생물의학 연구 분야에서 단백질 정제는 생명의 신비를 탐구하는 핵심 기술입니다. 그러나 전통적인 정제 방법은 비효율성과 높은 비용으로 어려움을 겪습니다. 특히 구조 생물학 연구의 초점인 막 단백질의 경우 더욱 그렇습니다. 이러한 단백질은 구조적으로 복잡하고 세포막에서 발현 수준이 낮으며 환경 조건에 민감하여 정제가 특히 어렵습니다. 이제 뛰어난 R&D 역량을 갖춘 Yeasen Biotech가 업그레이드된 Anti-DYKDDDDK(Flag) Affinity Gel (Cat#20584ES)을 출시했습니다 . 이는 까다로운 막 단백질에도 효율적이고 편리한 단백질 정제를 위한 강력한 도구입니다.
제품 성능
1. 높은 특이성 및 높은 결합 용량: 표적 단백질 포획을 위한 주요 이점
Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) Affinity Gel (Cat#20584ES) 은 고품질 마우스 IgG2b 단일클론 항체를 4% 고도로 가교된 아가로스 젤과 공유 결합시켜 제조합니다. 이 독특한 제조 공정은 제품에 매우 높은 특이성을 부여하여 Flag 태그가 있는 융합 단백질을 정확하게 인식하고 결합할 수 있습니다. Met( Met-Flag-Protein )에 의해 변형된 N-말단 Flag 융합 단백질이든, N-말단 Flag 융합 단백질( Flag-Protein )이든, C-말단 Flag 융합 단백질( Protein-Flag )이든, 이 젤은 이를 쉽게 처리할 수 있습니다.
막 단백질 정제에서 이러한 특이성은 이러한 단백질이 구조적으로 복잡하고 다른 단백질과 비특이적으로 결합하기 쉽기 때문에 특히 중요합니다. Flag 젤의 높은 특이성은 비특이적 단백질의 간섭을 효과적으로 줄여 정제된 막 단백질의 고순도를 보장합니다. 또한, 이 젤은 Flag 태그가 달린 융합 단백질에 대한 높은 결합 용량을 가지고 있습니다(최소 1.1mg 단백질/mL 젤). 즉, 표적 단백질이 낮은 수준으로 발현되더라도 Flag 젤을 사용하여 효율적으로 포획하고 정제할 수 있습니다.
2. 고순도 및 고수율: 다운스트림 애플리케이션 활성화
Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) Affinity Gel (Cat#20584ES)은 불순물의 비특이적 결합이 최소화되어 정제 후 고순도 단백질 샘플을 얻을 수 있습니다. 이는 생물학적 활성 분석 및 구조 분석과 같은 다운스트림 애플리케이션에 필수적입니다. 고순도 단백질 샘플은 보다 정확한 실험 데이터를 제공하여 연구자의 연구를 위한 견고한 기반을 마련합니다.
3. 최적화된 실험 워크플로: 단백질 정제 과제 간소화
단백질 정제는 단백질의 구조적 손상을 피하기 위해 온화한 조건에서 수행해야 하며, 특히 복잡한 막 단백질의 경우 더욱 그렇습니다. Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) Affinity Gel (Cat#20584ES) 은 이를 염두에 두고 설계되었습니다. 저장 완충액은 pH 7.4에서 50% 글리세롤을 함유한 TBS 로 , 겔의 활동을 보호할 뿐만 아니라 단백질 정제를 위한 온화한 환경을 제공합니다.
Flag 젤을 사용한 정제 과정은 간단하고 효율적입니다. 1×Flag 펩타이드 용출을 용이하게 하기 위해 제품 패키지에는 보완적인 1×Flag 펩타이드(Cat#20572ES)가 포함되어 있습니다. 이를 통해 용출 과정이 부드럽고(단백질 손상이 거의 없음) 매우 편리합니다(실험의 용이성을 더욱 향상시킵니다).
4. 다양한 크기와 유연한 배송 옵션: 다양한 실험적 요구 사항 충족
다양한 실험실의 다양한 규모와 필요성을 고려하여 Yeasen은 1mL, 5mL, 25mL, 100mL를 포함한 여러 크기의 Flag 젤을 제공합니다 . 소규모 예비 탐사든 대규모 단백질 생산이든 적합한 옵션이 있습니다. 대량 연간 구매의 경우 고객은 배치로 배송을 선택하여 과도한 재고의 압박을 피하면서 가격 할인 혜택을 누릴 수 있습니다.
테스트 데이터
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M: 단백질 마커 1: Flag-N/Flag-M/Flag-C 단백질의 사전 컬럼 조 샘플 2: Flag-N/Flag-M/Flag-C 단백질의 컬럼 후 흐름 3: 용출(pH 2.7 용출) 4: 용출(pH 12 용출) 5: 용출(1 × 플래그 펩타이드 용출) 6: 정제된 젤(pH 2.7 용출) 7: 정제된 젤(pH 12 용출) 8: 정제된 젤(1 × 플래그 펩타이드 용출) a ： 플래그-N b ： 플래그-M c ： 플래그-C |
그림 1 . SDS-PAGE에 나타난 저발현 단백질(Flag-N(a), Flag-M(b), Flag-C(c))에 대한 Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) Affinity Gel 정제 결과입니다.
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M: 단백질 마커 1: Flag-C 단백질의 사전 컬럼 조시료 2: Flag-C 단백질의 컬럼 후 흐름 3: 용출(pH 2.7 용출) 4: 용출(pH 12 용출) 5: 용출(1 × 플래그 펩타이드 용출) 6: 정제된 젤(pH 2.7 용출) 7: 정제된 젤(pH 12 용출) 8: 정제된 젤(1 × 플래그 펩타이드 용출) a ： 예센 b ： 브랜드 S* c ： 브랜드 G* |
그림 2. SDS-PAGE에 나타난 저발현 단백질(예: 막 단백질) 정제 시 Yeasen(a)과 B rand S*(b) 및 B rand G*(c) Anti-Flag 젤 의 비교 .
결론:
1. Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) Affinity Gel (제품번호 20584ES) 은 특이성이 높아 다양한 위치의 Flag 태그(N-말단 Flag 융합 단백질, Met 변형 N-말단 Flag 융합 단백질, C-말단 Flag 융합 단백질)에 결합할 수 있습니다.
2. 극히 낮은 표적 단백질 발현(예: 막 단백질) 조건에서 Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) Affinity Gel (Cat#20584ES)은 경쟁 제품에 비해 상당히 높은 수율과 순도를 달성합니다. Yeasen을 사용하면 용출을 위한 무료 1×Flag 펩타이드(Cat#20572ES)를 사용하면 더 나은 결과를 얻을 수 있습니다.
플래그 태그가 달린 융합 단백질을 위한 완벽한 솔루션:
재조합 엔테로키나제(Cat#20395ES) : 4개의 아스파르트산이 선행하는 리신의 카르복실 말단을 절단하는 특정 프로테아제: Asp-Asp-Asp-Asp-Lys. 이 서열은 옥타펩타이드 플래그 태그(DYKDDDDK)의 일부입니다. 재조합 엔테로키나제(rEK)는 융합 단백질에서 플래그 태그를 쉽게 제거할 수 있어 네이티브 단백질의 구조와 기능을 연구하는 데 이상적인 도구입니다.
Anti-DYKDDDDK(Flag) MagBeads (Cat#20565ES) : 고품질 마우스 anti-DYKDDDDK(Flag) 단일클론 항체와 실리카 기반 자기 비드(직경 100mm)를 공유 결합시켜 제조한 폴리머 자기 미세구체. ~의 200 nm). 이 비드는 플래그 태그가 있는 단백질의 면역침전(IP) 또는 공동 면역침전(Co-IP)에 적합합니다.
제품 정보
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제품 이름 |
제품 번호 |
사양 |
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1 밀리리터 / 5 밀리리터/25밀리리터 |
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효모에서 발현된 재조합 소 엔테로키나제, His |
100 유 / 500 유/5000유 |
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안티-DYKDDDDK(플래그) 맥비즈 |
1 밀리리터 / 5 분당 |