설명
식물 조직 직접 PCR 키트는 다양한 유형의 식물 잎을 PCR로 직접 증폭할 수 있는 키트로, 광범위한 적응성과 강력한 안정성을 갖추고 있습니다. 이 키트는 독특한 용해 완충액 시스템을 사용하여 다양한 식물 샘플을 빠르게 용해하고 게놈 DNA를 방출할 수 있습니다. 방출된 게놈 DNA는 PCR 반응에서 단백질, RNA 또는 2차 대사산물을 제거하지 않고도 템플릿으로 직접 사용할 수 있습니다. 또한 이 키트는 소량의 샘플만 필요하며, 1mm 정도의 식물 잎만 실험에 사용할 수 있습니다.
이 키트에 제공된 2×Plant Master Mix는 강력한 증폭 호환성을 가지고 있으며 효율적이고 특정적인 증폭을 위한 템플릿으로 샘플의 용해물을 직접 사용할 수 있습니다. 이 시약은 2배 농축된 PCR 반응 혼합물로, 템플릿과 프라이머를 제외한 PCR 증폭에 사용되는 모든 구성 요소를 포함하고 있어 작업 프로세스를 크게 단순화하고 오염 가능성을 줄입니다.
이 키트는 형질전환 식물의 식별, 식물 유전자형 분석 등에 사용할 수 있습니다.
해운
제품은 얼음팩과 함께 배송됩니다.
저장
1. 시약 10187-A [완충액 P1]는 4℃에서 1년간 보관 가능합니다.
2. 시약 10187-B [완충액 P2]는 용해물을 중화시키는데 사용되며, 샘플을 장기간 보관하는데 유리하며, 4℃에서 1년간 보관이 가능합니다.
3. 시약 10187-C [2× Plant Master Mix]는 -20℃에서 1년간 보관 가능합니다. 반복적인 동결 및 해동은 피하십시오.
주의사항
1. 잎 실험을 할 때는 신선하게 수집한 잎 조직을 사용하는 것이 좋습니다. 장기 동결 조직인 경우 -80°C에서 보관해야 합니다. 반복적인 동결 및 해동은 템플릿 분해를 피하고 PCR 효율에 영향을 미치지 않도록 최대한 피해야 합니다. 잎 조직은 어린 잎에 적합합니다. 성숙한 잎인 경우 잎의 주맥 조직을 사용하지 마십시오.
2. 최상의 증폭 효율을 위해 길이가 1kb 이내인 단편을 증폭하는 것이 좋습니다.
3. 샘플링할 때는 홀 펀처나 칼을 사용하여 적당한 크기의 샘플을 채취합니다. 샘플이 다를 경우 샘플을 처리하기 전에 홀 펀처나 칼을 매번 청소해야 합니다.
4. 잎 조직의 경우 1-10mm의 잎을 채취하는 것이 좋습니다. 잎 길이가 너무 짧으면 PCR 증폭 수율이 낮아지고 너무 길면 PCR 반응을 저해합니다. 열분해, 피펫 팁으로 으깨기, 분쇄기로 분쇄하는 방법을 사용하여 식물 잎을 처리합니다. 처리 후 흔들어 원심분리해야 합니다. 반드시 상층액을 채취하여 검사합니다. 침전은 PCR 반응을 심각하게 저해합니다.
5. 안전과 건강을 위해 작업 시에는 실험실 가운과 일회용 장갑을 착용해 주시기 바랍니다.
6. 이 제품은 연구용으로만 사용 가능합니다!
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일반적인 문제 |
가능한 원인 |
솔루션 |
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양성 대조군과 검사 대상 샘플에는 띠가 없었습니다. |
PCR 반응 시스템이나 반응 조건이 적합하지 않았습니다. |
그래디언트 PCR을 사용하여 PCR에 대한 최적의 반응 조건을 살펴보세요. |
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PCR 시약을 부적절하게 보관하면 비활성화됩니다. |
2×PCR Mix는 -20℃에서 보관해야 하며, 사용 시 반복적인 동결 및 해동을 피하십시오. 자주 사용하는 경우 4℃에서 단기간 보관할 수 있습니다. |
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프라이머 설계 문제. |
프라이머를 다시 설계해 확인해 보세요. |
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양성 대조군에는 관심대상 밴드가 나타나고, 검사할 샘플에는 밴드가 없거나 약한 밴드가 나타납니다. |
용해 완충액과 중화 완충액의 비율이 부적절하며, 용해 혼합물이 PCR 시스템의 pH 값에 영향을 미칩니다. |
정상적인 조건에서 중화된 용해 혼합물의 pH는 약 7-8이어야 합니다(용해 생성물과 완충액 P2는 5:1의 비율에 따라 엄격히 중화되어야 함). |
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샘플 용해 혼합물이 부적절하게 보관되었거나 너무 오랫동안 보관되어 DNA 게놈이 분해되었습니다. |
용해물 혼합물은 4°C에서 5일 동안 보관할 수 있습니다. PCR에는 신선하게 제조한 용해물 혼합물을 사용해 보세요. |
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추가된 템플릿의 양이 적합하지 않습니다. |
반응계의 <5% 범위 내에서 템플릿의 첨가량을 최적화하세요. |
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PCR 사이클 횟수가 부족합니다. |
PCR 사이클 수를 적절히 늘리세요. 바람직하게는 35-40 사이클입니다. 템플릿의 복잡성으로 인해 일반적으로 정제된 DNA 템플릿을 사용하는 것보다 PCR 반응 사이클을 5-10개 더 사용하는 것이 좋습니다. |
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비특이적 증폭 |
PCR 어닐링 온도가 너무 낮거나, 사이클 횟수, 프라이머 농도 또는 템플릿 농도가 너무 높습니다. |
PCR 어닐링 온도를 높이고 PCR 사이클 횟수, 프라이머 농도 또는 템플릿 농도를 낮춥니다. |
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PCR 프라이머 불일치. |
PCR 프라이머를 재설계합니다. |
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PCR 반응 시스템을 제조할 때 온도가 너무 높거나, 제조 후 시간이 너무 깁니다. |
PCR 반응 시스템의 제조는 낮은 온도에서 수행되며, 제조가 완료된 후 가능한 한 빨리 PCR 증폭 반응을 수행합니다. |
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음성대조군에서 타겟밴드가 나타남 |
수술 도구나 시약의 오염. |
실험에 사용되는 모든 시약이나 장비는 오토클레이브해야 합니다. 대상 시퀀스가 샘플 건에 빨려 들어가거나 원심분리관 밖으로 흘러나오지 않도록 취급 시 조심하고 부드럽게 다루십시오. |
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샘플 간 교차 오염. |
각 샘플러는 한 가지 샘플에만 사용합니다. 또는 샘플을 한 번 채취한 후 샘플러 블레이드를 2% 차아염소산나트륨 용액에 담그고 반복해서 헹군 후 깨끗한 종이 타월로 잔여물을 말립니다. |
결제 및 보안
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문의
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자주 묻는 질문
이 제품은 연구 목적으로만 사용되며 인간이나 동물의 치료 또는 진단용으로 의도되지 않았습니다. 제품과 콘텐츠는
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