설명
이것은 야생형 T7 RNA 중합효소에서 유래하고 대장균에서 생산된 엔지니어링된 T7 RNA 중합효소 변종(저 dsRNA)입니다. 이것은 캡 유사체를 효율적으로 통합하는 동시에 이중 가닥 RNA(dsRNA)의 생성을 상당히 감소시키고 야생형 T7 RNA 중합효소와 비교할 수 있는 고효율의 시험관 내 전사(IVT)를 나타냅니다. 이것은 T7 프로모터 서열(5'-TAATACGACTCACTATAG*-3')에서 이중 가닥 DNA의 RNA의 5'→3' 합성을 촉매하고 기질로 NTP를 사용합니다.
참고: G*는 RNA 전사본의 첫 번째 염기입니다.
특징
- dsRNA 수준이 약 1/100000으로 낮아짐
- Trilink CleanCap AG, LZCap과 호환 가능
- WT와 비슷한 높은 수확량
- 하단 캡 입력
- 동물성 원료 불포함(AOF)
구성 요소
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구성품 번호 |
이름 |
10629ES10 |
10629ES60 |
10629ES72 |
10629ES86 |
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(10구) |
(100쿠) |
(250쿠) |
(2,500 KU) |
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10629 |
CleaScrip™ T7 RNA 중합효소(GMP 등급, 낮은 dsRNA, 250 U/μL) |
40 μL |
400 μL |
1ml(1ml) |
10ml(10ml) |
명세서
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원천 |
재조합 T7 RNA 중합효소 유전자를 갖는 대장균 |
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최적의 온도 |
37℃ |
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저장 버퍼 |
50 mM 트리스-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% 트리톤 X-100, 50% (v/v) 글리세린, 25℃에서 pH7.9 |
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단위 정의 |
37°C, pH 8.0에서 1시간 이내에 산불용성 침전물에 [ 3 H] GMP 1 nmol을 통합하는 데 필요한 효소 양을 1단위로 정의합니다. |
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추천 Mg2+ |
30mM 아세트산마그네슘 |
품질관리 기준
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나는 항목 |
사양/표준 |
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효소 활동 |
250 - 300U/μL |
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단백질 순도 |
≥95% |
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내독소 |
<20 EU/mg |
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프로테아제 |
부정적인 |
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엑소뉴클레아제 |
부정적인 |
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니카세 |
부정적인 |
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RNase |
부정적인 |
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대장균 숙주 단백질 |
<50ppm |
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대장균 숙주 DNA |
<10피지/유 |
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마이코플라스마 검사 |
부정적인 |
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Tris NTP는 dsRNA를 시너지적으로 감소시킵니다.
그림
그림 2. 쥐 RAW264.7 세포에서 IVT 제품의 면역원성 평가(그림 2A 및 2B). IFN-β mRNA 및 단백질 수치는 야생형과 비교하여 돌연변이체에서 생성된 mRNA로 형질감염된 RAW264.7 세포에서 감소하였는데, 이는 야생형 T7 RNAP에 의해 합성된 mRNA가 가장 강력한 면역 반응을 유발한 반면 돌연변이체의 mRNA는 상당히 감소된 반응을 보였다는 것을 나타냅니다.
그림 3. 셀룰로스 처리 후 CleaScript™ T7 RNA 중합효소로 합성된 mRNA의 dsRNA 함량은 야생형 효소로 합성된 mRNA의 dsRNA 함량보다 낮습니다.
배송 및 보관
제품은 건조 얼음과 함께 배송되며 -15℃ ~ -25℃에서 1년간 보관이 가능합니다.
출판:
FADS 및 준합리적 설계 수정 T7 RNA 중합효소는 dsRNA 생성을 감소시키고 말단 전이효소 및 RDRP 활동을 낮춥니다.
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