설명
본 제품은 대장균에서 재조합 단백질 발현으로부터 유래된 박테리오파지 T7 RNA 중합효소입니다. T7 프로모터 서열(5'-TAATACGACTCACTATAG*-3')로부터 이중 가닥 DNA에서 RNA의 5'→3' 합성을 촉매하고 NTP를 기질로 사용합니다. 이중 가닥 선형 블런트 말단 또는 5' 돌출 말단을 갖는 DNA는 T7 RNA 중합효소의 템플릿으로 사용할 수 있으므로 선형화된 플라스미드와 PCR 산물을 RNA의 시험관 내 합성을 위한 템플릿으로 사용할 수 있습니다.
참고: G*는 RNA 전사본의 첫 번째 염기입니다.
본 제품은 GMP 규정에 따라 생산되었으며 액상 형태로 제공됩니다.
특징
- 긴 전사본과 짧은 전사본을 합성하고, 1μg의 DNA 템플릿으로 100-200μg의 RNA를 생산할 수 있습니다.
- 수확량이 더 높고 조작이 쉽습니다.
- 내독소 감소
- 엔도뉴클레아제, 엑소뉴클레아제, RNase의 부재 여부를 테스트했습니다.
애플리케이션
- 방사성 표지 RNA 프로브 준비
- RNA 구조, 처리 및 촉매 작용을 연구하기 위한 RNA 생성
- 안티센스 RNA를 통한 발현 조절
- mRNA, sgRNA 합성
사양
원천 | 대장균 에서 발현 재조합 T7 RNA 중합효소 유전자를 사용하여 |
최적의 온도 | 37℃ |
저장 버퍼 | 50 mM 트리스-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% 트리톤 X-100, 50% (v/v) 글리세린, 25℃에서 pH7.9 |
단위 정의 | 37°C, pH 8.0에서 1시간 이내에 산불용성 침전물에 [3H]GMP 1nmol을 통합시키는 데 필요한 효소 양을 1단위로 정의합니다. |
구성 요소
구성품 번호 | 이름 | 10624ES90(5,000유로) | 10624ES97(50,000U) |
10624 | T7 RNA 중합효소 GMP 등급(50 U/μL) | 100 μL | 1ml(1ml) |
배송 및 보관
T7 RNA 중합효소 GMP 등급 제품은 건조 얼음과 함께 배송되며 -15℃ ~ -25℃에서 1년간 보관이 가능합니다.
그림
그림 1. 표준 RNA는 T7 RNA 합성 키트를 사용하여 시험관 내에서 합성되었습니다.
반응은 37℃에서 2시간 동안 PCR 기기에서 배양한 다음 자기 비드(Cat#12602)로 정제했습니다. 수율 결과는 그림 1에 표시된 대로 NanoDrop 분광기로 분석했습니다.
그림 2. T7 키트를 이용한 다양한 길이의 RNA의 전사 증명은 각각 전기영동도(그림 2A), 모세관 전기영동도(그림 2B), 크로마토그램(그림 2C)에서 확인 가능함
그림 3. 시험관내에서 캡핑된 RNA 합성.
반응은 37℃에서 2시간 동안 PCR 기기에서 배양한 다음 자기 비드(Cat#12602)로 정제했습니다. 수율 결과는 그림 3A에 표시된 대로 NanoDrop 분광기로 분석했습니다. 무결성 결과는 그림 3B에 표시된 대로 모세관 전기영동으로 분석했습니다.
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문의
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자주 묻는 질문
이 제품은 연구 목적으로만 사용되며 인간이나 동물의 치료 또는 진단용으로 의도되지 않았습니다. 제품과 콘텐츠는
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