단일 및 이중 루시퍼라제 감지 응용 프로그램 간의 차이점

리포터 유전자 검사는 주로 단일 루시퍼라제 리포터 유전자 검사와 이중 루시퍼라제 리포터 유전자 검사로 나뉩니다. 특정 응용 분야에서 실험이 단일 루시퍼라제 또는 이중 루시퍼라제 검출 시스템을 사용하는지 어떻게 판단할 수 있을까요? 차이점을 살펴보겠습니다.

단일 루시퍼라제 리포터 분석 시스템

리포터 유전자의 수: 단일 반딧불이 루시퍼라제 리포터 유전자

형질감염 유형: 단일 리포터 유전자 플라스미드, 형질감염 후 약물 선택을 사용하여 루시퍼라제를 발현하는 안정적인 리포터 유전자 세포주를 구성합니다.

검출 프로세스: 반딧불이 루시페라아제 신호만 검출하면 되며, 조작이 간단하고 검출 기간이 짧아 고성능 약물 스크리닝에 적합합니다.

응용 시나리오 분석: 일반적으로 안정된 과발현 단일클론 세포주를 구축하는 것을 통해, 이러한 세포주의 발현 수준은 비교적 안정적이고 균일하며, 형질감염 효율 및 세포 생존력으로 인한 실험적 변화의 영향을 받지 않습니다. 조작이 간단하고, 반딧불이 루시퍼라제 신호만 검출되므로 데이터 분석이 더 편리합니다. 검출 시간이 짧다는 장점과 결합하여, 특히 고처리량 약물 스크리닝에 적합하며, 대규모 샘플 검출의 요구를 충족합니다.

듀얼 루시퍼레이즈 리포터 유전자 검출 시스템

보고된 유전자 수량: 반딧불이 루시퍼라제와 레닐라 루시퍼라제의 이중 리포터 유전자

형질감염 유형: 주로 일시적 형질감염을 통한 두 개의 리포터 유전자 플라스미드의 공동 형질감염

검출 과정: 먼저 반딧불 신호를 검출한 다음 레닐라 신호를 검출해야 하며, 이 둘의 비율(반딧불/레닐라)을 최종 데이터 계산에 사용합니다.

응용 시나리오 분석: 일반적으로 일시적 형질 전환을 통해 Renilla 루시퍼라제 유전자를 내부 참조로 포함하는 플라스미드를 공동 형질 전환하여 실험에 대한 벤치마크를 제공하고 세포 생존력 및 형질 전환 효율과 같은 외부 요인의 간섭을 줄입니다. 비율 계산을 통해 세포 수, 형질 전환 효율 및 세포 활동의 변화를 수정하여 실험 결과의 정확성을 향상시킬 수 있습니다. 유전자 발현 조절, 신호 전달 경로 및 약물 스크리닝 분야에서 중요한 도구입니다.

제품 시리즈

Yeasen Luciferase Reporter Gene Detection 제품 시리즈는 편리하고 효율적인 정량적 검출 솔루션을 제공합니다. 단일 구성 요소 설계는 사용 프로세스를 간소화하고, 5시간의 매우 긴 신호 반감기와 높은 감도의 완벽한 조합은 대규모 약물 스크리닝 검출의 요구를 충족합니다. 우리는 Bio-One Step, Steady-One Step, Bright-One Step의 세 가지 제품을 제공하여 다양한 감도 및 안정성 요구 사항에 적응합니다.

제품 이름	바이오원스텝	스테디-원 스텝	브라이트-원 스텝
제품 코드	11411ES	11413ES	11412ES
응용 시나리오 및 특성	이 키트는 신호 강도와 안정성 사이의 상대적 균형을 이룹니다. 비교적 높은 신호 강도를 유지하는 동시에 일정 기간 동안 신호 강도를 비교적 안정적으로 유지합니다.	반감기는 5시간 이상 지속될 수 있습니다. 특히 처음 2시간 동안 발광 값 변화가 최소화됩니다. 초고처리량 또는 384웰 플레이트 분석에 적합합니다.	높은 감도와 높은 신호 강도. 높은 감도가 필요한 실험에 적합.
신호 반감기	60분	5시간	30분
운영 특성	한 걸음	한 걸음	한 걸음

제품의 장점

긴 신호 반감기: 신호 반감기는 최대 5시간까지 가능하여 고처리량 실험의 요구를 충족시키고 샘플 수가 많아 첫 번째 웰과 마지막 웰의 시간 차이로 인한 신호 차이를 방지하여 보다 안정적이고 신뢰할 수 있는 결과를 보장합니다.

강력한 형광 신호: 신호 값은 8개의 크기에 이를 수 있어 넓은 검출 창과 초기 약물 스크리닝 및 효능 평가를 위한 강력한 데이터 지원을 제공합니다.

간편한 조작: 1단계 조작으로 복잡한 실험 절차를 피할 수 있습니다. 검출 시약을 넣고 5분 정도 기다린 후 기계를 작동시켜 검출합니다.

다양한 선택: 다양한 적용 시나리오에 따라 3가지 제품이 제공되며, 신호 값과 신호 안정성에 대한 실험 요구 사항을 기반으로 선택할 수 있습니다.

제품 데이터

01 Yeasen의 성능 비교 다양한 리포터 유전자 분석 키트

3가지 종류의 Assay Kit에 대한 검증은 반딧불이 루시퍼라제를 안정적으로 발현하는 세포주에서 진행되었으며, 그 결과 Bright-One Step 제품이 신호 값이 더 높고, Steady-One Step 제품은 신호 반감기가 더 길고 신호가 더 안정적이었고, Bio-One Step 제품은 신호 값이 높을 뿐만 아니라 신호 반감기도 더 길게 유지되었습니다.

그림 1. 다양한 Yeasen Reporter Gene Assay Kit의 성능 비교

02 Yeasen Bio-One Step Luciferase Reporter 유전자 검출 시약 경쟁 제품과의 비교

반딧불이 루시퍼라제를 안정적으로 과발현하는 세포주에 Yeasen Bio-One Step, 경쟁자 P, 경쟁자 V를 사용했을 때, Yeasen Bio-One Step의 신호 값과 신호 반감기는 경쟁자 P와 본질적으로 일치하고 신호 반감기가 경쟁자 V보다 우수하다는 결과가 나왔습니다.

그림 2. Yeasen Bio-One Step Luciferase Reporter 유전자 검출 시약과 경쟁사 제품 비교

03  Yeasen Bio-One Step Luciferase Reporter 유전자 검출 시약 동결-해동 안정성 시험

Yeasen Bio-One Step Luciferase Reporter Gene Detection Reagent는 반복적인 동결-해동 실험을 거쳤으며, 그 결과, 5번의 동결-해동 사이클 이후에도 제품 성능이 별다른 변화 없이 안정적으로 유지되는 것으로 나타났습니다.

그림 3. Yeasen Bio-One Step Luciferase Reporter 유전자 검출 시약의 반복 동결-해동 테스트

운영 절차

01 세포 형질 전환

시약을 세포 현탁액에 직접 첨가한 다음, 위아래로 5번 피펫을 움직여 완전히 섞이도록 한 후, 세포가 완전히 용해될 때까지 5분간 기다립니다.

02 샘플 로딩

혼합물(검출 시약 + 세포 배양 배지) 100 μL를 검출 플레이트의 각 웰에 피펫으로 넣습니다.

03 형광 검출

플레이트 리더에서 매개변수를 설정합니다. 검출 플레이트를 플레이트 리더에 넣고 몇 초 동안 진동시킨 다음 검출을 진행합니다.

제품 목록

제품 카테고리	제품 이름	제품 코드	제품 사양
루시퍼라제 리포터 유전자 검정 키트	Bio-One Step 루시퍼라제 분석 키트	11411ES60/80/81	100T/10×100T/1000T
	Stedy-One Step 루시퍼라제 분석 키트	11413ES60/80/81	100T/10×100T/1000T
	Bright-One Step 루시퍼라제 분석 키트	11412ES60/80/81	100T/10×100T/1000T
듀얼 루시퍼라제 리포터 유전자 검정 키트	듀얼 루시퍼라제 리포터 유전자 분석 키트	11402ES60/80	100톤/1000톤
	듀얼 글로 루시퍼라제 리포터 유전자 검정 키트	11405ES60/80	100톤/1000톤