.3ml/kg의 에탄올(펜토바르비탈)을 심장 내 주사하여 안락사시켰습니다.
h) 대장 조직을 0.1 mM 페닐메틸 설포닐 플루오라이드(PMSF)를 함유한 차가운 생리식염수(154 mM, pH7.4)로 즉시 헹군 후 조직학적 검사를 위해 샘플링하거나 액체 질소에 급속 동결시켜 후속 분석에 사용했습니다.
2. 결과
2.1 장투과성 분석
그림 2. DSS로 유도된 돼지 새끼의 D-만니톨 농도는 대조군보다 높았습니다.
DSS로 유발된 돼지의 D-만니톨 농도가 증가하고, 장 장벽이 파괴되었습니다.
2.2 H&E 병리염색 단면
그림 3. H&E 병리염색 단면 (A: Neg군; B: Pos군)
대장 염증의 심각성은 염증 점수와 조직학적 측정을 통해 평가되었습니다. DSS로 치료한 Pos 그룹에서 함몰 구조가 왜곡되었고, 염증 세포가 점막과 점막하 조직으로 침투했으며, 함몰 농양과 함몰 염증이 나타났습니다.
2.3 염증인자 검출
그림 4. 염증인자 검출
DSS를 처리한 Pos군에서는 두 가지 사이토카인의 농도가 증가하였다 [1] .
3. 이 리소스에 대한 링크
[1]Connie J. Kim, et al. 영양생화학 저널 21(2010) 468–475.
4. Yeasen DSS를 이용한 모델링 성공 사례
표 1 DSS를 이용한 다양한 유형의 장염 모델 구축
|
모델 |
모델링 샘플 |
모델링 계획 |
모델링 결과 |
평가 사용 |
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급성 대장염 |
BALB/c 마우스, 암컷, 6-8주, 25g |
3%-5% DSS를 7일 연속 자유롭게 음용 |
5일째 결장의 길이가 짧아지고 HE 염색이 나타나며 염증이 뚜렷하게 나타났습니다. |
성형속도가 빠르고 시간이 짧습니다. 급성대장염모델의 특성과 일치합니다. |
|
C57BL/6 마우스, 수컷, 8주, 20g |
3%-5% DSS를 경구투여, 지속투여 |
5일차 발생, 대장 단축, 체중 감소, 대변에 혈액, 설사 |
높은 곰팡이 발생률, 짧은 지속 시간. 급성 대장염 모델의 특성과 일치 |
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만성 대장염 |
C57BL/6 마우스, 수컷, 8주, 22g |
1-2% DSS를 경구투여, 지속투여 |
Day40 발생, 대장 단축, 체중 감소, 대변에 혈액, 설사 |
높은 성형율. 만성대장염 모델의 특성과 일치 |
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대장암 |
C57BL/6 마우스, 수컷, 8주, 21g |
3주 동안 5일 동안 1%-2% DSS를 자유롭게 섭취 |
대장 길이가 단축되고 체중이 감소하고 HE 염색이 나타나고 염증이 뚜렷해진 14주 |
높은 성형율. 대장암 모델 특성과 일치 |
5. 제품 주문
잘 팔리는 제품은 동일한 효율성을 가진 M* 제품의 1/3 가격으로도 생산이 가능하며, 당사는 대량의 재고를 보유하고 있습니다.
표 2. 제품 주문
| 제품 이름 | 카탈로그 번호 | 크기 |
| 대장염 모델링을 위한 덱스트란 황산나트륨 염 분자량: 36000~50000 | 60316ES25 | 25g |
| 60316ES60 | 100g | |
| 60316ES76 | 500g | |
| 60316ES80 | 1kg |
6. 우리 시약을 사용한 출판된 기사
[1]Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. 궤양성 대장염 치료를 위한 주입형 점막 접착 하이드로젤을 이용한 약물 활용 플랫폼 개선[J]. 화학공학 저널.424(2021)130464.IF=16.744
[2]Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang 외. 우유 유래 세포외 소포는 장 면역을 조절하고 장내 미생물 군집을 재형성하여 궤양성 대장염을 완화합니다[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 IF=11.556
[3]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. 장내 공생체 유래 발레르산은 방사선 손상으로부터 보호합니다. Gut Microbes,.2020.1–18.IF=10.245
[4] Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al. 염증성 장 질환 치료를 위한 미세유체학으로부터 경구 투여되는 뉴클레오티드 전달 입자[J]. Applied Materials Today. 2021년 12월; 25:101231 IF=10.041
[5]Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al. 활성 궤양성 대장염에서 면역 관련 유전자 시그니처 식별 및 CeRNA 네트워크 예측[J]. Frontiers in Immunology. 2022; 13: 855645. IF=7.561
[6]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao 외. 구강 미생물군은 마우스 모델에서 대장암 방사선 치료의 효능 및 예후에 영향을 미칩니다[J]. Cell reports.2021, 109886.IF=9.423
[7]Hao H, Zhang X, Tong L, Liu Q, et al. Lactobacillus plantarum Q7에서 유래한 세포외소포가 마우스의 장내 미생물군과 궤양성 대장염에 미치는 영향[J]. Frontiers in Immunology.2021.777147 .IF=7.561
[8] Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al. 식용 제비집은 Th17/Treg 세포 균형을 회복하여 C57BL/6J 마우스에서 덱스트란 황산나트륨으로 유발된 궤양성 대장염을 개선합니다[J]. Frontiers in Pharmacology.2021.632602.IF=7.561
[9]Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al.Piperlongumine은 마우스 대장염 및 대장염 관련 대장직장암을 완화합니다[J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885. IF=7.561
[10]Gao X, Fan W, Tan L, et al. 대두 이소플라본은 ERα/NLRP3 인플라마좀 경로를 표적으로 하여 실험적 대장염을 개선합니다[J]. 영양생화학 저널, 2020, 83.IF=6.048
[11] Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. LPS 유도 RAW264.7 대식세포와 덱스트란 황산나트륨 유도 C57BL/6 마우스에서 소 뼈 젤라틴 유래 펩타이드의 항염 효과[J]. Nutrients 2022, 14, 1479. IF=5.717
[12] Wang S, Huang J, Tan KS, et al.Isosteviol Sodium은 대사 프로파일링, 대식세포 분극 및 NF-B 경로 조절을 통해 덱스트란 황산나트륨으로 유발된 만성 대장염을 개선합니다[J].산화 의학 및 세포 장수. 2022, 4636618. IF=5.076
7. 독서를 고려하다
아조시메탄(AOM)과 덱스트란 설페이트 나트륨(DSS) 유도 대장염 관련 암 모델 확립
덱스트란나트륨황산염(DSS)을 이용한 궤양성대장염 초파리 모델링 프로토콜