단백질 정제는 생화학 및 분자생물학의 기본 기술로, 연구, 진단 및 치료 응용 분야에서 광범위하게 활용됩니다. 특정 단백질을 연구하려면 첫 번째 단계는 생물학적 샘플에서 단백질을 분리하고 정제하는 것입니다. 그러나 단백질의 다양성과 생물학적 시스템의 복잡성을 감안할 때 고순도 단백질을 얻는 것은 어려울 수 있습니다. 단백질 정제의 핵심 원리를 이해하고 연구에 적합한 기술을 선택하면 워크플로 효율성과 수율을 크게 향상시킬 수 있습니다.
단백질 정제의 기본
단백질 정제는 크기, 전하, 소수성, 특정 리간드에 대한 친화성과 같은 단백질의 물리적 및 화학적 특성의 차이에 의존합니다. 이러한 차이를 활용함으로써 연구자들은 표적 단백질을 다른 생물학적 성분으로부터 효과적으로 분리하여 오염을 최소화할 수 있습니다.
다음은 다양한 분리 메커니즘을 기반으로 한 주요 단백질 정제 기술입니다.
|
|
겔 여과 |
이온 교환 |
소수성 상호작용 |
유연 |
|
분리 메커니즘 |
크기 |
단백질 표면 전하 |
소수성 |
특정 친화력 |
|
선택성 |
중간 |
높은 |
높음-중간 |
매우 높음 |
|
하중 용량 |
낮은 |
높은 |
높은 |
높은 |
|
정화 속도 |
중간-낮음 |
높은 |
높은 |
높은 |
|
생체적합성 |
매우 좋은 |
좋은 |
중간-좋음 |
좋은 |
|
목표 단백질 수율 |
높은 |
높은 |
중간-높음 |
높은 |
이러한 각 기술은 적절한 재료와 컬럼을 선택하여 최적화할 수 있습니다. 이상적인 방법은 단백질의 특성과 하류 응용 분야에 필요한 순도 수준에 따라 달라집니다.
Y easen Biology 제품을 사용하여 단백질 정제 워크플로 최적화
His 태그 단백질 정제 ( Cat#20502ES) :
재조합 단백질 발현에서 His 태그 (일반적으로 6×His)는 크기가 작고 면역원성이 낮으며 단백질 기능에 미치는 영향이 최소이기 때문에 널리 사용됩니다. His 태그 단백질은 Ni-NTA 수지와 같은 니켈 이온으로 킬레이트된 친화성 수지에 의해 효율적으로 정제될 수 있습니다. HisSep Ni-NTA 아가로스 수지 ( Cat#20502ES)는 Ye easen 에서 제공합니다. 생물학은 고도로 가교된 아가로스 젤을 매트릭스로 사용하고, 4중 배위 질소-트리아세트산(NTA) 리간드와 결합하여 안정적인 니켈 이온 킬레이트를 형성합니다. 결합된 구조는 효율적인 단백질 결합 및 용출 성능을 보장합니다.
태그 항체 친화 정제
태그 항체의 친화성 정제는 항체와 특정 태그 간의 높은 특이적 결합을 활용하여 융합 단백질의 정제를 달성합니다. 일반적인 태그에는 Flag, HA, Myc 등이 있습니다. 해당 항체 친화성 배지를 활용하면 관심 단백질을 복잡한 샘플에서 효율적으로 분리할 수 있습니다.
-
안티 플래그 친화 젤 ( Cat#20584ES ) :
공급 커플링을 통해 4% 고도로 가교된 아가로스 젤을 사용하여 고품질 마우스 IgG2b 단일클론 항체에서 제조되었으며 , 높은 플래그 태그 융합 단백질 적재 용량을 가지고 있어 플래그 태그 단백질의 면역 침전 및 정제에 적합합니다. yeasen.com
-
항-HA 친화성 젤 ( Cat#2058 6 ES ):
고품질 마우스 IgG1 단일클론 항체와 Sepharose 4B 젤을 공급 커플링을 통해 제조한 제품으로 HA-태그 융합 단백질의 높은 적재 용량을 갖추고 있어 HA-태그 단백질의 면역 침전 및 정제에 적합합니다. yeasen.com
-
항-Myc 친화 젤 ( Cat#2058 7 ES ) :
고품질의 마우스 IgG1 단일클론 항체는 Myc 태그가 붙은 단백질을 정제하도록 설계된 Sepharose 4B 젤에 결합되어 있어 높은 특이성과 높은 결합 능력을 갖습니다.
-
안티 플래그 면역 자기 비드 ( Cat#20565ES ) :
이 면역 자기 비드는 고품질 마우스 유래 IgG2b 단일클론 항체를 사용하여 자기 아가로스 마이크로구형체와 결합되어 자기장의 작용으로 플래그 태그가 달린 단백질을 빠르게 정제할 수 있으며 소량의 샘플 정제에 적합합니다.
항체 친화성 정제(Cat#36401ES):
항체 친화성 정제는 단백질 정제를 위해 항체의 항원에 대한 특이적 결합을 사용하는 방법입니다. 알칼리 내성 재조합 단백질 A 아가로스 정제 수지(Cat#36401ES)는 일반적으로 항체 친화성 정제 매체로 사용되며 항체 정제 및 농축에 널리 사용됩니다.
단백질 분해효소
단백질 연구에서 프로테아제는 융합 태그를 절단하여 표적 단백질의 자연 상태를 복원하는 데 사용됩니다. 이러한 프로테아제를 단백질 정제 워크플로에 통합하면 표적 단백질의 품질과 기능을 향상시켜 고급 연구 및 개발 프로젝트를 용이하게 할 수 있습니다.
- 재조합 엔테로키나제(Cat#20401ES):
엔테로키나아제는 엔테로펩티다아제라고도 하며, 아미노산 서열 DDDDK 뒤에서 특이적으로 절단하는 세린 프로테아제입니다.
- l PNGase F(Cat#20407ES):
PNGase F는 N-연결 당단백질의 가장 안쪽 GlcNAc와 Asn 잔류물 사이를 특이적으로 절단하는 아미다제입니다.
- 재조합 트립신(MS-SAFE)(Cat#20416ES):
트립신은 리신과 아르기닌 잔류물의 카르복실 측에서 펩타이드 결합을 절단하는 세린 프로테아제입니다.
|
정화 방법 |
시약 종류 |
제품 유형 |
추천 상품 |
|
겔 여과 |
덱스트란 젤라틴 크로마토그래피 |
탈염 필러 미리 포장된 컬럼의 염 제거 탈염 중력 컬럼 스핀 컬럼
|
탈염 컬럼 G25 M （ Cat#20590ES ） 스핀 탈염 컬럼, 0.5 mL （ Cat#20599ES ） 중력 탈염 컬럼, 8.3 mL ( Cat#20741ES ) |
|
아가로스 젤라틴 크로마토그래피 |
필러 미리 포장된 컬럼 |
Geldex 200 PG 고분해능 아가로스 겔 크로마토그래피 패킹(10-600 kDa)(Cat#20598ES) Geldex 200 PG 크로마토그래피 컬럼 （ Cat#20593ES ） |
|
|
이온 교환 |
음이온 교환 크로마토그래피 |
필러 미리 포장된 컬럼 |
Q 아가로스 HP(Q 강력 음이온 교환 크로마토그래피 패킹 HP)(Cat#20460ES) Q HP 강력 음이온 교환 미리 포장된 컬럼, 5 mL (Cat#20462ES) |
|
양이온 교환 크로마토그래피 |
SP 아가로스 HP(SP 강력 양이온 교환 크로마토그래피 패킹 HP)(Cat#20463ES) SP HP 강력 양이온 교환 미리 포장된 컬럼, 5 mL (Cat#20465ES) |
||
|
소수성 상호작용 크로마토그래피 |
약한 소수성 크로마토그래피 |
필러 미리 포장된 컬럼 |
고분해능 부틸 약한 소수성 크로마토그래피 매체(Cat#20484ES) 부틸 HP 약소수성 크로마토그래피 사전 로드 컬럼, 5 mL(Cat#20485ES) |
|
강력한 소수성 크로마토그래피 |
고분해능 페닐 강소수성 크로마토그래피 매체(Cat#20486ES) 페닐 HP 강력한 소수성 크로마토그래피 사전 로드 컬럼, 5 mL(Cat#20487ES) |
||
|
친화력 정화 |
그의 태그 단백질 정제 |
수지 미리 포장된 컬럼 정화 자석 구슬
|
His-tag 단백질 아가로스 정제 수지 (Cat#20502ES) His-tag 단백질 정제 사전 로드 컬럼, 5 mL(Cat#20504ES) His-tag 단백질 정제 자기 비드(Cat#20561ES) |
|
GST 태그 단백질 정제 |
수지 미리 포장된 컬럼 정화 자석 구슬
|
글루타치온 아가로스 수지(GST 태그 단백질 정제용)(Cat#20507ES) GST 태그 단백질 정제 사전 로드 컬럼, 5 mL(Cat#20510ES) GST 태그 단백질 정제 자기 비드(Cat#20562ES) |
|
|
MBP- 태그 단백질 정제 |
수지 미리 포장된 컬럼
|
MBP-태그 단백질 고도 가교 정제 수지(Cat#20515ES) MBP 태그 단백질 정제 사전 로드 컬럼, 5mL(Cat#20517ES) |
|
|
연쇄상구균( Ⅱ ) 태그 단백질 정제 |
수지 미리 포장된 컬럼
|
Strep(II) 태그 단백질 아가로스 정제 수지(Cat#20495ES) |
|
|
바이오티 태그 단백질 정제 |
수지 미리 포장된 컬럼 면역 자기 비드 |
스트렙타비딘 아가로스 정제 수지(Cat#20512ES) 바이오틴 분자 정제 사전 로드 컬럼, 5 mL(Cat#20514ES) 스트렙타비딘(SAV) 면역자기 비드(Cat#47503ES) |
|
|
태그 항체 친화 정제 |
젤라틴 면역 자기 비드 |
안티플래그 친화성 정화 젤 (Cat#20584ES) 항-HA 친화성 정화 젤 (Cat#20586ES) 항-Myc 친화성 정제 젤 (Cat#20587ES) 안티 플래그 면역 자기 비드 (Cat#20565ES) |
|
|
항체 친화성 정제 |
수지 미리 포장된 컬럼 면역 자기 비드 |
재조합 단백질 A 아가로스 정제 수지 (Cat#36401ES) 단백질 G 아가로스 정제 수지(Cat#36405ES) 단백질 A/G 아가로스 정제 수지(Cat#36403ES) 단백질 A/G 면역 자기 비드 (Cat#36417ES) |
|
|
기타 항체 친화도 정제 |
수지 미리 포장된 컬럼
|
엔도톡신 고효율 제거 정제 수지(Cat#20518ES) 헤파린 친화 정제 매체(Cat#20493ES) |
|
|
기타 제품 |
프로테아제 |
태그 절단 효소 글리코시다제 질량 분석 등급 효소 |
대장균 발현 재조합 엔테로키나제(라벨 없음) (Cat#20401ES) 소 트롬빈(높은 생존력, >2000 IU/mg)(Cat#20402ES) rTEV 프로테아제 재조합 담배 에칭 바이러스 프로테아제(Cat#20403ES) PNGase F, N-글리코시다제 F(100000 U/mL) (Cat#20407ES) 재조합 트립신(MS-SAFE) 재조합 트립신(질량 분석 등급) (Cat#20416ES) |
|
크로마토그래피 소모품 |
중력 흐름 빈 열 빈 열 입력 YXK 컬럼 투석백 |
12 mL 중력 크로마토그래피 빈 컬럼(Cat#20523ES) 5 mL Type C 빈 컬럼(Akata, 주사기 또는 페리스탈틱 펌프에 연결됨)(Cat#20526ES) YXK16/70 크로마토그래피 빈 컬럼(Cat#20443ES) 27mm 투석백(MWCO 50kDa)(Cat#20534ES) |
결론: 귀하의 요구 사항에 맞게 워크플로우를 조정하세요
단백질 정제 워크플로우를 최적화하는 것은 연구나 응용 분야에서 고순도, 고수율 단백질을 얻는 데 매우 중요합니다. 정제 원리를 이해하고 올바른 도구를 선택하면 프로세스를 간소화하고 일반적인 함정을 피할 수 있습니다.
당사 제품이 어떻게 단백질 정제 과정을 개선할 수 있는지 자세히 알아보려면 제품 페이지를 방문하거나 당사 팀에 문의하여 개인화된 권장 사항을 받으세요.