친애하는 여러분, 단백질 면역 블로팅 중에 다양한 로딩 제어 및 에피토프 태깅 항체에 직면했을 때 당황하십니까? 로딩 제어 단백질은 생물체의 하우스키핑 유전자에 의해 인코딩되며 여러 조직에서 안정적으로 발현됩니다. 이는 면역 실험이 정상적으로 진행되는지 확인하고 단백질 발현에 대한 반정량적 검출 기준으로 사용됩니다. 그렇다면 로딩 제어 항체를 올바르게 선택하려면 어떻게 해야 합니까? 다음 사항을 참조할 수 있습니다.

I. 샘플 종 원산지

1. 포유류 조직이나 세포의 샘플의 경우 일반적으로 β-액틴, α-튜불린, GAPDH, 라민-B, 히스톤 H3, Na+/K+-ATPase를 선택합니다.
2. 식물 유래 시료의 경우 일반적으로 식물성 액틴, 루비스코 등을 선택합니다.
3. 조사가 덜 이루어진 다른 샘플에 대해서는 관련 문헌이나 데이터베이스를 참고하여 내부 참조로 적합한 단백질을 선택하세요.

검출 중 간섭을 방지하기 위해 표적 단백질의 분자량이 로딩 대조군과 5KDa 이상 차이가 나는지 확인하십시오. 예를 들어, 표적 단백질이 40KDa인 경우 로딩 대조군으로 β-액틴(42KDa)을 선택하는 것은 적합하지 않습니다. 로딩 대조군으로 GAPDH(36KDa) 또는 β-튜불린(55KDa)을 사용하는 것을 고려하십시오.

III. 내부 참조 단백질의 발현 부위

라벨 항체는 함께 사용하면 더 효과적입니다.

풀다운과 같은 단백질 상호작용을 연구하는 실험에서 에피토프 태그는 분자생물학적 방법을 통해 표적 단백질의 N 또는 C 말단에 융합될 수 있습니다. 일반적으로 사용되는 에피토프 태그에는 His, HA, Myc 및 GST가 있습니다. 이러한 에피토프 태그는 일반적으로 표적 단백질의 생물학적 활성 및 세포 내 위치에 영향을 미치지 않습니다. 에피토프 태그의 출현은 과학 연구 및 산업 생산에 편리함을 제공했습니다.

제품 정보