설명
Cap AG (3'Acm)는 m7(3'AcmG)(5')ppp(5')(2'0MeA)pG 구조를 갖는 캡 유사체이며, 분자식은 C 35 H 48 N 16 O 24 P 4 입니다. 그리고 분자량은 1200.75 입니다. 이 제품은 5'AG3'의 초기 시퀀스로 전사에 사용되고, 자연스러운 cap1 구조는 Cap1 전사 캡핑에 의해 생성됩니다. 전통적인 캡핑 방법으로 생성된 Cap0과 비교할 때, CapAG(3'Acm)에 의해 생성된 cap1 구조는 mRNA가 생체 내에서 더 높은 활성과 번역 효율을 가질 수 있게 합니다.
특징
CleanCap과 같은 기존 제품과 비교했을 때, 이 제품은 3'Acm 변형 mRNA 캡 유사체입니다. 이중 결합 구조는 분자 안정성을 향상시켜 뉴클레아제에 의한 인식 및 가수분해에 저항합니다. 3'Acm을 사용하면 5' 말단 캡의 구조를 효과적으로 안정화시켜 mRNA와 진핵 개시 인자(eIF4E)의 결합 능력을 향상시키고 mRNA 번역 효율을 개선합니다. 또한, 이 유형의 캡 유사체는 시험관 내 전사 수율 및 캡핑 효율 측면에서 유망한 데이터를 보여줍니다.
구성 요소
카탈로그 번호 |
이름 |
크기 |
10684 |
LZCap AG(3'Acm)(100mM) |
100 μL |
1ml(1ml) |
제품 세부 정보
분자식 |
C 35 H 48 N 16 O 24 P 4 (유리산) |
분자량 |
1200.75(유리산) |
집중 |
100±3mM |
청정 |
HPLC ≥95% |
수치
그림 1. LZCap 유사체는 번역 개시 인자 eIF4E에 대한 더 강한 친화성을 보여 mRNA 번역을 더 효율적으로 개시할 수 있었습니다. Kd 값이 낮을수록 캡 유사체의 캡 결합 단백질 eIF4E에 대한 친화성이 더 강합니다.
그림 2. LZCap AG 캡 mRNA의 생체 내 발현은 3'OMe 캡 아날로그보다 훨씬 높습니다.
그림 3. LZCap 캡 mRNA는 디캡핑 효소에 더 강합니다. IC50 값이 높을수록 캡 유사체가 디캡핑 효소에 의한 절단을 저항하는 능력이 더 강합니다.
그림 4. LZCap 캡핑 mRNA는 THP-1 세포에서 단일 RNA 자극 면역 인자 전사 수준을 감소시킵니다.
일반 안전 프로필
결과 및 결론 |
|
세포독성 시험 |
변형된 뉴클레오시드는 여러 세포주에서 세포독성을 관찰하지 못했습니다. |
중합효소 억제 연구 |
변형된 뉴클레오시드는 인간 RNA 및 DNA 중합효소의 억제제도 기질도 아니므로 게놈에 통합되지 않습니다. |
에임스 테스트* |
Ames 시험에서는 유전독성이 관찰되지 않았습니다. |
저장
본 제품은 -25~-15℃에서 2년간 보관이 가능합니다.
지침
- 안전과 건강을 위해 이 제품을 사용할 때는 실험실 가운과 일회용 장갑 등 개인 보호 장비(PPE)를 착용하세요.
- 연구 목적으로만 사용하십시오.
자주 묻는 질문
1. LZCap은 어떻게 디자인하나요?
효소는 기질을 비교적 "특정하게" 인식합니다. 따라서 새로운 캡 구조를 설계할 때 한편으로는 특허 목적으로 새로운 구조적 변형이 필요하지만, 다른 한편으로는 가능한 한 자연/알려진 구조와 유사성을 유지하려고 노력합니다. 자연 구조에는 변형될 수 있는 리보스 3' OH가 있습니다(예: 메틸화). 이러한 고려 사항에 따라 특허 신규성을 위해 3' 위치에 탄소를 추가한 다음, OH의 수소 결합을 모방하기 위해 NH를 추가한 다음, NH의 염기성을 줄이고 수소 결합 능력을 향상시키기 위해 아세틸기를 추가하기로 했습니다. LzCap 의 활성은 수소 결합이 증가했기 때문에 메틸화 된 자연 캡 보다 더 좋습니다 . 메틸 및 메톡시기와 비교하여 아세틸 아미노기는 기질(캡)과 개시 인자(효소) 간의 반데르발스 상호 작용을 증가시킬 수도 있습니다.
2. 아세틸 아미노기는 안정한가요?
아세틸 아미노기는 이미 충분히 안정적입니다. 캡의 가장 불안정한 부분인 7-메틸화 위치와 인산디에스테르 결합보다 훨씬 더 안정적입니다.
출판
- 다가 mpox mRNA 백신은 강력한 면역 반응을 유발하고 백신 바이러스에 대한 강력한 보호 효과를 제공합니다. 2024, Cell Reports 43, 114269
- 당뇨병 원숭이에서 mRNA 기반 GLP-1R 작용제의 효능 및 지속 기간에 대한 예비 연구. 2024, 당뇨병, 73
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