PCR에 기존의 고충실도 효소를 사용할 때, 불가피하게 몇 가지 까다로운 문제에 부딪히게 됩니다. 예를 들어, 충실도가 충분하지 않아 증폭된 단편을 시퀀싱한 후에도 표적 염기에 돌연변이나 삭제가 발생할 수 있습니다. 증폭 시간도 비교적 깁니다. 때로는 5kb 단편을 증폭하는 데 거의 2시간이 걸릴 수 있습니다. 이제 XiaoYi가 여러분의 문제를 해결할 빠른 고충실도 PCR을 소개합니다! -- Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix(초고속 고충실도 PCR 프리믹스).
2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix(염료 포함) 에는 미리 추가된 전기영동 지시약이 들어 있어 PCR 산물을 전기영동에 직접 사용할 수 있습니다. 증폭된 산물은 뭉툭한 끝을 가지고 있습니다. 이 고충실도 효소 혼합물은 빠르고 간단하며, 민감도가 높고, 특이성이 강하고, 안정적이라는 장점을 제공합니다. 반응 시스템에서는 프라이머와 템플릿만 추가하면 됩니다. 또한 이 제품에는 특정 보호제가 들어 있어 고충실도 PCR 프리믹스가 반복적인 동결 및 해동 후에도 안정적인 활성을 유지합니다.
제품 특징
- 높은 충실도: 낮은 불일치율, 높은 GC 돌연변이가 발생하기 쉬운 시퀀스에서 염기 불일치 비율이 231/300,000입니다.
- 빠른 증폭 속도: kb당 최대 5초의 확장 속도
- 광범위한 적용성: 20-80% GC 함량의 유전자를 다룰 수 있고, 마우스 용해물과 20% 혈액을 허용합니다.
- 우수한 안정성: 제품 성능에 영향을 주지 않고 37°C에서 7일간 보관할 수 있습니다.
- 빠르고 편리함: 증폭을 위해 프라이머와 템플릿을 추가하기만 하면 되고, 직접 전기영동을 위한 로딩 다이가 함께 제공됩니다.
제품 성능 데모
높은 충실도, 낮은 불일치율

다양한 종의 유전체를 템플릿으로 사용하여 염기 돌연변이/손실이 발생하기 쉬운 GC가 풍부한 6개의 단편을 증폭을 위해 선택했습니다. 각각의 PCR 산물을 벡터에 클로닝하고, 각 시퀀스에 대한 100개의 단일 클론을 선택하여 염기 불일치/돌연변이 발생을 확인하기 위해 시퀀싱했습니다. 결과에 따르면, 고속 고충실도 PCR 마스터 믹스(10164ES)는 국내 및 국제 브랜드 시약에 비해 염기 불일치/돌연변이 발생률이 더 우수했습니다.
확장 시간은 최대 5초 /kb 까지 가능합니다.

빠른 고충실도 효소 프리믹스(10164ES)와 제품 T를 사용하여, 다양한 길이의 단편(0.4-10kb)이 100ng의 인간 게놈 DNA 템플릿에서 5초/kb의 확장 속도로 증폭되었으며, 필요한 확장 시간은 5초/kb였습니다. 결과는 빠른 고충실도 효소 프리믹스(10164ES)가 5초/kb의 확장 속도로 10kb 이내의 단편을 증폭할 수 있음을 보여주었습니다.
다양한 GC 함량을 갖는 유전자 단편을 증폭할 수 있습니다.
인간 게놈 DNA 템플릿에서 23-76% GC 함량의 유전자 단편을 증폭하기 위해 고속 고충실도 효소 프리믹스(10164ES)를 사용하며, 확장 시간은 5초/kb로 설정했습니다. 결과는 제품이 좋은 증폭 특이성을 가지고 있으며 다양한 GC 함량의 단편을 증폭할 수 있음을 보여주었습니다.
다양한 GC 함량을 갖는 유전자 단편을 증폭할 수 있음
다양한 샘플에서 다양한 길이의 단편을 증폭하기 위해 고속 고충실도 효소 프리믹스(10164ES)를 사용하며, 확장 시간은 킬로베이스당 5-10초로 설정했습니다. 결과에 따르면 이 제품은 우수한 증폭 특이성을 보이며 다양한 템플릿에서 다른 단편을 증폭하는 데 적합합니다.
참고: 1. 마우스 유전체 DNA 1kb; 2. 마우스 유전체 DNA 2kb; 3. 마우스 유전체 DNA 6kb; 4. 옥수수 유전체 DNA 1kb; 5. 벼 유전체 DNA 2kb-A; 6. 벼 유전체 DNA 2kb-B; 7. 인간 293세포 cDNA 1kb; 8. 인간 293세포 cDNA 2kb; 9. 인간 293세포 cDNA 3kb; 10. 인간 293세포 cDNA 12kb; 11. 대장균 배지 8kb; 12. 대장균 배지 16kb; 13. 벼 유전체 DNA 10kb-A; 14. 벼 유전체 DNA 10kb-B; 15. 벼 유전체 DNA 10kb-C; 16. 벼 유전체 DNA 20 kb-A; 17. 벼 유전체 DNA 20 kb-B; 18. 인간 혈액 직접 증폭 3 kb.
다양한 종에 걸친 템플릿 증폭의 높은 검출율
빠른 고충실도 효소 프리믹스(10164ES)를 사용하여 아라비도프시스, 유채, 감자에서 0.5-10kb 범위의 다양한 GC 함량 단편이 5초/kb의 연장 시간으로 증폭되었습니다. 결과는 빠른 고충실도 효소 프리믹스(10164ES)가 성공적인 증폭을 보장할 수 있음을 보여주었습니다.
빠른 고충실도 효소 프리믹스(10164ES)를 사용하여, 아라비돕시스, 유채, 과일파리, 선충류, 제브라피쉬의 무작위 시퀀스(무작위로 선택)를 증폭시켰는데, 단편 크기는 0.5-10kb이고 GC 함량은 20-80%입니다. 연장 시간은 5초/kb로 설정했습니다. 결과는 빠른 고충실도 효소 프리믹스(10164ES)가 높은 검출률을 가지고 있음을 보여주었습니다.
안정성이 좋다
열 가속된 고속 고충실도 효소 프리믹스(10164ES)를 사용하여 37℃에서 각각 3일과 7일 동안 보관하여 100ng의 인간 게놈 DNA에서 3kb와 5kb의 DNA 단편을 증폭시켰으며, 확장 시간은 5초/kb로 설정했습니다. 결과는 제품이 안정성이 우수함을 보여줍니다.
고객 체험 피드백
동물 gDNA-120bp-50%GC
고객 평가: PCR 과정이 빠르고, 밴드가 적절하며, 아가로스 겔 전기영동에 직접 로딩할 수 있습니다. N 브랜드의 밴드는 위쪽으로 편향되어 있는데, 이는 자체 버퍼의 영향일 수 있으며, 로딩 버퍼를 추가하지 않았기 때문에 이 제품은 현재 실험 프로토콜의 고충실도 효소를 대체할 수 있습니다.
식물 cDNA-729bp-45.13%GC
고객 평가: T 브랜드에 비해 클로닝 밴드가 더 선명하고 균일하며 전체 PCR 프로세스가 더 빠릅니다. 젤을 실행할 때 추가 염색제를 추가할 필요가 없어 매우 편리하고 시간을 절약할 수 있습니다.
미생물 gDNA-1158、1953bp-58.8%、52.9%GC
고객평가: V브랜드와 비교해도 효과는 비슷하지만, 개인적으로는 더 좋다고 생각합니다.
식물 cDNA-2000bp-40%GC
고객 평가: 효과가 아주 좋고 스트립이 투명합니다.
고충실도 PCR 선택 가이드
제품 포지셔닝 |
제품 이름 |
고양이# |
5s/kb, 충실도와 속도 보장(염료 포함) |
10164ES |
|
5s/kb, 충실도와 속도 보장(염료 없음) |
2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR 마스터 믹스 |
10163ES |
83×Taq, 높은 검출율(염료 사용) |
2×Hieff Canace™ Plus PCR 마스터 믹스(염료 포함) |
10154ES |
83×Taq 단일효소 + 완충액 분리 |
10153ES |